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酚试剂分光光度法测定工作场所空气中甲醛的方法优化
目的 优化<工作场所空气有毒物质检测脂肪族醛类化合物>(GBZ/T160.54-2007)中甲醛的酚试剂分光光度法的实验条件.方法 分析酚试剂浓度、显色剂酸溶解条件、入射光波长、显色温度和显色时间等因素对实验结果的影响并加以优化.结果 该方法的检出限为0.017 mg/L,低检出浓度为0.029 mg/m3(以采集3L空气计),线性范围0.05～5.0 mg/L.结论 该方法检出限低、灵敏度优、线性范围宽,在一般室温条件下无须恒温水浴.
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调味品中玫瑰红B的检验方法优化
优化后调味品中玫瑰红B的测定方法与原有方法相比,降低了检验成本,提高了回收率,便于批量处理样品,保证了实验室调味品中玫瑰红B的检验效率.
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三种人精子优化方法对精子参数及获能比较研究
优化处理精子是决定卵细胞受精率高低，受精卵卵裂好坏的前提［1］，而提高精子体外活动能力又是精子能否具有受精能力的重要指标，精子在体外培养基中孵育一段时间后，充分获能才具有受精能力。本研究观察3种方法优化精子及精子在体外获能过程，探讨在体外受精(IVF)胚胎移植(ET)过程中较合适的精子处理方法。
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鹿骨类药材DNA提取方法研究
目的:建立一种简便、实用、高效的鹿骨DNA提取方法,为动物骨类药材真伪鉴别奠定基础.方法:取净制后的梅花鹿骨、马鹿骨、牛骨、狗骨、猪骨样品,经干燥、研磨粉碎后,对脱钙时间(24,48,72h),脱钙温度(4,25,37,56,70℃)及不同提取方法(改良SDS提取法、试剂盒提取法)进行考察,分析比较不同提取方法获得的DNA质量.结果:实验证明,脱钙过程有助于骨细胞的裂解,在较宽泛的脱钙时间及脱钙温度下,均可从骨细胞中获得DNA,但提取量稍有差异.结论:骨粉经0.5mol·L(-1)EDTA脱钙液4℃脱钙24h,加入裂解液后56℃水浴1h,即可从鹿骨(约0.1g)中提取到高质量DNA,用于PCR扩增.
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氧化铝固相萃取小柱在苦参生物碱含量测定中的应用
该文使用中性氧化铝Cleanert Alumina-N-SPE小柱(0.5 g/6 mL),洗脱剂为三氯甲烷-甲醇(7∶3)5 mL,代替氧化铝开放柱(100 ～ 200目,5 g,内径1 cm),依次以三氯甲烷、三氯甲烷-甲醇(7∶3)各20 mL进行洗脱对苦参药材供试液进行处理,该方法优化洗脱溶剂使用种类和数量,并优化了苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱含量测定的色谱条件,将2010年版《中国药典》中流动相条件乙腈-无水乙醇-3％磷酸溶液(80∶ 10∶ 10)优化为乙腈-无水乙醇-3％磷酸溶液(84∶6∶10);简化了2010年版《中国药典》规定苦参药材供试液的前处理,缩短了样品处理时间,减少了洗脱溶剂,结果更为准确可靠,适合苦参药材中含量的测定,提高苦参药材中苦参生物碱含量测定的工作效率.
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连翘苷含量测定方法优化研究
目的:改进《中国药典》2015年版连翘项下连翘苷含量测定方法.方法:优化连翘苷含量测定方法,简化供试品溶液制备方法.结果:优化后的连翘苷含量测定方法操作简便快捷,连翘苷在0.179 1～17.905 3μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(R2=0.999 9),回收率平均值为99.9％(RSD为1.4％),与原方法测定结果一致.结论:改进后方法操作简便,重复性好.
