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083蛋白质组学技术及其在营养学研究中的应用
蛋白质组学主要研究细胞或组织内表达的全部蛋白质及其表达模式,其三大基本支撑技术是双向电泳技术、质谱技术以及计算机图像分析与大规模数据处理技术.随着蛋白质组学研究的进展,营养蛋白质组学应运而生,迅速成为营养学研究的新前沿.本文对蛋白质组学的研究内容、研究技术及其在营养学领域中的应用作一综述.
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《肉品卫生检验试行规程》存在的问题及对其修订的建议
目的 提高我国内品的安全水平,保证肉品卫生质量.方法 对1959年11月1日由农业部、卫生部、对外贸易部及商业部联合颁发的《内品卫生检验试行规程》(简称《试行规程》)中存在的问题进行分析.结果 《试行规程》应用范围早已过时,检验肉品和疾病的种类均不全面,《试行规程》只对猪肉进行旋毛虫检验,但目前已有150多种动物可感染旋毛虫,其中有些动物肉类已成为旋毛虫病的重要传染源,如在我国已发生了多起因食狗肉、羊肉及野猪肉等引起的旋毛虫病暴发,而《试行规程》未将上述肉类列入旋毛虫检验范围;检验旋毛虫的肌肉压片镜检法费时费力,且易漏检;弓形虫病等多种人兽共患病也不在检验范围内.《试行规程》规定将含猪囊尾蚴的猪肉尸经冷冻或盐腌等处理后出场,但冷冻和盐腌并不能保证将猪囊尾蚴全部杀死,即使经高温无害化处理,在卫生知识普及的今天,居民也不能接受含有囊虫的猪肉.结论 建议尽快对《试行规程》进行修订,供人类食用的所有动物肉类及肉制品均应进行严格的卫生检验.
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保健食品快速筛选试验--细胞毒性方法的确定
为建立保健食品的快速安全性评价方法,用CHO和V79两个细胞系对三七进行了MTT法、中性红吸收法、集落形成法进行细胞毒性试验,用BalB/c细胞、CHL细胞、SL-7细胞3个细胞系对川芎用上述3种方法进行了细胞毒性试验.结果发现:用CHO和CHL细胞系,中性红吸收法做出的细胞毒性结果比较稳定可靠.
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蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测方法研究
为快速检测蔬菜上的农药残留,建立了两种快速检测方法:速测卡法和酶抑制率法.速测卡法和酶抑制率法对农药的检出限,根据农药的不同而有所不同.速测卡法的检出限一般在0.3～3.5 mg/kg,酶抑制率法一般在0.05～5.0 mg/kg.速测卡法的检出时间为15 min,酶抑制率法的检出时间为30 min.两种方法可用于现场检测,操作简单,速度快,测试成本低廉,对超出我国国家标准允许残留限量或违禁使用的有机磷和氨基甲酸酯类农药的有效检出率可达80%以上.两种方法适合我国蔬菜中部分农药残留限量的监督检测.
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食品中总砷测定前处理条件对结果的影响
目的 探索试样前处理过程中,赶酸条件控制的优化,试验用容器具中被测元素本底残留对原子荧光光度法检测痕量砷的污染权重放大效应.方法 采用湿消解法和微波消解法,在不同条件赶酸,用氢化物原子荧光光度法检测标准物质小麦粉中的砷含量,并与标准值比对.结果 试样前处理赶酸是否规范,将直接影响检测结果的准确性.被测元素本底污染权重放大作用,使检测结果高出标准值可信范围.结论 严格按照消解采用的酸的沸点控制赶酸温度,标准物质检测值在标准值可信范围.
