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左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马神经元GR、NR2A及NR2B的影响
目的 研究左归降糖解郁方(ZGJTJYF)对模拟糖尿病并发抑郁症(diabetes mellitus with depression,DD)环境下大鼠胎鼠海马神经元糖皮质激素受体(Glucocorticoid Receptor,GR)、N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate,NR)亚基NR2A和NR2B的影响.方法 分离、纯化、培养并鉴定胎鼠海马神经元(neuron,NE),将培养的海马神经元随机分为5组:空白组、空白血清组、模型组、阳性药物(二甲双胍+氟西汀)合药血清组和ZGJTJYF含药血清组.模型组、阳性药物组、ZGJTJYF组分别给予葡萄糖(150 mmol·L-1)和皮质酮(200 μmol·L-1)用以构建模拟糖尿病并发抑郁症(DD)环境下海马神经元体外模型,阳性药物组和ZGJTJYF组分别给予10％相应含药血清,另空白血清组加入10％空白血清,干预18 h.采用高内涵细胞成像分析技术(High Content Analysis,HCA)检测GR、NR2A和NR2B蛋白的表达.结果 与空白血清组相比,模型组GR蛋白表达降低,NR2A、NR2B蛋白表达升高;与模型组相比,阳性药物组和ZGJTJYF 组GR表达上升,NR2A、NR2B蛋白的表达明显降低.结论 左归降糖解郁方对模拟DD环境下海马神经元GR、NR2A及NR2B蛋白的调控作用,可能是抗DD大鼠神经元损伤的保护机制之一.
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左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症胎鼠海马神经元NR-5-HT信号轴的影响
目的:研究左归降糖解郁方(ZGJTJYF)对模拟糖尿病并发抑郁症(Diabetes mellitus with depression,DD)环境下大鼠胎鼠海马神经元N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NR)-5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)信号轴的影响.方法:分离、纯化、培养并鉴定胎鼠海马神经元,将培养的海马神经元随机分为6组:空白组、空白血清组、模型组、氟西汀+二甲双胍阳性药组、左归降糖解郁方组和NR阻断剂MK-801组.除空白组和空白血清组外,其余各组分别给予葡萄糖(150 mmol/L)和皮质酮(200 μmol/L)用以构建DD海马神经元体外模型,氟西汀+二甲双胍阳性药组和左归降糖解郁方组分别给予10％相应舍药血清,阻断剂组加入100 mmol/L MK-801,干预18 h.采用高内涵细胞成像分析技术(High Content Analysis,HCA)检测NR2A、NR2B和5-HT1AR蛋白的表达;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测NR2A、NR2B、5-HT1AR基因的表达.结果:与空白组比较,模型组NRs蛋白和基因表达显著升高,5-HT1AR则表达显著降低;与模型组比较,氟西汀+二甲双胍阳性药组和左归降糖解郁方10％含药血清组可以逆转上述表达;使用阻断剂后NRs蛋白和基因表达明显降低,5-HT1AR蛋白含量显著升高,但基因表达显著降低.结论:左归降糖解郁方抗DD海马神经元损伤,可能与调控NR-5-HT信号轴有关.
