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表观遗传学标志文献资料
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基于RASSF1A为标志的无损性孕妇血浆中胎儿RHD-DNA检测方法的建立
目的 建立基于表观遗传标志RASSF1A为标志的孕妇外周血浆中胎儿RHD-DNA检测路径,用于无损性产前胎儿RhD血型预测.方法 首先采用PCR-SSP对孕妇外周血细胞基因组DNA做RHD基因多个外显子检测,以确定其RHD基因型;其次对无外显子表达或部分外显子表达的孕妇,对其外周血浆中胎儿游离的DNA采用RT-PCR扩增其RHD基因exon7与10,同时扩增SRY基因;另对exon 7、10和SRY都为阴性的标本检测甲基化RASSF1A基因作为胎儿DNA存在的标志.待胎儿分娩后,将基因检测结果与婴儿血清学检测结果比对,以评价该方法的准确性.结果 57位受检孕妇中,含RHD全部外显子者有17人;3人含exon1和10,为RHD1-CE(2-9)-D10杂化基因;37人不含外显子.后两者40名孕妇中,22人检测出SRY基因,出生胎儿均为男性;另有2人为假阴性结果.39人检测出exon 7和10,其中38人基因型结果与胎儿出生后血清学结果相符,1例假阳性结果;1人未检测到SRY、exon 7和10的标本,检测到RASSF1A证明胎儿DNA存在,且胎儿出生后证实为RhD阴性女婴.结论 建立了基于RASSFIA为标志的、符合中国人RHD基因特点的RhD阴性孕妇血浆游离DNA中胎儿RHD基因的检测程序,可用于临床无损性产前胎儿RhD血型预测.
