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芝莲化癥颗粒对荷瘤小鼠的免疫功能效应研究
目的:对芝莲化瘕颗粒影响荷瘤小鼠的免疫功能进行科学的实验研究,为确定该制剂的功能主治和临床疗效提供依据.方法:制备H22肝癌实体瘤荷瘤小鼠模型,选取主要指标:巨噬细胞吞噬百分率、吞噬指数,溶血素、溶血空斑的形成,外周血淋巴细胞转化率,进行各项对比实验.结果:芝莲化瘕颗粒以30 g·kg-1、15 g·kg-1、7.5 g· kg-1的剂量给荷瘤小鼠连续10天灌服,中剂量组可显著提高荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数,大剂量组可显著促进荷瘤小鼠溶血素及溶血空斑的形成,可显著提高荷瘤小鼠外周血淋巴细胞转化率.结论:芝莲化瘕颗粒能够显著提高感染H22肝癌实体瘤小鼠的肌体免疫力,其功能主治项可以描述为:能够显著提高肌体免疫力,缓解肝细胞癌对肝脏的损害,延长生存期.
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从细胞自噬角度探讨紫草多糖抑制H22肝癌实体瘤细胞增殖的作用机制
目的：探讨紫草多糖是否通过诱导自噬而抑制H22肝癌实体瘤细胞的增殖。方法：将40只KM小鼠随机分为模型组、环磷酰胺组（阳性药物，30 mg/kg，ip，每4 d给药1次）和紫草多糖低、高剂量组（100、300 mg/kg，ig，每天给药1次），每组10只。各组小鼠均腋下接种H22细胞株复制H22肝癌实体瘤模型，造模同时各给药组小鼠给予相应药物，模型组小鼠ig等体积生理盐水。末次给药后，记录并测定小鼠体质量、瘤质量系数和胸腺、脾脏指数；采用实时荧光定量聚合酶链式反应法测定小鼠瘤组织中自噬相关基因Atg5、Beclin1 mRNA表达水平；Western blot法测定瘤组织中自噬微管相关蛋白1轻链3A/B（LC3A/B）蛋白表达水平。结果：紫草多糖可显著降低H22实体瘤小鼠的瘤质量系数，抑瘤率达34.7％；可显著上调瘤组织中自噬相关基因Atg5、Beclin1 mRNA的表达和LC3A/B蛋白的表达，较模型组差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。结论：紫草多糖通过促进肝癌细胞的自噬，从而抑制H22肝癌实体瘤细胞的增殖、延缓肿瘤生长。
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水蛭素活性成分对P53基因及血管内皮刺激因子表达的影响
目的:探讨水蛭素活性成分抗肿瘤的作用靶点,为临床用药提供理论依据.方法:①肝癌实体瘤实验:取小鼠左前腋下接种H22肝癌瘤细胞0.2ml/只,次日开始灌胃给药,模型对照组给予生理盐水,阳性对照组给予5-FU,中药组分别给予不同剂量的水蛭素活性成分,连续用药14d,于第15d处死动物,剥离肿瘤.②p53基因与血管内皮刺激(VEGF)因子表达:将剥离的肿瘤组织固定于福尔马林溶液中,包埋,切片,染色,进行免疫组化.p53基因阳性表达定位于细胞核,染色呈棕褐色.血管内皮刺激因子阳性表达定位于细胞浆,染色呈棕黄色.高倍镜下随机观察5个视野,每个视野计数200个细胞,阳性细胞占肿瘤细胞数的多少分为:细胞核内和细胞浆内未见染色颗粒为阴性(-),百分数在11～30%之间为弱阳性(+),百分数在31～50%之间为阳性(++),百分数平均大于50%为强阳性(+++).结果:实验表明,水蛭素活性成分对H22肝癌实体瘤具有明显的抑制作用,抑瘤率分别为4.9.46%和38.83%；同时,水蛭素活性成分能抑制荷瘤鼠p53基因与血管内皮刺激因子的高表达.结论:水蛭素活性成分对H22肝癌实体瘤P53基因及血管内皮刺激因子具有显著的影响.