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基于毛细管区带电泳的IgG2型单抗电荷异质性分析方法的建立
目的 建立IgG2型单抗毛细管区带电泳(CZE)电荷异质性分析方法.方法 通过对三乙基四胺(TETA)和6-氨基己酸(EACA)浓度,以及电泳缓冲液pH和毛细管分离温度等参数进行优化,建立能够有效分离和定量IgG2单抗电荷异构体的CZE分析方法,并对该方法进行方法学验证和应用评价.结果 TETA和EACA浓度,以及电泳缓冲液pH和毛细管分离温度的变化,会影响IgG2单抗的电荷异构体分离效果,通过一系列参数的优化,终确定了方法参数(400 mmol·L-1EACA/0.05％ TETA,pH 6.2,分离电压30 kV,分离温度35℃).建立的CZE分析方法可以有效地对IgG2单抗电荷异构体进行分离,并具有良好的精密度,峰面积的RSD值小于3.0％.该方法同样适用于IgG1和IgG4型单抗的电荷异质性分析,同时,根据电泳图谱和迁移时间,能够对不同亚型和靶点的单抗进行有效的区分鉴别.结论 建立的IgG2型单抗毛细管区带电泳方法,可有效分离电荷异构体,并具有良好的精密度,可作为平台方法应用于IgG2型单抗的电荷异质性分析和鉴别.
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正交试验法优化虎杖提取工艺的实验研究
虎杖系蓼科植物虎杖的干燥根茎及根,可用于治疗宫颈糜烂慢性盆腔炎、阑尾炎、气管炎、高血压、乙肝、银屑病和因放疗引起的白细胞减少症等疾病.虎杖的化学成分主要为蒽醌类,其中大黄素的含量较高.本实验采用四因素三水平等水平正交试验L9(34)[4],选择大黄素含量和浸膏收率二项综合评分的方法优化虎杖的提取工艺,为虎杖单方或复方制剂生产提取提供了试验依据.
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疾控中心信息化建设管理方法的探讨
SARS之后,疾病预防控制中心在社会生活中的知名度和地位有了很大的提高,担负的责任也愈加重要,各级疾控机构都在不断的探索加强自身建设的方法;其中,疾控中心的全面信息化,提高机构效能是重要的组成部分,对此,各级疾控中心都提出了建设现代化疾控中心的战略目标,大力加强了信息化硬件基础建设和业务软件的开发应用,促使从机构管理模式到业务应用开展都建立在高度信息化的基础上,促进管理方法优化,提高业务应用水平,在信息化实践过程中,我们体会到积极、务实的理念和方法对信息化建设的成败有着关键的影响;
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青霉素类抗生素反相高效液相保留值预测
液相色谱保留值的预测一直是色谱领域里研究为活跃的领域之一,但目前没有真正的以少系数求算和预测色谱保留值的方法.本研究应用统计热力学理论建立指数库,可以有效地预测青霉素类抗生素的保留值,为药物分析工作者进行色谱方法建立研究提供了参考、指导,避免了工作上的盲目,具有重要的实验价值和理论指导意义.首先,本研究应用多元混合物分离理论[1]采用方法优化的手段寻找出一个高效液相色谱系统,可同时分离9种青霉素类抗生素药物,在此基础上应用卢佩章、戴朝政先生统计热力学理论lnk'=a+cCB[2,3],建立了青霉素类抗生素的a、c指数库,应用此指数库可以有效的预测青霉素类抗生素的色谱保留值.
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伊曲康唑注射液无菌检查法的建立及方法优化研究
通过对伊曲康唑注射液无菌检查法的建立及方法优化研究,筛选出适合该药品质量控制更为有效的无菌检查法.方法参照《中国药典》2010年版二部无菌检查法建立伊曲康唑注射液的无菌检查法并对方法优化筛选,分别选择0.1％蛋白胨水溶液,pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液,0.9％无菌氯化钠溶液为冲洗液,采用薄膜过滤法,以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌和黑曲霉菌为试验菌进行方法学验证.建立了3种不同稀释液和前处理方式处理的薄膜过滤法,即有3种方法可用于伊曲康唑注射液的无菌检查.该药品的无菌检查法可选用3种中的任意1种进行无菌检查.方法2与方法1所选冲洗液不同,检查效果相同,而0.1％蛋白胨水溶液的使用成本更为低廉.方法3虽较好的模拟了该产品使用前的配制过程,冲洗量也较少,但过程略显繁琐,且稀释冲洗过程有样品结晶状况的发生,不利于过滤.综合分析后建议选择方法1(取伊曲康唑注射液20支,采用薄膜过滤法处理,以0.1％蛋白胨水溶液为冲洗液,冲洗量:500 mL/膜,100 mL/次,以白色念珠菌为阳性对照菌)进行伊曲康唑注射液的无菌检查法.结论选择方法1,作为伊曲康唑注射液的无菌检查法,所建立的方法简便、准确、可靠、重现性好.
