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同型半胱氨酸诱导THP-1单核细胞产生巨噬细胞炎性蛋白1α
为探讨同型半胱氨酸对人单核细胞表达和分泌巨噬细胞炎性蛋白1α的影响并检测其活性,在体外培养的THP-1单核细胞培养基中加入终浓度为0.05 mmol/L、 0.1 mmol/L和0.2 mmol/L的同型半胱氨酸,孵育8 h,或加入终浓度0.1 mmol/L的同型半胱氨酸,分别孵育4、 8及16 h,用酶联免疫吸附法检测其培养基中的分泌性巨噬细胞炎性蛋白1α.用改良Boyden小室微孔滤膜法检测THP-1单核细胞条件培养基中巨噬细胞炎性蛋白1α蛋白对外周血单核细胞的趋化活性.结果发现,培养的THP-1单核细胞暴露于不同浓度或同一浓度不同孵育时间的同型半胱氨酸后,其分泌至条件培养基中巨噬细胞炎性蛋白1α蛋白呈浓度和时间依赖性递增(P<0.01).趋化实验表明,经同型半胱氨酸刺激的THP-1条件培养基引起单核细胞迁移距离(83.2±4.8 μm)明显大于未经同型半胱氨酸刺激的条件培养基组(73.2±2.3 μm)和随机移动组(62.4±3.5 μm).方差分析显示,三组间均有显著性差异(F=310.70, P<0.01).在经同型半胱氨酸刺激的THP-1条件培养基中加入巨噬细胞炎性蛋白1α抗体后,单核细胞的移动距离较不含抗体组明显缩短(P<0.01).结果提示,同型半胱氨酸能诱导THP-1单核细胞表达有趋化活性的分泌性巨噬细胞炎性蛋白1α,并可能通过促进血液单核细胞迁入动脉内膜,在动脉粥样硬化斑块的形成和发展中起重要作用.