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近致死量照射CNE1后存活克隆生物学性状初步分析
目的 放疗后残存癌细胞重新克隆是鼻咽癌放疗复发的主要原因,本实验旨在分析照射残存癌细胞的生物学特征.方法 MTT法测定6MV-X射线照射人鼻咽高分化鳞癌细胞株CNE1的近致死剂量,用近致死量照射获得残存癌细胞存活克隆,然后用流式细胞仪检测存活克隆与亲本细胞株的细胞周期分布,应用二维电泳和质谱技术分析两者的蛋白质表达改变.结果 用15 Gy近致死量照射CNE1得到了照射存活克隆,并命名为CNE1-15GyR.CNE1-15GyR与亲本细胞株相比:G1/G0期比例增高而G2/M期比例降低;有98个蛋白质表达差异点,其中76个蛋白质斑点上调,22个蛋白质斑点下调;对其中上调的20个蛋白质斑点进行了质谱鉴定,发现细胞间叶来源的中间丝蛋白Vimentin在存活克隆CNE1-15GyR中表达增高.结论 照射筛选的存活克隆CNE1-15GyR与亲本细胞株CNE1相比生物学性状发生了改变,细胞间叶来源的中间丝波形蛋白Vimentin在CNE1-15GyR克隆中表达增高,可能与G1/G0期比例增高有关.
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放疗诱导鼻咽癌细胞株CNE1热休克蛋白高表达
目的鼻咽癌是一种以放射治疗为主的头颈肿瘤,但部分鼻咽癌对放疗耐受.为了解鼻咽癌放疗耐受机制,本实验拟初步探讨人高分化鼻咽癌细胞株CNE1放疗后的蛋白质改变.方法利用固相pH梯度二维凝胶电泳,建立CNE1放疗前后总蛋白质2-DE图谱,利用MALDI-TOF-MS及数据库搜索初步分析和鉴定部分放疗前后差异蛋白质点.结果高分子量酸性蛋白质在CNE1放疗后20 min高表达,其中大多为热休克蛋白质HSPs(heat shock proteins, HSPs).结论放射能诱导CNE1的热休克蛋白高表达,它们可能与鼻咽癌放疗耐受有关.