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食品中亚硫酸盐测定方法的改进
为改进GB/T 5009.34食品中亚硫酸盐的测定方法,进行了一系列的改进.SO2标准溶液的配制改为先测定固体试剂NaHSO3中SO2的纯度,而后根据已知的SO2纯度直接称取NaHSO3配成SO2标准溶液.显色剂中使用0.27%的甲醛溶液和0.15 mol/L的盐酸溶液,显色剂用量1.0 ml,大吸收波长580 nm.该试验除NO-2及S2-外,其他共存物质及添加剂等均无干扰,在样品溶液中加入H2O2作为校正空白消除反应过程中产生的呈色物质及背景颜色的干扰.改进后的方法SO2标准溶液的配制简捷,灵敏度是国标法的1.6倍,小检出量为O.1μg,样品低检测浓度为0.2mg/kg,回收率为90.0%～110.0%,RSD范围为0.5%～3.2%.反应速度、显色体系的稳定性及可操作性等大为提高.该方法适用于食品中SO2的测定.
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气体代谢法及其典型设备K4b2在能量代谢测量中的应用
综述了3种基本的人体能量消耗量的测量方法,即直接测热法、双标水法和气体代谢法.重点介绍了现在为常用的气体代谢法及其新型设备心肺功能测试仪K4b2(意大利、Cosmed公司).因K4b2具有实时性、便携性、准确性等优良特性,使其在能量消耗量测量这一领域具有广阔的应用前景.
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赭曲霉毒素A分析方法进展
赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)是曲霉属和青霉属的某些菌种产生的一种具有致癌、致畸、免疫抑制和肝肾毒性的有毒代谢产物,世界上许多国家已制定了食品中OTA的相关法规和标准,而准确、可靠、灵敏的分析OTA方法是法规标准实施的重要依据.有机溶剂与酸(或碳酸氢钠)的混合溶液是提取食品中OTA的常用溶剂系统;含有OTA提取液的净化手段包括液液分配、固相柱萃取和免疫亲和层析等;反相液相色谱配荧光检测器、酶联免疫吸附法和液相色谱/质谱联机是分析OTA的常用方法,本文就OTA的检测方法进行综述.
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食品冷杀菌技术研究进展
食品冷杀菌技术是指不用热能杀死微生物,不影响食品营养、质构、色泽和风味的新兴杀菌技术.通过介绍超高压杀菌、射线杀菌、超高压脉冲电场杀菌、脉冲强光杀菌、磁力杀菌、紫外线杀菌和二氧化钛光催化杀菌技术,详述其基本原理及其在食品工业中应用研究进展.
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黄曲霉毒素的分析方法
为了解黄曲霉毒素的检测方法,从采样与样品准备、提取净化、测定方法等方面对黄曲霉毒素的分析方法进行了综述.
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转基因食品检测方法的现况与进展
为给转基因食品检测提供参考,介绍包括除草剂生物分析法(herbicide bioassays)、western印迹法(Western b1ot)、酶联免疫吸附试验法(enzyme-1inked immunosorbent assay,ELISA)、southern印迹法(Southem blot)、聚合酶链反应法(Polymerase Chin Reaction,PCR)在内的蛋白质检测和DNA检测方法.一些新的方法如近红外光谱法(near-infrared spectroscopy)、DNA微阵列技术法(Microarray)等略做介绍.对这些方法的基本原理、优缺点和应用范围以及存在的问题进行了分析,可供转基因食品检测研究选择分析方法时借鉴.
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发光细菌检测四环素族抗生素体系的建立
为建立快速检测四环素族抗生素残留的方法,采用大量接种快速培养方法,制备出适宜检测用的发光菌检测液,建立了发光细菌检测四环素族抗生素体系.结果表明,在该检测体系条件下,明亮发光杆菌与金霉素、土霉素和四环素的抑制效应作用呈良好的线性关系,菌液与抗生素的作用佳体积配比为1:3,相互作用的适宜时间为60～80min.该体系对四环素族抗生素的检测灵敏度可达0.006 25μg/ml,比传统的杯碟法高5倍,具有快速、简便的特点,可作为食品中抗生素残留的一种快速、灵敏的筛选检测方法.
