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补肾壮筋汤对肝肾亏虚型膝骨关节炎患者MMP-1及TIMP-1的干预作用
目的:观察补肾壮筋汤对肝肾亏虚型膝骨关节炎(KOA)患者血清及关节液中金属蛋白酶-1(MMP-1)、金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的干预作用.方法:将60例肝肾亏虚型KOA患者分为2组,对照组30例采用口服硫酸氨基葡萄糖胶囊治疗,治疗组30例在对照组治疗的基础上加用补肾壮筋汤治疗,疗程均为30d.采用Elisa法检测,2组患者治疗前后血清及关节液中MMP-1、TMP-1含量;采用Lequesne指数对临床症状进行评分,并评定综合疗效.结果:总有效率治疗组为93.3％,高于对照组的86.7％,差异有统计学意义(P＜0.05);2组血清、关节液中MMP-1含量治疗后均低于治疗前(P＜0.05),而治疗组减少更明显(P＜0.05);治疗组血清、关节液TIMP-1含量治疗后高于治疗前(P＜0.05),且高于对照组治疗后(P＜0.05).结论:补肾壮筋汤可降低KOA患者血清、关节液MMP-1的活性,并提高TIMP-1的活性,缓解关节软骨退变,从而保护关节软骨.
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金属β-内酰胺酶(IMP-1)的表达,纯化和鉴定
目的:建立金属β-内酰胺酶IMP-1的表达,纯化和鉴定方法,并探讨实验条件对分离纯化的影响.方法:pET9a/d-IMP-1质粒转化至E.coli Competent BL21(DE3)Cell并在LB培养基中表达后,通过SP Sepharose离子交换柱,得到粗提物,浓缩后用Sephadex G-75凝胶柱进一步纯化,得到IMP-1的精提物,对纯化产物用SDS-PAGE和MALDI-TOF-MS进行鉴定,同时用Nitrocefin作底物,测定纯化的金属β-内酰胺酶IMP-1的活性.结果:纯化的IMP-1具有较高的活性,能水解大多数抗生素.其米氏常数Km=9.28μmol/L;用MALDI-TOF-MS法测得的分子量为Mr=25111.9.结论:本文建立了金属β-内酰胺酶IMP-1的表达、纯化、鉴定方法,该法可用于其它的金属β-内酰胺酶的表达和纯化.
关键词： 金属β-内酰胺酶 IMP-1 MALDI-TOF-MS -
临床分离产IMP-1型金属酶非发酵菌的耐药机制研究
从临床收集耐亚胺培南的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌共50株,进行头孢他啶和2-巯基乙醇的表型协同试验(CAZ+ME),然后进行金属酶IMP-1基因的PCR检测.选取IMP-1阳性株测序,用PCR方法检测有无一类整合子基因(IntI1).表型的检测发现有28株为协同阳性,其中铜绿假单胞菌27株,鲍曼不动杆菌1株.PCR和测序检测出其中一株铜绿假单胞菌含有IMP-1基因,同时也含有IntI1基因.首次在中国西部地区发现产IMP-1型金属酶、同时也含有一类整合子的铜绿假单胞菌,对于临床上研究细菌的耐药性传播具有重要意义.
