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转基因食品的发展现状及其安全性
随着现代生物技术的发展,基因工程给食品领域带来了深刻的革命.转基因食品在世界范围内迅速发展,出现了抗胁迫、抗除草剂、抗病虫害、高产、优质,植物疫苗等多种类型的转基因食品.与此同时,转基因食品的安全性也越来越多的引起人们的关注,为此,从转基因食品的生物安全性、转基因食品安全性评价及安全管理等方面对转基因食品的安全问题进行了阐述.
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基于社交媒体的科学传播:新浪微博“转基因”热词传播模式研究
该文以社交媒体科学传播为主要研究问题,以新浪微博上的热词“转基因”为具体研究对象.通过“微指数”、“一找微分析”应用工具,遵循“现象-意义-原因”的研究思路,对“转基因”微博热词传播模式特征进行研究,并在此基础上进一步分析上述特征及规律的产生原因.通过新浪微博转基因热词传播模式,发现科学传播要实现向着理性公共参与方向发展的目标,需将善用社交媒体和发挥社会现实力量结合起来.
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转基因牛肉食用安全性的初步评价
目的 通过90 d喂养试验初步评价转人α-乳清白蛋白基因牛肉的食用安全性.方法 将普通牛肉和转基因牛肉分别制成牛肉粉,按照5％的比例掺入基础饲料并调整配方使之与啮齿类实验动物纯化饲料AIN93G相一致.将Wistar大鼠按体质量随机分为3组,分别以转基因牛肉饲料、普通牛肉饲料和基础饲料AIN93G喂养90 d.每日观察动物体征,每周记录动物体质量和进食量,试验结束时对动物进行尿液检查、血液细胞学和血液生化学分析,对重要脏器称重并进行组织病理学检查.结果 进食含有转基因牛肉的饲料对大鼠体质量、进食量、尿液、血液细胞学和血液生化学、脏器重量及组织病理学均未产生明显改变,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 大鼠的90 d喂养试验结果提示转基因牛肉的食用安全性与普通牛肉无差别.
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北京市城区居民的转基因食品知识、态度、行为及影响因素分析
为了解北京市居民对转基因食品的知识、态度和行为的现状及影响因素.抽取北京市居民中901人,调查转基因食品生物技术的知信行水平.转基因食品是生物技术的知晓率为72.7%,深入了解的49.3%,随文化程度增高呈上升趋势.对转基因食品持乐观态度的占63.1%,持悲观态度(有害或者害大于利)的占6.1%,乐观随文化程度增高呈上升趋势,随年龄增高呈下降趋势;61.9%的调查者认为转基因食品将走向大众(积极),30岁以下及乐观的人群态度更为积极.持乐观、积极态度者购买转基因食品的比率较高,为41.8%,而持悲观态度的为18.7%,差异有显著性;购买转基因食品人群比例随年龄升高呈下降趋势,与文化程度、性别没有关系;调整的价格对促进转基因食品购买有一定影响.北京市居民对转基因食品的知信行水平较高,态度影响购买行为,转基因食品的价格对购买有一定影响.
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转基因水稻潮霉素标记基因PCR检测方法的建立及其在基因水平转移研究中的应用
为建立用于基因水平转移研究, 尤其是DNA经加工和消化后稳定性研究的针对转基因水稻潮霉素标记基因hpt(hygromycin phosphotransferase)的定性和实时定量PCR体系,设计针对hpt的上游通用引物多个片段定性PCR扩增体系,以植物叶绿体基因rbcl为内对照,PCR扩增产物经测序验证.将定性PCR中小片段(236 bp)连接到质粒载体pUC18-pMD T载体上,提取质粒经验证后做外标.应用TaqMan-MGB荧光探针和引物,建立定量的外标校正曲线法,并评价方法的精密度.建立的定性PCR体系能稳定扩增出236 bp～910 bp不同大小的5个hpt片段,并经测序验证.实时定量PCR的线性范围为105～10拷贝(R2=0.998),低能检出10拷贝,重复性好.本研究已成功建立了用于转基因水稻标记基因hpt基因水平转移研究的定性和定量PCR系统.
