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小鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为神经元样细胞的实验研究
目的:探讨体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞(mouse marrow mesenchymal stem cells,mMSCs)分化为神经元样细胞的条件.方法:密度梯度离心结合差异贴壁法分离、纯化mMSCs,胰蛋白酶消化传代扩增mMSCs.用适浓度的β-疏基乙醇(BME)+神经生长因子(NGF)、NGF+全反式维甲酸(ATRA)、NGF+BME+ATRA作为诱导剂,观察诱导期间细胞的形态变化,并用免疫细胞化学法鉴定神经元烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)的表达,行甲苯胺蓝染色显示尼氏小体.结果:(1)免疫细胞化学显示NGF+BME+ATRA诱导组诱导效率高,78%细胞表达NSE,80%细胞表达NF;(2)各诱导组尼氏染色均出现尼氏小体.结论:NGF、BME、ATRA能诱导mMSCs分化为神经元样细胞,其中以NGF(10μg/L)+BME(2.5mM/L)+ATRA(2.5M/L)组效率高.
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NGF和BME对小鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的作用
目的探讨神经生长因子(NGF)β-疏基乙醇(BME)诱导小鼠骨髓间充质干细胞(mousenarrow mesenchmal stem cells,mMSCs)分化为神经元样细胞的作用.方法密度梯度离心结合差异贴壁法分离、纯化mMSCs,用血小板源性生长因子(Platelet Derived Growth Factor,PDGF-BB)和表皮生长因子(Epidermal Growth Facotro,EGF)刺激促进mMSCs分裂增殖.以NGF和BME为诱导剂,观察诱导期间细胞的形态变化,并用免疫细胞化学法鉴定神经元烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,甲苯胺蓝色法显示尼氏小体.结果免疫细胞化学显示:70%细胞表达NSE,74%细胞表达NF;实验组行尼氏染色出现尼氏小体.结论NGF和BME能诱导mMSCs分化为神经元样细胞,而且具有较高的诱导效率.
