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表皮生长因子受体胞外区文献资料
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稳定表达EGFR胞外区的NIH3T3细胞株的建立及鉴定
目的 构建稳定表达表皮生长因子受体(EGFR)胞外区(EGFRex)的NIH3T3细胞株.方法 构建带有EGFRex基因的重组真核表达质粒PLNCX2-EGFRex,经脂质体法转染NIH3T3细胞后,用G418筛选阳性克隆,用免疫组化和蛋白质印迹(Western blot)检测EGFRex蛋白的表达,用EGF-EGFP蛋白检测其活性.结果 成功构建了真核表达载体PLNCX2-EGFRex.以其转染NIH3T3细胞后,经免疫组化和Western blot检测到EGFRex的表达.在荧光显微镜下见细胞膜上有绿色荧光.结论 人EGFRex在NIH3T3细胞内以其天然活性形式稳定表达,为抗体制备奠定了基础.
关键词: 表皮生长因子 NIH 3T3细胞 基因表达 表皮生长因子受体胞外区