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二硫键稳定的双链抗体文献资料
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二硫键稳定的人源性抗bFGF双链抗体抑制人肺癌细胞生长的作用研究
目的 研究二硫键稳定的人源性抗bFGF双链抗体(ds-Diabody)对人肺癌A549细胞的体内外增殖抑制作用.方法 利用镍离子亲和层析和离子交换层析的方法纯化得到ds-Diabody,间接ELISA检测其抗原结合活性,CCK-8法检测ds-Diabody对人肺癌A549细胞的增殖抑制作用,Western blot分析其作用于肿瘤细胞的机制,Transwell检测其对肿瘤细胞迁移侵袭的影响.建立裸鼠皮下移植瘤模型,记录各处理组裸鼠皮下移植瘤的体积及裸鼠体质量变化.免疫组化法检测肿瘤组织CD31和LYVE1的表达情况,初步探讨抗bFGF的人源性ds-Diabody抗体的抗肿瘤机制.结果 成功纯化得到具有抗原结合活性的ds-Diabody.CCK-8结果显示,纯化的ds-Diabody可剂量依赖性地抑制人肺癌A549细胞株的增殖.Western blot结果表明ds-Diabody能有效阻断与bFGF相关的MAPK和Akt通路.Transwell结果表明ds-Diabody可以显著抑制A549细胞的迁移及侵袭.裸鼠体内试验中,ds-Diabody抗体显著地抑制了肿瘤的生长,抑制率为86.54％.免疫组化的结果显示ds-Diabody抗体处理组肿瘤组织中微血管密度和淋巴管密度均有下降.结论 抗bFGF的人源性ds-Diabody抗体可有效地抑制人肺癌A549细胞的生长.
关键词： 碱性成纤维细胞生长因子 二硫键稳定的双链抗体 人肺癌细胞 血管新生 淋巴管新生