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消毒剂耐药性研究技术及其发展
1 消毒剂耐药性研究历史与现状消毒在医院感染控制中的作用极其重要,为预防和控制医院感染提供了有效的手段.自150年前Semmelweiss首次应用漂白粉以来,消毒剂已成为医院感染控制程序的必需.消毒剂分为高效、中效、低效3类,其中高效、中效因具有较高的腐蚀性、刺激性主要用作医疗器具的消毒.低效消毒剂则广泛用于伤口消毒,眼部、膀胱、阴道冲洗消毒,外科术前皮肤、粘膜准备和外科医生手消毒以及病房环境卫生等方面的消毒.
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用基因芯片技术研究糖尿病性心肌病大鼠心肌组织的部分基因表达谱
目的比较正常大鼠和糖尿病性心肌病大鼠心肌组织中基因表达的差异, 探讨糖尿病性心肌病的发病机制.方法 (1)实验大鼠分为两组,一组为正常对照组,另一组为糖尿病性心肌病组;(2)从心肌组织中抽提mRNA,经逆转录分别用Cy3、Cy5荧光标记, 获得两组动物来源的cDNA探针;(3) cDNA探针与基因表达谱芯片杂交, 结果由扫描仪扫描并用软件进行分析统计.结果 (1)氧化应激相关基因和能量代谢相关基因的表达水平在糖尿病性心肌病时明显下调;(2) S腺苷蛋氨酸合成酶和精氨酸酶的表达水平在糖尿病性心肌病时明显上调.结论 (1)氧化应激和能量代谢障碍在糖尿病性心肌病发病机制中起重要作用;(2) S腺苷蛋氨酸合成酶、精氨酸酶通过影响糖尿病性心肌病大鼠心肌组织中同型半胱氨酸、一氧化氮的含量在糖尿病性心肌病发病机制中起重要作用.
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同卵双胎心脏畸形差异表达基因的分析
目的寻找单卵双胎其一患房间隔缺损、肺动脉瓣狭窄,另一为正常儿童之间的差异表达基因.方法依据该单卵双胎儿童的白细胞RNA合成cDNA探针,差示筛选8～10 周龄胎儿心脏cDNA文库,测定各组克隆的序列,结果与GenBank/EMBL/DDBJ核酸数据库进行同源性比较,所获ESTs进行功能分类,并比较患儿与正常儿童表达基因谱的差异. 结果获得在正常儿童表达高于患病儿童,或正常儿童表达而患病儿童不表达的已知基因有34个,新ESTs有5个;患病儿童表达高于正常儿童,或患病儿童表达而正常儿童不表达的基因有41个,新ESTs有7个. 结论一患先天性心脏病另一正常之单卵双胎儿童进行差示筛选,是寻找先天性心脏病相关基因和与心脏发育相关基因的有效方法.本研究发现了一些与先天性房间隔缺损、肺动脉瓣狭窄发生相关的ESTs.
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应用mRNA差异显示技术筛选子宫内膜癌相关基因片段
目的应用mRNA差异显示技术，筛选子宫内膜癌的相关基因片段。方法提取同一患者的正常子宫内膜和子宫内膜癌组织总RNA，行差异显示-聚合酶链反应（DD-PCR）技术，扩增产物在测序胶上电泳，经银染分离筛选差异条带并测序，用BLAST基因数据库进行分析。结果有2条基因片段与已知人类基因片段同源性低或无同源性，自定义为T1.7，T1.7基因片段登陆号为AF315581；另2条基因片段与已知基因片段同源性高达97.3%和85.0%。T1.7基因片段在子宫内膜癌组织中呈高表达，在增生的子宫内膜组织中呈低表达，在正常子宫内膜组织中不表达。结论 T1.7基因片段可能为子宫内膜癌新的相关基因片段。
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关注我国耳科基础及应用基础研究
基础医学是整个医学的基石,搞好耳鼻咽喉科的基础研究,特别是应用基础研究,对推动本学科的发展至关重要.我国耳科基础及应用基础研究在耳聋相关基因、内耳毛细胞再生、神经营养因子对听神经元的保护及内耳基因治疗和面神经相关研究等方面均有长足发展,耳科学呈现出前所未有的朝气和活力.
