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  • 糖氧剥夺再灌注对 PC12细胞自噬、凋亡的影响及意义

    作者:陈艾;陈芷;沈兴

    目的:观察糖氧剥夺再灌注对PC12细胞自噬、凋亡的影响,探讨激活自噬调控神经元损伤修复的有效时间窗。方法将高分化的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞随机分为四组,分别置于缺氧(1% O2、5% CO2、94%N2)环境中培养0 h( OGD 0 h组)、1 h( OGD 1 h组)、2 h( OGD 2 h组)、3 h( OGD 3 h组);换用含10%灭活胎牛血清的高糖双抗DMEM培养液,正常条件下继续培养,分别培养0、4、8、12 h;采用CCK-8法检测四组各时间点细胞增殖率,采用 RT-PCR 法检测自噬基因微管相关蛋白2轻链3( LC3-Ⅱ)、凋亡基因Caspase-3相对表达量。结果 OGD 1 h组灌注后各时间点细胞增殖率均高于同时间点OGD 2 h及OGD 3 h组,组间比较P均<0.05;三组再灌注4、8、12 h时细胞增殖率均逐渐降低(P均<0.05),0、4 h时细胞增殖率比较差异无统计学意义(P均>0.05)。四组再灌注4 h时LC3-Ⅱ相对表达量均低于同组0 h,OGD 1 h、OGD 2 h组再灌注4 h时Caspase-3相对表达量均低于同组0 h,OGD 1 h、OGD 2 h组再灌注12 h时LC3-Ⅱ、Caspase-3相对表达量均高于同组4、8 h,组间及组内比较P均<0.05。结论糖氧剥夺再灌注可诱导PC12细胞发生自噬及凋亡,半暗带修复时间窗以糖氧剥夺4 h内为宜。

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