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食品中转基因成分的PCR快速检测研究
为建立食品中转基因成分的快速检测方法,针对转基因大豆、玉米、油菜的多个相对稳定的转基因元件,包括35S、NOS、EPSPS、Cry1A、NPTⅡ等基因,同时选定植物本身固有的基因:大豆Lectin、玉米IVR、油菜Napin基因作为内源参照指示基因,设计、筛选出9对引物分别组成多重PCR,结合高灵敏度的聚丙烯酰胺凝胶电泳组成快速检测体系对转基因食品进行检测,1～2 d能完成整个检测过程.经测试:该检测体系稳定可靠、灵敏准确、特异性好,且操作简便、成本低廉,是一种进行转基因食品检测的良好技术模式.
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转SCK基因大米对小型猪生长发育的影响
为观察和比较转SCK基因大米和亲本大米对机体生长发育的影响,从而评价转SCK基因大米的营养价值,选用15头雄性断乳中国实验用小型猪为试验对象,随机分成3组,分别是正常对照组(NG)、亲本大米对照组(CG)、转基因大米组(GG),饲料根据实验目的配制,共饲养62 d.观察3组动物体格发育(体重、体长、体高、胸围)和脏器发育(脏器重、大体病理和组织病理)等方面的差异.结果表明,亲本大米对照组和转基因大米组动物的体格发育均优于正常对照组;3组动物脏器发育差异不明显,大体病理和组织病理均未观察到转SCK基因大米具有明显的非期望效应.说明外源性基因的插入未改变大米的营养价值或产生对动物的不良影响,转SCK基因大米和亲本大米在动物喂养方面基本满足"实质等同性"的要求.
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转SCK基因大米对小型猪生长发育的影响
为观察和比较转SCK基因大米和亲本大米对机体生长发育的影响,从而评价转SCK基因大米的营养价值,选用15头雄性断乳中国实验用小型猪为试验对象,随机分成3组,分别是正常对照组(NG)、亲本大米对照组(CG)、转基因大米组(GG),饲料根据实验目的配制,共饲养62 d.观察3组动物体格发育(体重、体长、体高、胸围)和脏器发育(脏器重、大体病理和组织病理)等方面的差异.结果表明,亲本大米对照组和转基因大米组动物的体格发育均优于正常对照组;3组动物脏器发育差异不明显,大体病理和组织病理均未观察到转SCK基因大米具有明显的非期望效应.说明外源性基因的插入未改变大米的营养价值或产生对动物的不良影响,转SCK基因大米和亲本大米在动物喂养方面基本满足"实质等同性"的要求.
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重组人乳铁蛋白对大鼠生长发育作用的研究
目的 研究从转基因牛乳中分离纯化的重组人乳铁蛋白是否具有促进动物生长发育的作用.方法 给大鼠灌胃重组人乳铁蛋白共8周,设低、中、高3个剂量组(0.375,0.75和2.25 g/kg BW·d)以水为对照组.检测指标包括动物体重、身长、摄食童和食物利用率.结果 高剂量组体重、身长和食物利用率指标均显著优于对照组,低、中剂量组的体格发育指标较对照组有轻度改善.结论 在本研究条件下,重组人乳铁蛋白具有促进大鼠生长发育的作用.
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重组人α-乳清白蛋白潜在致敏性的生物信息学预测
目的 通过生物信息学分析预测牛乳腺生物反应器表达的重组人α-乳清白蛋白(rhLA)的致敏性.方法 使用在线致敏原数据库(The Allergen Online Database)、致敏蛋白结构数据库(Structural Database of Allergenic Proteins)和食品安全致敏原数据库(Allergen Database for Food Safety),分析目标蛋白与已知致敏原的序列或结构相似性.结果 rhLA致敏性的生物信息学分析结果显示,rhLA与已知致敏原牛α-乳清白蛋白、牛乳糖合酶B蛋白(致敏原Bos d 4)、鸡溶菌酶C(1,4-β-N乙酰胞壁质酶C、致敏原Gal d Ⅳ、致敏原Gal d 4)存在较高的序列或结构同源性.结论 rhLA具有潜在的致敏可能性.
