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结肠癌患者血浆外泌体表面膜结合型转化生长因子β1表达及其生物学作用
目的:观察结肠癌患者血浆外泌体( exosomes )表面膜结合型转化生长因子β1( mTGF-β1)表达,探讨其生物学作用。方法选取结肠癌患者20例(观察组),同期体检健康者10例(对照组),提取两组血浆exosomes,采用流式细胞仪分析exosomes 表面mTGF-β1表达。从结肠癌患者肝素抗凝全血中分离外周血单个核细胞( PB-MCs),分选获得纯化的CD4+T细胞,采用CD3、CD28诱导细胞增殖,将细胞随机分为三组,A组加入TGF-β1阻断性单抗处理的结肠癌患者血浆exosomes(1μg/mL),B组加入IgG1同型对照抗体处理的结肠癌患者血浆exosomes (1μg/mL),C组加入健康人血浆exosomes(1μg/mL),培养3天时进行台盼蓝染色计数活细胞数;采用ELISA法检测细胞培养上清液中TNF-α和IFN-γ水平。结果观察组血浆exosomes表面mTGF-β1表达阳性率为36.52%±4.26%,高于对照组的9.23%±3.77%(P<0.01)。与C组比较,B组CD4+T细胞数量及其分泌的TNF-α、IFN-γ水平均降低(P均<0.05);与B 组比较,A组CD4+T细胞数量及其分泌的TNF-α、IFN-γ水平均增加(P均<0.05)。结论结肠癌患者血浆exosomes表面高表达mTGF-β1,mTGF-β1表达增加可能是构成结肠癌免疫抑制环境的重要因素,可促进结肠癌的发生、发展。
关键词: 结肠癌 膜结合型转化生长因子β1 外泌体