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脑溢安对缺氧大鼠脑微血管内皮细胞VEGF蛋白表达的影响
目的:观察脑溢安血清对体外缺氧培养的大鼠脑微血管内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响.方法:大鼠用脑溢安浸膏连续灌胃3d后,心脏内采血分离出血清;用新生7d SD大鼠脑内分离培养的微血管内皮细胞(RCMEC)移入厌氧培养箱造成缺氧模型;MTT法测定细胞活性;免疫细胞化学及Werstern blotting研究脑微血管内皮细胞VEGF蛋白表达.结果:缺氧18h脑溢安组OD值较对照组增高(P<0.05).缺氧损伤的脑微血管内皮细胞内VEGF蛋白表达增强,脑溢安血清组VEGF蛋白的表达水平高于对照组(P<0.01).结论:缺氧可诱导脑微血管内皮细胞VEGF蛋白的表达;脑溢安可以上调VEGF蛋白的表达,这可能是脑溢安对缺氧的脑微血管内皮细胞的保护作用机制之一.
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脑溢安对大鼠缺氧神经干细胞丝氨酸/苏氨酸激酶磷酸化的影响
目的:观察脑溢安(NYA)对大鼠神经干细胞(neural stem cell,NSC)缺氧损伤后磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(phosphorylated serine/threonine kinase,phosph-Akt)表达的影响,探讨该药对缺氧神经干细胞的保护作用机制.方法:用分离、培养的神经干细胞造成缺氧模型,以正常大鼠血清和含脑溢安的大鼠血清对缺氧后的神经干细胞进行干预,用含NYA血清、正常血清、无血清的培养液干预缺氧的神经干细胞,Western blotting检测神经干细胞缺氧损伤后Akt的磷酸化情况并用末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP缺口末端标记法[terminal(TdT)-mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL]检测细胞凋亡情况.结果:NYA血清缺氧神经干细胞组Akt磷酸化较无血清、正常血清缺氧神经干细胞组明显增加(P＜0.05),TUNEL阳性细胞数明显减少(P＜0.05).结论:用脑溢安血清干预缺氧损伤的神经干细胞,可上调Akt的磷酸化,减少缺氧的神经干细胞凋亡,发挥保护作用.
