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FBXL20对人非小细胞肺癌A549细胞生长的影响
目的 观察FBXL20(F-box and leucine rich repeat protein 20) 对人非小细胞肺癌A549细胞生长的影响并初步探究其机制.方法 采用慢病毒感染A549细胞,构建对照组(FBXL20-vector组)及干扰组(FBXL20-RNAi组),通过Western blot验证慢病毒敲减效率.利用CCK-8及集落形成实验观察FBXL20的下调对A549细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测细胞周期的变化,Western blot分析周期蛋白的改变,基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA) 探究FBXL20可能参与的生物学过程.结果 干扰组FBXL20的蛋白表达(0. 36 ± 0. 02) 显著低于对照组(0. 58 ± 0. 01)(P＜0. 01) .与对照组相比,干扰组的增殖能力增强(P＜0. 05),形成的集落数目也显著增加(100 ± 20 vs 53 ± 6)(P＜0. 05),且停留在G2 /M期的细胞比例明显降低(5. 65 ± 1. 35 vs 9. 94 ± 1. 44)(P＜0. 05) .Western blot结果显示Cyclin D1、ERK1 /2蛋白表达无明显变化(P＞ 0. 05),CDK2、Cyclin E、CDK1、Cyclin A、Cyclin B1蛋白表达显著增加,而p-ERK1 /2则显著降低(P＜0. 05) .GSEA结果显示FBXL20的低表达与G2 /M检查点呈正相关(P＜0. 01) .结论 下调FBXL20可以加快A549细胞G2 /M期的进程,提高其生长能力.其机制可能是通过抑制p-ERK的激活,使得其下游周期蛋白CDK1、Cyclin A、Cyclin B1表达增加而实现的.
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FBXL20在颞叶癫痫患者及癫痫大鼠模型中的表达变化
目的 通过研究E3泛素连接酶FBXL20及其下游蛋白-神经元突触膜胞外分泌调节蛋白1 (regulating synaptic membrane exocytosis 1,RIM1)在颞叶癫痫患者皮质及匹鲁卡品癫痫大鼠模型皮质、海马组织中的表达变化,探讨FBXL20在癫痫形成中的作用.方法 以颞叶癫痫患者手术切除病灶标本(n=25)为癫痫组,以脑外伤减压手术所切皮质标本(n=10)为对照组.另取40只健康雄性SD大鼠腹腔注射氯化锂(127 mg/kg),20 h后腹腔注射匹鲁卡品(50 mg/kg),每30分钟重复给予1次匹鲁卡品(10 mg/kg),直到大鼠癫痫发作.2周后出现癫痫自发性发作的大鼠纳入癫痫组;2个月后仍未出现癫痫自发性发作的大鼠纳入对照组.采用免疫荧光对FBXL20的表达进行定位;免疫组化检测FBXL20的表达水平;Westem blot检测FBXL20、RIM1的表达水平.结果 免疫荧光检测结果显示FBXL20主要表达于神经元;免疫组化及Western blot检测结果均显示癫痫患者皮质、癫痫大鼠模型皮质与海马中FBXL20表达较对照组明显下降(P＜0.05);同时Western blot检测结果显示RIM1表达较对照组明显升高(P＜0.05).结论 FBXL20在癫痫患者及大鼠模型中的表达水平明显降低,RIM1表达明显升高,提示FBXL20可能通过调控RIM1参与了癫痫的形成.
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结直肠腺癌发病基因fbxl20和set的相关性研究
目的:通过半定量PCR技术,研究fbxl20基因与set基因与临床病理特征的关系及其表达水平间的相关性研究.方法:收集50例结直肠腺癌组织及癌旁正常组织,用半定量PCR技术检测fbxl20基因及set 基因的表达水平并进行分析.结果:fbxl20基因及set 基因在结直肠腺癌组织中的表达水平均显著高于癌旁组织;fbxl20基因与set 基因在本实验50例结直肠腺癌组织中的表达水平无相关性.但是,在低分化肿瘤组织及D期肿瘤组织中,fbxl20基因与set 基因的表达水平呈正相关.结论:fbxl20基因及set 基因在结直肠腺癌组织中的表达水平显著升高,其可能与癌细胞的分化过程有关.
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siRNA靶向沉默fbxl20基因对肝癌SMMC-7721细胞生物学行为的影响
目的:通过沉默fbxl20基因,以观察基因沉默后对SMMC-7721细胞的增殖、迁移和周期分布的影响.方法:通过脂质体Lipofectamine2000介导转染SMMC-7721细胞,靶向fbxl20基因的siRNA片段阻低肝癌SMMC-7721细胞株fbx120 mR-NA表达.结果:siRNA能有效沉默SMMC-7721细胞fbx120 mRNA的表达,沉默效率为71.49％.MTT试验实验显示:siRNA转染SMMC-7721细胞后,细胞增殖能力显著降低.Transwell小室和划痕愈合实验表明,fbxl20基因被沉默后,SMMC-7721细胞在迁移能力明显减弱,迁移抑制率高达62.03％.流式细胞术检测细胞周期结果显示:转染48 h后,SMMC-7721实验组细胞G1/G0期比率(81.21％)显著高于阴性对照组(71.49％)和空白对照组(67.90％).结论:本实验运用RNA干扰技术成功抑制了SMMC-7721细胞中fbxl20基因的表达,并且发现fbxl20基因可能与肝癌细胞的增值和迁移相关.
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FBXL20在喉癌组织中的表达及意义
目的：检测喉癌组织中 FBXL20的表达,并探讨其与喉癌发生、发展的关系以及临床应用的潜在价值。方法用免疫组化 SP 法,检测30例喉癌组织和其对应的正常组织中 FBXL20的表达情况。结果FBXL20表达于正常组织和肿瘤组织的胞浆中,相对于肿瘤组织,FBXL20在正常组织中表达较高(P =0.010)；其表达在有无侵犯淋巴结中,差异有统计学意义(P =0.042)；其表达在正常组织与低分化肿瘤中,差异有统计学意义(P =0.018)。结论FBXL20在喉癌的发生中可能发挥着一定作用,并且可能是喉癌发生过程中的抑制因子。
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FBXL20在喉癌组织中的表达
目的 研究FBXL20在喉癌组织中的表达,分析其在喉癌组织和癌旁组织中表达是否有差异,并分析FBXL20表达强度与喉癌临床病理特征:分化程度,有无淋巴结转移,性别,年龄之间的关系及研究与喉癌发生、发展、转移的关系,从而探索在临床应用上的潜在价值.方法 采用免疫组化检测30例喉癌组织和癌旁组织中FBXL20的表达情况.结果 FBXL20在正常组织和肿瘤组织均有表达,其多集中于胞浆中,FBXL20在正常组织中阳性表达率较高于肿瘤组织,FBXL20在正常组织中的表达与肿瘤组织相比,差异有统计学意义(P=0.004),其表达在有无侵犯淋巴结中差异有统计学意义(P=0.044),与性别,年龄和分化程度无关.结论 FBXL20可能在喉癌的发生中发挥着一定作用.
