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组织工程骨促进大鼠骨缺损修复的实验研究
目的 探讨组织工程骨对大鼠骨缺损的修复效果. 方法 取16只成年健康Wismr大鼠,体重250～300 g,雌雄不限,制备血小板裂解液(platelet lysate,PL).将PL、异体脱钙骨颗粒(allogeneic decalcified bone granules,ADBG)与Col Ⅰ凝胶混合,构建PL/ADBG/Col Ⅰ(PAC)及ADBG/Col Ⅰ(AC).取8只成年健康Wistar大鼠,体重250～300 g,雌雄不限,分离培养BMSCs.取第5代BMSCs以1×106个/mL浓度接种至PAC复合培养,体外构建组织工程骨(PACB).另取成年健康Wistar大鼠40只,制备双侧股骨髁缺损模型,随机分为A、B、C、D 4组(n=10),分别植入400 mg PACB、PAC、AC和Col Ⅰ.术后4周,行X线片及组织学观察、ALP活性检测,评价骨缺损修复效果. 结果 术后4周,A、B、C、D组骨密度分别为(7.31±0.54)、(4.36±0.67)、(2.12±0.47)、(1.09±0.55)像素:修复区新生骨软骨和成活的移植骨片总面积分别为(412.82±22.31)、(266.57±17.22)、(94.34±20.22)、(26.12±12.51)像素/视野;股骨髁内ALP含量分别为(94.31±7.54)、(69.88±4.12)、(41.33±3.46)、(21.03±3.11)U/L;以上指标A组均高于B、C、D组,D组低,差异均有统计学意义(P<0.05).流式细胞仪分析显示,T细胞亚群CD3+CD4+CD8-、CD3+CD8+CD4-百分比和CD4/CD8比值在各组间差异均无统计学意义(P>0.05). 结论 体外构建的PACB可促进大鼠骨缺损修复.