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转基因大豆低密度基因芯片的检测方法研究
目的 建立Roundup Ready转基因大豆(简称RRS)的基因芯片检测方法,探讨其在转基因大豆检测中的应用.方法 根据大豆中所转入的外源基因,选择camv35s启动子、nos终止子和cp4epsps基因,以大豆内源基因lectin基因为内参照基因设计了引物和探针,并制备了核苷酸芯片;通过多重PCR对样品核酸进行扩增和荧光标记后,将PCR产物与芯片杂交,检测大豆样品中所含的外源基因,并评价方法的灵敏度.结果 检测转基因含量不同的RRS标准参考物,结果显示:camv35s启动子、nos终止子、外源基因cp4epsps检测灵敏度均可达0.45%.结论 本研究所建立的基因芯片检测方法有良好的灵敏度及可重复性,有助于实现转基因大豆的高通量、高灵敏的检测.
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利用BN大鼠动物模型评价S86转基因大米的致敏性
为研究S86转基因大米的致敏性,用BN大鼠致敏动物模型进行研究.40只BN大鼠随机分为4组,每组10只,分别为:阳性对照组,转基因大米组,非转基因大米组及阴性对照组.分别在第0和第7天,通过腹腔注射给予阳性对照组的大鼠0.1 mg/ml卵清蛋白(OVA)1ml,其它各组在相同时间腹腔注射相同剂量的生理盐水.以AIN-93G为依据配制各组饲料,阳性对照组和阴性对照组大鼠饲以AIN-93G饲料,转基因大米组饲以含转基因大米粉的饲料,非转基因大米组饲以含非转基因大米粉的饲料,时间为6周.在第2次腹腔注射OVA后,取血分离血浆进行组胺测定.分别在第14、21、28、35、42天取血分离血清,测定IgG及IgE水平;此外,分别在实验前和实验后测定各组大鼠的血压.血清学实验结果显示转基因大米全食品喂饲没有激发IgG及IgE反应,而OVA(阳性对照组)激发了明显的IgG及IgE反应;转基因大米组的组胺水平与阴性对照组及亲本对照组相比差异没有显著性,而阳性对照组组胺水平升高.另外转基因大米没有引起大鼠血压升高.该研究结果表明通过全食品喂饲的方式给予BN大鼠S86转基因大米没有发现该转基因大米对BN大鼠具有致敏性.
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转基因食品胰蛋白酶抑制剂活性的测定
目的 通过测定转基因食品的胰蛋白酶抑制剂活性,为建立转基因食品营养评价标准提供数据.方法 首先通过探讨胰蛋白酶-底物-胰蛋白酶抑制剂的剂量反应关系,建立转基因食品胰蛋白酶抑制剂活性测定的佳反应体系,并以此为基础分析了部分转基因玉米、大豆的胰蛋白酶抑制剂活性及与亲本食品的差别.结果 所检转基因食品胰蛋白酶抑制剂活性大多与亲本食品差别不大,尽管个别产品出现胰蛋白酶抑制剂活性增高或降低现象,但都在可接受范围.结论 在规范检测技术前提下加强对非转基因食品基础数据建设对制定转基因食品营养评价标准十分必要.
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食品中转基因表达蛋白的危险性评估
随着转基因技术的商业化发展,直接或间接来源于转基因作物的食品日益增多.对食品中外源性基因表达蛋白质的研究是转基因食品安全性评价工作中的重要部分.本文从安全食用历史、生物信息学分析、体外稳定性研究、作用方式研究、毒理学试验等方面,对目前常见转基因表达蛋白的危险性评估进行了综述.
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转基因作物中外源基因在体内代谢途径的研究进展
为研究转基因食品中外源基因发生水平转移和其它危害的可能性,从而揭示转基因食品的安全性,综述了外源基因在体内代谢的途径及影响因素,外源基因在消化系统中的代谢降解,外源基因的水平转移以及外源基因在体内代谢途径的研究方法.