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改进后的方法检测油炸、烧烤食品中苯并(a)芘与国标法对比分析
目的 对苯并(a)芘检测国标方法的样品前处理、高效液相色谱法的色谱条件进行优化改进,以适应对大批量样本的检测.方法 分别用食品中苯并(a)芘的检测国标方法和改进后的方法对油炸、烧烤样品进行前处理,用优化改进后的高效液相色谱法检测苯并(a)芘含量.结果 样品量n=10,自由度v=9,∑d=0.03,计算得t=0.535 7,查附表(t临界值表)双侧t 0.05/2(9)=2.262＞t.结论 按a=0.05水准,P＞0.05,不拒绝H0,可认为国标方法的样品前处理和优化改进后的高效液相色谱法测定油炸、烧烤食品中苯并(a)芘的含量差异无统计学意义.
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优化化妆品中15种防晒剂的检测方法
目的 优化《化妆品安全技术规范》中的苯基苯并咪唑磺酸等15种组分的检测方法,使其可以准确测定出实际样品中T150、T-M和T-S3种防晒剂成分的含量.方法 采用四氢呋喃提取化妆品并过滤,AQ-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离.以甲醇、四氢呋喃-高氯酸(300∶0.2,V/V)为色谱分离流动相进行梯度洗脱,经二极管阵列检测器检测.结果 15种防晒剂均能准确定量,各组分在1.274 μg/ml ～1 033.2μg/ml呈良好线性关系,相关系数(r) ≥0.999 6,回收率为93.8％～ 114.0％,相对标准偏差(RSD)为1.64％～4.59％.结论 本法能对实际样品中的T150、T-M和T-S3种防晒剂成分准确定量,有助于更好地监督特殊类化妆品的质量.
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木蝴蝶薄层色谱鉴别方法探讨
目的 优化木蝴蝶的薄层色谱鉴别方法.方法 采用薄层色谱法.从供试品及对照品溶液的制备、色谱条件的选择等方面进行优化实验.结果 新方法得到的薄层色谱图斑点清晰,分离效果好.结论 新方法具有样品取样量少,提取分离效果好,斑点清晰,操作简便、省时,重复性好等优点.
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大鼠胰腺癌组织蛋白组学分析
我们诱导形成与人类胰腺癌的病理生物学特性很相近的大鼠胰腺癌[1],并将大鼠胰腺癌组织作为研究对象,进行双向电泳和质谱分析,初步筛选胰腺癌组织与正常胰腺组织中的差异蛋白质。一、材料与方法清洁级SD大鼠70只,随机分为模型组50只和假手术组20只。模型组将二甲基苯并蒽(DMBA)植入胰腺被膜内并荷包缝合后关腹。假手术对照组只进行荷包缝合。术后两个月处死。所有胰腺组织取下后,各取1块组织行苏木素-伊红(HE)染色,进一步确认癌组织及良性组织。分别取胰腺癌模型及正常胰腺组织,参照文献[2]方法制备组织总蛋白。等电聚焦主要按IPGphor电聚焦系统指南以及Rajcevic等[3]的方法优化进行。为了减小误差,每份蛋白样品重复电泳3次。凝胶染色参照文献[4]优化进行。
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O1群和O139群霍乱弧菌荧光PCR快速检测方法的建立
目的 建立检测O1群和0139群霍乱孤菌的实时荧光聚合酶链反应(荧光PCR)方法,并进行优化和评价.方法 根据O1群和O139群霍乱弧菌O抗原编码基因设计探针和引物,建立同时检测霍乱弧菌O1群和O139群的荧光PER方法,并对体系中的引物、Mg2+、dNTP和Taq酶进行优化,然后对建立的方法进行特异性、灵敏性、重复性的评价,并进行224份河口水样本的检测.结果 建立了检测O1群和O139群霍乱孤菌的双重荧光PCR方法,对非O1群和O139群霍乱弧菌无扩增反应,敏感度比常规分离培养高.结论 以O抗原编码基因为目标检测片段建立了O1群和O139群霍乱弧菌双重荧光PCR检测方法,可用于疑似霍乱弧菌感染的样本常规分离前的快速筛查.
