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真核重组质粒文献资料
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以CpG为佐剂的人IL-24多克隆抗体的制备
目的:采用在原核表达系统表达的人IL-24蛋白及人IL-24真核重组质粒免疫新西兰兔,制备兔抗人IL-24多克隆抗体.方法:利用IPTG诱导hIL-24在大肠杆菌中表达,纯化hIL-24重组蛋白,纯化后的蛋白经SDS-PAGE分析,同时提取hIL-24真核重组质粒,用以免疫新西兰兔,并以CpG为佐剂制备多克隆抗体.Western-blot鉴定抗体的特异性,ELISA法测定抗体效价.结果:人IL-24经IPTG诱导后可在大肠杆菌中大量表达,表达量占细菌总蛋白的30%,纯化后的蛋白纯度高;原核表达的重组蛋白和真核重组质粒免疫新西兰兔,通过抗体效价测定,获得了抗血清效价达1∶6400的多克隆抗体.结论:原核表达的hIL-24蛋白和hIL-24真核重组质粒均能刺激家兔产生抗体,其多克隆抗体的效价较高.