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转基因食品检测方法的现况与进展
为给转基因食品检测提供参考,介绍包括除草剂生物分析法(herbicide bioassays)、western印迹法(Western b1ot)、酶联免疫吸附试验法(enzyme-1inked immunosorbent assay,ELISA)、southern印迹法(Southem blot)、聚合酶链反应法(Polymerase Chin Reaction,PCR)在内的蛋白质检测和DNA检测方法.一些新的方法如近红外光谱法(near-infrared spectroscopy)、DNA微阵列技术法(Microarray)等略做介绍.对这些方法的基本原理、优缺点和应用范围以及存在的问题进行了分析,可供转基因食品检测研究选择分析方法时借鉴.
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转基因大豆DNA检测芯片的研究
为提高对转基因大豆的监督检测能力,研制了转基因大豆DNA检测芯片.根据转基因大豆(Roundup Ready)中所转入的外源基因,选择CaMV35S启动子、NOS终止子、NOS/EPSPE基因和内源Lectin基因设计特异性引物,采用多重PCR法对待测样品进行扩增,通过缺口平移法合成DIG-dUTP标记杂交探针,并制备基因芯片.在对PCR反应和扩增产物与芯片杂交条件进行优化的同时,比较了芯片检测的特异性和重复性,并对检测的灵敏度进行测试.结果表明,该方法具有较好的特异性和重复性,检测灵敏度可达0.5%,由于采用了多重PCR技术,一次可同时检测多个基因,提高了检测的准确性和效率.
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食品中转基因大豆成分的定性和定量检测
为建立食品中转基因成分的定性定量分析,运用传统的定性PXR方法检测大豆加工产品中转基因成分的存在,运用Taqman探针技术,对存在的转基因成分进行准确定量.对于定量过程中由于扩增效率的不同造成的误差,通过大豆的内源基因Lectin进行校正,根据△Ct值对应于校正曲线计算出转基因大豆的含量.本方法灵敏度达到0.1%,误差范围小于30.0%.可用于转基因大豆的监测管理.
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转基因"华番一号"番茄的筛选和特异性的定性、定量PCR检测方法
为给转基因植物监测提供技术支持,建立了转基因"华番一号"番茄筛选和特异性的定性、定量PCR检测方法.转基因"华番一号"的筛选PCR检测主要以转基因通用元件CaMV35S启动子和NOS终止子为目的基因片段,特异性PCR检测以转基因外源重组子的CaMV35S启动子和反义EFE基因的相邻序列为目的片段;实验同时设立番茄的LAT52基因为转基因番茄定性、定量PCR检测的内对照基因.在所建立的PCR检测体系中,定性PCR筛选和特异性检测的检测极限为68个拷贝,实时定量PCR方法的检测极限为3个拷贝;筛选定量PCR检测的定量极限为3个拷贝,特异性定量PCR检测的定量极限为25个拷贝.后通过对2个已知含量的转基因番茄"华番一号"混合试样的检测,证明了该体系可以有效地用于转基因番茄"华番一号"的筛选和特异性的定性、定量PCR检测.
关键词： 植物 转基因 转基因"华番一号"番茄 聚合酶链反应 遗传筛选 -
转基因大豆Roundup Ready调控元件在食品加工过程中降解变化的研究
35S启动子可能会通过基因的水平转移插入到某一致癌基因上游,活化并导致癌症的发生.为了解转基因植物中调控元件的安全性问题,以转基因大豆Roundup Ready为实验材料,针对Roundup ready转基因大豆中CaMV35S启动子及NOS终止子的序列,设计了不同长度片段的引物,通过对CaMV35S启动子和NOS终止子的PCR扩增,研究了豆腐、豆奶、豆粉3种大豆加工食品中磨浆、煮浆、调配、均质、杀菌、喷雾干燥等关键工艺对Roundup Ready大豆中调控元件的影响.结果表明调控原件在食品加工过程中的降解变化与其所处位置有较大关系.扩增长度相近的2个片段,包含大豆基因组DNA序列的片段受加工过程的影响较小,在3种豆制品的所有加工过程中均能检测到.而只包含CaMV35S启动子序列的片段仅能在原料中检测到,原料经过磨浆后,片段大小降至200bp以下.NOS终止子受食品加工工艺的破坏和影响较小,在被检测食品的每一个加工过程中都能够检测到NOS终止子片段.