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喉切除术后患者生存质量的调查及分析
目的探讨自行制定喉切除术后患者生存质量量表应用于患者生存质量研究的可行性.方法按规范制定喉切除术后患者生存质量量表;对36例喉部分切除和45例喉全切除的患者进行上述量表问卷调查,考核该量表的信度和效度;分析喉切除术后患者生存质量及其影响因素.结果制定的喉切除术后患者生存质量量表由22个指标组成,包含6个方面.量表的信度较好,准则关联效度及内容效度有效;其分半信度和克朗巴赫系数分别为0.842和0.889.喉部分切除组与喉全切除组患者生存质量总分的差异有统计学意义(P<0.001),前者生存质量高于后者;其中身体机能、喉功能、心理状态、独立生活能力方面的差异亦有统计学意义(P值分别<0.001、<0.001、<0.01、<0.05).术式、肿瘤分期、手术并发症、合并症、家庭收入、发音方式及是否佩戴全喉套管是喉切除术后患者生存质量的影响因素.结论该研究制定的生存质量量表有较好的信度及效度,其内容具有喉切除术的专业特性,可应用于喉切除术后患者生存质量的调查研究.
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MRI三维技术在冠心病左心室瘢痕评估中的应用价值
目的 评价自由呼吸膈肌导航三维相位敏感反转恢复( PSIR)磁矩预准备快速小角度激发( Turbo-FLASH)序列在心脏MRI评估冠心病左心室瘢痕中的应用价值.方法 23例临床有明确心肌梗死的患者,静脉注射钆对比剂,10～15 min后,先行二维PSIR Turbo-FLASH序列成像.随后,立即行三维PSIR Turbo-FLASH序列自由呼吸下成像.由2名医师独立对MRI总体质量进行等级评分.再按照美国心脏学会17节段法,对左心室钆对比剂延迟强化(LGE)的面积和类型进行半定量分析,对LGE的体积进行定量评估.两种方法变量间的比较采用配对t检验或秩和检验,Pearson相关和线性回归模型评价两者之间的相关性和依存关系.结果 23例心肌梗死患者的二维和三维图像,总体质量分别为(2.57±0.59)和(2.39±0.66)分(Z=-0.93,P=0.35)；瘢痕的面积积分分别为(24.48±10.83)和(29.00±11.56)分(Z=- 1.41,P=0.16)；类型分别为(16.78 ±6.51)和( 18.87 ±6.76)分(Z=-1.17,P=0.24)；差异均无统计学意义.三维比二维LGE体积定量更大:二维和三维分别为(23.46±10.61)和(31.65±13.86) cm3(t=-2.25,P=0.03).进一步分析显示延迟强化体积定量二维和三维之间呈现出良好的相关性(r =0.940,P＜0.01)和依存性(y=2.851+1.228x,R2=0.883).结论 自由呼吸下三维PSIR Turbo-FLASH序列对比剂延迟增强成像比常规二维序列能够更准确地显示心肌梗死后瘢痕,是更加有效检测心肌活性的新技术.
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数字X线摄影组织均衡技术在股骨颈外伤的应用
目的 探讨数字X线摄影(DR)组织均衡技术在股骨颈外伤的应用价值.方法 对50例股骨颈外伤患者应用DR的常规摄影技术和组织均衡技术进行对比研究,同时使用DR组织均衡技术中的参数进行对照研究,由3名影像学专家采用双盲法对不同方法产生的图像质量进行评价,主观图像质量分5级进行评分.结果 50例应用组织均衡技术得到优质图像38例,无法接受的图像质量为0;而常规摄影优质图像质量为0,无法接受的图像质量为12例,经统计学分析,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 DR组织均衡技术可使高密度组织与低密度组织在1幅图像上同时显示出来,层次丰富的图像,对良好地显示股骨颈侧位尤为重要.