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原代鸭肝细胞的原位灌流分离法
目的:探索优化的原代鸭肝细胞分离方法,为鸭肝细胞在体外研究中的应用奠定基础.方法:分别采用胶原酶(I型与Ⅳ型)经门静脉或胆总管原位灌流分离鸭肝细胞,观测肝细胞产量、存活率及其形态.结果:1.经门静脉原位灌流分离鸭肝细胞效果明显优于经胆总管灌流法;2.以右心室为灌流液流出道分离鸭肝细胞效果明显优于经下腔静脉流出道分离法:3.Ⅰ型胶原酶与Ⅳ型胶原酶灌流分离鸭肝细胞效果相当.结论:采用Ⅰ型或Ⅳ型胶原酶经门静脉-右心室原位灌流分离鸭肝细胞为-较好的方法,有利于鸭肝细胞为模型的体外研究工作的开展.
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D-半乳糖致小鼠亚急性衰老模型方法优化
目的:优化D-半乳糖致小鼠亚急性衰老实验中,腹腔注射法和皮下注射法的佳造模剂量.方法:8周龄雄性ICR小鼠随机分为8组,分别为正常对照组、腹腔注射D-半乳糖组(1.25g/kg、2.5g/kg和5.0g/k)和腹腔注射D-半乳糖联合亚硝酸钠组(1.25g/kg+ 0.08g/kg-NaNO2),皮下注射组D-半乳糖组(0.125g/kg和0.5g/kg)和皮下注射组D-半乳糖联合亚硝酸钠组(0.125g/kg+ 0.08g/kg).连续给药第7周测定各组小鼠空腹血糖情况,8周后解剖,计算脏器指数,检测血清、脑组织和肝脏组织中生化指标变化,同时对肝脏进行石蜡切片.结果:腹腔注射D-半乳糖2.5g/kg可显著提高血清中TC和TG含量,降低脑组织中GSH水平;皮下注射D-半乳糖0.5g/kg显著提高血清中TC、TG和脑组织中MDA含量,并降低脑中GSH水平;肝脏石蜡切片显示以上两组的小鼠肝组织排列疏松,体现衰老状态.结论:腹腔注射D-半乳糖2.5g/kg和皮下注射D-半乳糖0.5g/kg使小鼠整体表现出衰老症状,可分别作为D-半乳糖致小鼠亚急性衰老腹腔注射和皮下注射的佳造模剂量.
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噬菌体控制植物细菌性疾病的研究进展
尽管植物的病原菌大多数为真菌,但细菌也是引起农业经济损失的主要原因之一.由于缺乏有效的杀菌剂,且细菌产生了耐药性,植物细菌性疾病的爆发通常是难以控制的.目前,噬菌体具有替代传统化学农药的潜力,使用噬菌体防治植物细菌性疾病正处于一个快速发展的阶段,商业化的噬菌体产品已被用于植物疾病的防治.在农业中,限制噬菌体使用的主要因素是环境影响和抗性宿主菌的产生.为降低环境因素对噬菌体的干扰,可使用保护剂、避免阳光直射以及使用无毒或减毒的菌株等方法来解决.同时,可使用噬菌体鸡尾酒(噬菌体混合液)进行细菌抗性管理.在未来,噬菌体治疗会作为植物疾病控制综合管理的一部分,并具有广阔的发展前景.
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用循证医学的方法优化门诊药房工作流程
循证医学(Evidence Based Medicine)即遵循科学证据的医学,认为任何医疗决策都应基于客观的临床科学依据[1].循证医学在临床医疗的具体实践过程是:提出问题、收集证据、评价证据及应用证据[2].我们尝试将循证医学的临床医疗具体实践过程应用于优化我院门诊药房的工作流程,取得了较好效果.
