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周期素依赖性蛋白激酶抑制蛋白p21文献资料
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p21反义寡核苷酸对高糖培养人系膜细胞p21蛋白和细胞外基质表达的影响
目的 探讨体外转染p21反义寡核苷酸(p21 ASODN)对高糖培养的人肾小球系膜细胞p21蛋白及细胞外基质表达的作用.方法 体外培养的人肾小球系膜细胞(HGMC)应用Lipofectamine 2000分别转染50 nmol/L或100 nmol/L的p21 ASODN或随机序列寡核苷酸(SCODN).予高糖(30 mmol/L葡萄糖)培养液处理不同时间后收集HGMC及其培养液上清.用Western印迹检测系膜细胞p21蛋白、纤连蛋白(FN)和层粘连蛋白(LN)的表达.用ELISA法检测培养液上清中FN和LN含量.结果 高糖呈时间依赖性地促进体外培养的HGMC p21蛋白表达,并使FN及LN等细胞外基质合成与分泌增加.HGMC转染p21 ASODN后呈浓度依赖性抑制高糖所致p21表达增加,同时明显减少系膜细胞及其培养液上清中FN和LN的合成与分泌,而SCODN对p21表达或FN和LN的合成与分泌无明显影响.结论 高糖培养可促使HGMCp21蛋白以及FN与LN表达增加,转染p21 ASODN可抑制上述高糖的作用.调控HGMC p21的表达水平可能成为防治糖尿病肾病、特别是早期病变的有效途经之一.
