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全反式维甲酸联合顺铂在诱导人头颈癌 TCA8113细胞凋亡中的作用
目的:研究全反式维甲酸(ATRA)与顺铂对人头颈癌 TCA8113细胞凋亡的影响。方法 ATRA 和顺铂单独及联合作用于 TCA8113细胞,采用 MTT 法检测细胞生长,并观察细胞形态变化;使用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡;通过 western blot 实验检测 caspase-3表达情况。结果 ATRA 作用于 TCA8113细胞后,细胞生长明显受到抑制,细胞形态发生改变,细胞凋亡比例明显增加,caspase-3蛋白表达下调,ATRA 与顺铂联合作用于肿瘤细胞后,其抑癌作用加强。结论 ATRA 联合顺铂对人头颈癌 TCA8113细胞具有协同抑癌作用。
关键词: TCA8113 细胞 全反式维甲酸 顺铂 细胞凋亡 -
5-ALA 介导的光动力疗法对人舌鳞癌 Tca8113细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响?
目的::探讨5-氨基酮戊酸介导的光动力疗法(5-ALA-PDT)对体外培养的人舌鳞癌 Tca8113细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法:体外培养 Tca8113细胞,以5-ALA 为光敏剂,半导体激光治疗仪给予光照,设立对照组、低浓度5-ALA-PDT 组(0.05 mmol/ L 5-ALA + PDT 治疗)、高浓度5-ALA-PDT 组(5.00 mmol/ L 5-ALA + PDT 治疗),镜下观察细胞形态的改变;5-ALA 浓度分别设定为0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、5.00、10.00 mmol/ L,各浓度组依次孵育1、2、3、4、6、8 h,然后给予光照刺激,同时设立对照组,MTT 法检测细胞增殖的变化;设置 O 组(正常对照组)、A 组(0.05 mmol/ L 5-ALA)、B 组(0.50 mmol/ L 5-ALA)、C 组(5.00 mmol/ L 5-ALA),给予光照刺激,流式细胞术检测细胞凋亡情况;设置 D 组(5-ALA-PDT 干预组),E 组(对照组),流式细胞术检测细胞周期的改变。结果:镜下可见5-ALA-PDT 作用后细胞形态改变,细胞皱缩变圆。 MTT 法检测结果显示5-ALA-PDT 可抑制 Tca8113细胞增殖(F5-ALA =2859.796,F时间=237.820,F交互=16.687,P 均<0.001)。 B、C 组与 O 组比较,早期凋亡率、晚期凋亡率、坏死率增加(P 均<0.05)。5-ALA-PDT 作用后 G0/ G1期细胞多于对照组,G2/ M 期、S 期细胞少于对照组(t =57.275、7.164、45.157,P 均<0.001)。结论:5-ALA-PDT 能抑制 Tca8113细胞增殖,诱导细胞凋亡,并将细胞阻滞在 G0/ G1期。
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抗角蛋白抗体进入活细胞的共聚焦显微镜观察
目的观察抗角蛋白抗体能否进入活细胞. 方法以鼠单克隆抗体(mAb)IgG作用于培养中的人Tca8113细胞, 以黑素瘤细胞和抗HBsAg抗体作用的Tca细胞作为阴性对照.细胞固定后与FITC标记的羊抗鼠IgG结合, 用荧光显微镜及共聚焦显微镜, 观察细胞的荧光着色. 结果抗角蛋白mAb作用的Tca8133细胞胞浆呈亮绿色, 着色较均匀, 细胞核未见着色.两种对照均未见着色. 结论抗角蛋白mAb可进入活细胞, 并结合于胞浆成分.
关键词: 抗角蛋白单克隆抗体 TCA8113 细胞 共聚焦显微镜 -
抗角蛋白抗体在活细胞反应部位的观察
目的: 观察抗角蛋白抗体在活细胞的反应部位.方法: 以鼠抗人角蛋白的IgG单克隆抗体作用于培养中的Tca8113,以抗乙肝病毒表面抗原抗体做阴性对照,同时设置阳性对照和空白对照.细胞固定、包埋后与FITC标记的羊抗鼠IgG结合,用荧光显微镜观察细胞的荧光着色;以胶体金标记的羊抗鼠IgG抗体染色,用透射电镜观察胶体金颗粒的部位.结果: 抗角蛋白mAb作用的Tca8133细胞胞质呈亮绿色,着色较均匀,细胞核未见着色.两种对照均未见着色.抗角蛋白抗体作用的Tca8133细胞胞质的中间丝有胶体金颗粒,与阳性对照组类似.阴性对照组及空白对照均未见胶体金颗粒.结论: 抗角蛋白抗体可以进入活细胞,并结合于胞质中间丝.