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4例无心跳者供肝切取与修整的体会(摘要)
1997年4月~10月,对4例无心跳者进行了肝脏的快速切取和修整,并对1例实施了临床肝脏移植,取得满意的临床效果.4例供体均为男性,无肝炎病史.均为开放性颅脑损伤致死者.术前准备取肝手术器械1套、普通冰1桶、无菌冰2盒、以及灌注液、插管用管道、消毒物品、秒表等.供者仰卧位,腰部垫枕,手术采用腹部大十字切口进腹,迅速检查肝脏外观、质地有无异常,有无肿块.将肝脏周围覆以冰屑,快速进行肠系膜上静脉插管至门静脉主干,开始灌注冷乳酸林格氏液.剪开膈肌,于近心包处剪断下腔静脉,作为肝静脉血液及灌注液的流出道.
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近交系小耳猪肾、小肠组织中α-Gal抗原分布的研究
随着器官移植工作的广泛开展,同种供体远远不能满足临床治疗的要求.目前科学研究正积极寻找可供人体器官移植的异种供体,以满足临床需要,而猪被认为是理想的异种供体之一.但猪-人异种移植的主要障碍是供体器官或组织中的异种抗原(α-半乳糖抗原, α-galactose residues,α-Gal)引起的超急性排斥反应.研究猪组织器官内α-Gal的分布情况,对猪进行基因改造,以达到猪-人异种器官移植的目的具有重大意义.本实验选用两种方法对猪肾、小肠内α-Gal抗原分布进行研究,以筛选更敏感的α-Gal检测方法.实验选用近交系中国西双版纳小耳猪(近交系数为0.9 0以上)的肾、小肠(12指肠、空肠、回肠)标本,甲醛固定,常规石蜡制片,片厚6μm. 以16、8、4μg/ml三种浓度的生物素标记的BSI-B4作为亲和物,切片孵育3 0分钟(37℃)、24和48小时(4℃),分别与SP(工作浓度1:10)、SABC 结合,DAB呈色后观察.结果为:1.SABC方法:三种不同浓度的BSI-B4在肾近曲小管上皮细胞、小肠绒毛上皮细胞及固有膜内淋巴细胞的胞浆内均有棕黄色反应,以8 μg/ml BSI-B4孵育24小时的结果为优,4μg/ml的浓度,4℃孵育48 小时,亦可获得与8μg/ml相似的结果,而16μg/ml的浓度则有较深的背底.2 .SP方法:16μg/ml BSI-B4孵育24小时(4℃)的结果与SABC法的8 μg/ml相似,但阳性反应稍弱且背底较深;8、4μg/ml两种工作浓度孵育24小时甚至更久,肾及小肠标本均显示阴性结果.因此,通过实验得出SABC法的敏感性要优于SP法.在对不同组织或器官进行α-Gal抗原分布检测的研究中,应首选SABC方法,既可获得较准确的抗原定位又可节省试剂.
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原位灌注肝肾联合快速切取方法的改进及临床应用
目的探索适用于临床的肝肾联合切取方法。方法在动物原位灌注肝肾联合快速切取实验研究的基础上,进行12例次肝肾联合切取,其中7例肝脏切取前未行灌注,5例实施原位灌注后肝肾联合快速切取。结果成功获取可资利用的大器官27个,施行5例同种异体肝脏移植和22例肾移植。所切取的器官5例肝移植通血后10min内有金黄色的胆汁泌出,术后每日分泌胆汁约200mL;22例肾移植通血后1~10min内有尿液泌出,术后每日排出尿液约2000mL。结论原位灌注肝肾联合快速切取是理想的临床供器官(肝、肾)切取方法,不仅充分利用了供体器官;而且可缩短热缺血时间,提高移植器官保存质量,降低器官的废弃率。