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可溶性 HLA-G文献资料
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sHLA-G1重链分子、β2 m的体外表达及纯化研究
目的 获得sHLA-G1重链分子及轻链β2微球蛋白(β2m) 基因体外表达并纯化的相关蛋白质.方法 RT-PCR扩增可溶性HLA-G1重链分子及人β2 m轻链的cDNA序列,构建表达载体pET28a(+)/sHLA-G1及pET28a(+)/β2 m,导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导sHLA-G1及β2 m蛋白表达,并以Ni-NTA亲和层析和CM-FF弱阳离子柱分别纯化,透析后浓缩保存.SDS-PAGE,Western-Blot鉴定目的蛋白的表达和纯化.结果 成功克隆了sHLA-G1及β2m基因并构建了pET28a(+)-sHLA-G1、pET28a(+)-β2m原核高效表达载体;表达产物以可溶性形式存在,表达量＞30%,纯化后产物纯度达到95%.结论 成功表达并纯化出的sHLA-G1重链分子及轻链β2m有助于阐明可溶性HLA-G1的功能.
