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重组γ-干扰素作用人Tenons囊成纤维细胞体外研究
目的体外研究人重组γ-干扰素对人Tenons囊成纤维细胞作用.方法以人Tenons囊成纤维细胞作为实验对象,分别加入0.1~106 U/ml人重组γ-干扰素(IFN-γ)、0.001~10 mg/L丝裂霉素(MMC)、0.1~103 mg/L 5-氟尿嘧啶(5-Fu)孵育48 h,然后以MTT法进行检测.结果高浓度和低浓度IFN-γ实验组OD值较对照组升高(P<0.05),中间浓度IFN-γ实验组OD值较对照组低(P<0.05).IFN-γ的抑制率较MMC及5-Fu低(P<0.005).结论IFN-γ对体外培养的人Tenons囊成纤维细胞具有促增殖及抑制增殖双向调控作用,其抗增殖作用较MMC及5-Fu弱.
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兔Tenon's囊组织原代成纤维细胞分离培养与鉴定
目的:改良和补充兔Tenon's囊组织原代成纤维细胞的分离培养、鉴定方法,为开展抗青光眼术后滤过泡瘢痕化的药物研究提供成熟的原代成纤维细胞.方法:应用组织块培养法,无菌条件下摘取组织,机械剪碎,于含10%胎牛血清的DMEM中培养,显微镜下观察细胞形态,免疫荧光法鉴定,实时荧光定量PCR法检测细胞波形蛋白、角蛋白的mRNA水平.结果:分离培养的细胞具有成纤维细胞形态,7-10 d从组织块周围大量爬出,15 d铺满培养皿;免疫荧光法鉴定显示,波形蛋白表达阳性,角蛋白阴性表达;实时荧光定量PCR检测出细胞中波形蛋白mRNA水平远远高于角蛋白.结论:改良和补充了兔Tenons囊组织成纤维细胞原代培养与鉴定方法,为后续青光眼术后滤过泡抗瘢痕化的药物研究奠定基础.