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曲古抑菌素A对肾癌细胞系GRC-1生长的抑制作用
目的 研究组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制药曲古抑菌素A(TSA)对肾癌GRC-1细胞生长的影响及其作用机制.方法 使用TSA处理GRC-1细胞.噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长;流式细胞仪分析细胞凋亡及细胞周期;Western blot免疫印迹分析p53,p21和bcl-2表达.结果 TSA能明显抑制GRC-1细胞的增殖,且具有明显的剂量依赖性;TSA处理72 h的GRC-1细胞早期凋亡率明显提高,G0/G1期细胞比例显著升高,S期细胞比例显著降低.TSA能够明显下调bcl-2的表达,上调p21的表达,而对p53的没有显著影响.结论 TSA可以通过诱导肾肿瘤细胞的凋亡和周期阻滞而抑制癌细胞生长;其发生机制可能与下调抗凋亡基因bcl-2和上调肿瘤抑制基因p21的表达有关,TSA可能依赖非p53途径调控p21的表达.
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软木酰苯胺氧肟酸免疫调节功能研究
目的 通过体外实验观察软木酰苯胺氧肟酸(SAHA)对效应T细胞和调节性T细胞的作用.方法 ①淋巴细胞增殖的检测:取CFSE标记的淋巴细胞、CD+4或CD+8T细胞作为反应细胞,实验组加入不同浓度SAHA及CD3/CD28单抗作为刺激原培养,设阴性对照组(仅加入CD3/CD28单抗)和空白对照组,96 h后检测各组细胞增殖情况;②以淋巴细胞作为反应细胞,实验组中加入不同浓度SAHA及CD3/CD28单抗作为刺激原培养,设阴性对照组(仅加入CD3/CD28单抗)和空白对照组.96 h后检测各组CD+4Foxp3+T细胞比例.结果 ①SAHA剂量依赖性抑制CD3/CD28单抗诱导的淋巴细胞、CD+4和CD+8T细胞增殖(均P＜0.05);②CD3/CD28单抗不能诱导CD+4Foxp3+ T细胞比例增高,1 μmol·L-1SAHA也未能诱导CD+4Foxp3+ T细胞比例上调.但给予3和5 μmol·L-1SAHA后,CD+4Foxp3+ T细胞比例显著提高,组内和组间比较,均差异有显著性(均P＜0.05).结论 体外实验表明,SAHA具有免疫调节功能,不仅能抑制效应性T细胞增殖,而且一定浓度药物作用能够促使调节性T细胞比例上调.
关键词： 组蛋白酶乙酰化酶抑制药 软木酰苯胺氧肟酸 调节性T细胞 Foxp3+
