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凝胶染色文献资料
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大鼠胰腺癌组织蛋白组学分析
我们诱导形成与人类胰腺癌的病理生物学特性很相近的大鼠胰腺癌[1],并将大鼠胰腺癌组织作为研究对象,进行双向电泳和质谱分析,初步筛选胰腺癌组织与正常胰腺组织中的差异蛋白质。一、材料与方法清洁级SD大鼠70只,随机分为模型组50只和假手术组20只。模型组将二甲基苯并蒽(DMBA)植入胰腺被膜内并荷包缝合后关腹。假手术对照组只进行荷包缝合。术后两个月处死。所有胰腺组织取下后,各取1块组织行苏木素-伊红(HE)染色,进一步确认癌组织及良性组织。分别取胰腺癌模型及正常胰腺组织,参照文献[2]方法制备组织总蛋白。等电聚焦主要按IPGphor电聚焦系统指南以及Rajcevic等[3]的方法优化进行。为了减小误差,每份蛋白样品重复电泳3次。凝胶染色参照文献[4]优化进行。
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一种降低聚丙烯酰胺凝胶考马斯蓝染色背景的方法
在聚丙烯酰胺凝胶染色时,考马斯蓝常常沉淀于凝胶表面,从而影响对较弱显色带的检测,而且不美观.在染色完成后,将凝胶用100%(v/v)甲醇溶液处理1 min,然后放入脱色液或蒸馏水中,此间轻轻摇动,可有效地降低染色背景.通过对照试验证明此法甚为有效.乙醇、丙酮与甲醇有同等之脱色效果,异丙醇稍差.5～20 g/dl的聚丙烯酰胺凝胶经甲醇处理5 min不会造成损坏.
