九节龙皂甙体内的抗肿瘤作用

[目的]观察川产九节龙皂甙二种新化合物(AR1,AR2)在动物体内的抗肿瘤作用.[方法]体内接种4株小鼠移植性肿瘤细胞(S180,EAC,B16,HEPA)于腋部皮下,次日分组给药,10日内每天腹腔注射给药一次,计算各组小鼠平均瘤重和抑瘤率.[结果]九节龙皂甙能抑制小鼠肉瘤和小鼠艾氏腹水癌肿瘤细胞的生长,抑瘤率25%～38%;AR1对小鼠黑色素瘤和AR2对小鼠肝癌有一定的抗肿瘤作用.[结论]川产九节龙皂甙能抑制S180、EAC、B16和HEPA小鼠移植性肿瘤的生长,具有抗肿瘤作用.

九节龙皂甙对Hela细胞生长的抑制作用

目的观察九节龙皂甙(Ardiusilloside)对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用.方法九节龙皂甙6.25 mg*L-1处理Hela细胞0～72 h,在不同时间点采用光镜观察Hela细胞形态,以琼脂糖凝胶电泳检测Hela 细胞凋亡DNA的梯形带;应用特异性Ca2+荧光探测剂Fluo-3/AM在LSCM条件下检测不同时期细胞内Ca2+分布情况.结果光镜下体外培养的Hela 细胞在九节龙皂甙作用24 h开始出现细胞质皱缩和细胞核凝缩等凋亡的形态学特征.60、72 h均检测出DNA梯形带等凋亡的生物化学特征.诱导Hela 细胞48、60、72 h内Ca2+严重超载且维持在较高浓度水平.结论九节龙皂甙对体外培养的Hela 细胞具有明显的抑制作用且诱导Hela 细胞凋亡发生;细胞凋亡时细胞内[Ca2+]增加且维持在较高水平.

九节龙皂甙对8株人癌细胞的抑制作用

0　引言　川产九节龙(Ardisea pusilla A. PC)系紫金牛科紫金牛属植物的全草，九节龙皂甙(Ardipusilloside)是从该全草中分离出的C53H86O22.2H2O，经初步药理试验表明具有提高免疫功能的作用［1］. 我们采用MTT法观察九节龙皂甙对8株人癌细胞的细胞毒作用.1　材料和方法1.1　材料　肝癌(SMMC-7721)，本校西京医院中医科提供；肝癌(HCC-9204)，本校病理科提供；胃癌(SGC-7901)，本校西京医院消化内科提供；卵巢癌(HO-8910)本校西京医院妇产科提供；宫颈癌(Hela)本校403研究所提供；肺癌(A549)、食管癌(Eca-109)、肾癌(GRC-1)本校实验动物研究中心提供. 九节龙皂甙由本校药物研究所提纯，批号：971017；丝裂霉素(MMC)日本协和发酵工业株式会社生产，批号：174AGF；MTT(SIGMA公司产品). 两种药物终浓度均为：50.0 mg.L-1→25.0 mg.L-1→12.5 mg.L-1→6.25 mg.L-1→3.13 mg.L-1→1.56 mg.L-1.1.2　方法　将8株人癌细胞制成单细胞悬液，接种于96孔平面培养板中，调正细胞数为5×104*mL-1，每孔细胞悬液100 μL. 将96孔板置于37℃，50 mL.L-1 CO2饱和温度的二氧化碳培养箱培养24 h，设实验，阴性对照及阳性对照孔. 实验和阳性对照孔分别加入50.0 mg.L-1, 25.0 mg.L-1, 12.5 mg.L-1, 6.25 mg.L-1, 3.13 mg.L-1, 1.56 mg.L-1的九节龙皂甙及MMC，阴性对照孔加入等量的培养液，以不含细胞的1640完全培养液为空白对照，每组6个平行孔，继续培养72 h，去除培养液，加入5 g.L-1 MTT 20 μL，继续培养4 h，加入二甲基亚砜(DMSO)150 μL/孔，并振荡待紫蓝色结晶完全溶解，采用DG-3022型酶标仪(国营华东电子管厂)测各孔的吸光度值(A490 nm )，按公式(实验孔平均A490 nm值/阴性对照孔平均A490 nm值)×100%计算，并以实验药物浓度的对数为横坐标，细胞存活率为纵坐标绘制剂量效应曲线，并求半数细胞抑制剂量值(IC50).　　统计学处理：采用SPLM软件方差分析，q检验.

流式细胞术检测九节龙皂甙对Hela细胞凋亡的诱导作用

0　引言　 细胞凋亡(Apoptosis)是一种生理性细胞程序化死亡，与肿瘤的发生、发展密切相关，已成为当前肿瘤研究的新热点. 九节龙皂甙是从川产九节龙全草中提出的单体[1]，我们观察九节龙皂甙诱导Hela细胞凋亡，采用流式细胞术(flow cytometry, FCM)进行分析，结果如下：1　材料和方法1.1　细胞系及细胞培养　人宫颈癌细胞株(Hela)为上皮样癌细胞，本校403研究所 提供. 细胞培养方法见参考文献[2].1.2　细胞凋亡的诱导和分析　实验组分别以1.56～50.0 μg*mL-1 九节龙皂甙(本校药物研究所提供)作用Hela细胞(106*mL-1) 0～72 h，未经过药物处理的细胞为阴性对照 组，加入等量培养液（100 mL*L-1胎牛血清的RPMI 1640培养液）中细胞常规培养，按作 用不同时间，分别收集细胞，经PBS洗涤2次，加入-4℃ 700 mL*L-1乙醇固定过夜， 离心收集细胞，再经PBS洗涤后，依次加入膜穿孔剂，溴化乙锭(PI)和Rnase 4℃染色30 min，350 目筛网过滤，Epics-profileⅡ流式细胞仪(美国Coulter公司)上进行DNA含量及细胞周期分析.

九节龙皂甙对Hela细胞生长的抑制作用