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ERK1/2信号通路介导同型半胱氨酸对PC12细胞的损伤作用
目的 观察同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)对PC12细胞的损伤作用,探讨胞外信号调节蛋白激酶1/2(extracellular signal-regulated protein kinases 1 and 2,ERK1/2)通路在其中的作用.方法 台盼蓝拒染法和MTT比色法检测细胞存活率,相筹倒置显微镜观察细胞形态,Hoechst 33258染色荧光照相术检测细胞凋亡,罗丹明123染色荧光照相术和流式细胞术检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP),Western blot检测ERK1/2磷酸化的水平.结果 Hcy(2.5～20 mmol/L)作用24 h后,可浓度依赖性地抑制PC12细胞的存活率;10 mmol/L Hcy处理24 h后,PC12细胞出现核固缩等典型的凋亡特征;Hcy能明显地降低PC12细胞的MMP;Hcy能诱导ERK1/2磷酸化,特异性的ERK1/2阻断剂U0126可显著抑制Hcy对PC12细胞的损伤作用.结论 Hcy可引起PC12细胞损伤,此作用与其抑制MMP及诱导ERK1/2磷酸化有关.
关键词： 同型半胱氨酸 胞外信号调节蛋白激酶1/2 PC12细胞 线粒体膜电位 -
ERK1/2通路介导米诺环素促进PC12细胞氧糖剥夺后血红素加氧酶-1的表达
目的：探讨米诺环素（minocycline, MC）对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PC12）缺氧缺糖（oxygen glucose deprivation， OGD）损伤的保护作用及其机制。方法采用氧糖剥夺6 h方法建立PC12细胞缺氧缺糖损伤模型，并将细胞随机分为正常对照组、模型组、米诺环素组及MEK1/2抑制剂组，在OGD/复氧24 h后，采用MTT比色法测定PC12细胞的存活率，Western blotting法检测血红素加氧酶-1（HO-1）及胞外信号调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）的磷酸化水平。结果 OGD组PC12细胞存活率显著低于正常对照组，米诺环素（0.1~10μmol/L）能缓解OGD损伤导致细胞存活率的下降，同时上调HO-1蛋白的表达及增加ERK1/2的磷酸化水平，其中1μmol/L浓度佳。其次，ERK1/2上游激酶MEK1/2特异性抑制剂U0126（10μmol/L）能阻断米诺环素诱导HO-1蛋白表达的增加。结论米诺环素可减轻OGD导致PC12细胞的损伤并上调抗氧化蛋白HO-1的表达，其作用机制可能与激活ERK1/2信号通路有关。
关键词： 米诺环素 血红素加氧酶-1 氧糖剥夺 胞外信号调节蛋白激酶1/2 PC12细胞
