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  • 应用联合酶建立BALB/c鼠枯否氏细胞体外分离培养方法

    作者:郑雪莲;严茂林;廖大清;周总光;陈珂玲

    目的 用作用功效不同的酶联合消化分离 BALB/c 鼠枯否氏细胞(KC),建立简便易行,产量、活性,纯度较稳定的 KC 分离培养方法.方法 将0.1%Ⅳ型胶原酶、0.2%链霉蛋白酶、0.01%Dnase Ⅰ酶按1:1:1比例混合原位灌注和离体消化肝组织,经 Percoll 梯度离心,贴壁培养纯化细胞,应用荧光显微镜观察、免疫组织化学染色、吞噬功能实验进行鉴定.结果 KC获得率为(2~3)×106/鼠肝,细胞存活率达 96%,免疫组化和吞噬实验鉴定细胞纯度达 92%.KC 贴壁后形态大小不规则,呈多角形或星形,免疫组织化学染色显示溶菌酶阳性,胞浆内见吞噬的碳素墨汁颗粒.结论 用作用功效不同的酶联合消化KC,经梯度离心和贴壁培养,可获得高产量、高活性、高纯度的 BALB/c 鼠 KC,为进一步研究KC在肝脏疾病中的作用提供可靠的细胞来源.

  • 试析酶的联合检验在肝病中的临床应用

    作者:伍秀丽

    目的:本文主要讨论应用酶的联合检验检测肝中存在的酶活性的异常,从而检测肝功能是否发生改变,进而利用现代治疗技术进行治疗。方法据我院2014年4月-2015年4月一年来收治及检测患有肝癌的患者5例、急慢性肝炎患者25例、肝硬化患者10例,通过对他们体内的谷草转氨酶、谷丙转氨酶、胆碱酯酶、L-乳酸脱氢酶(5)、γ-谷氨酰转肽酶等各种酶含量的联合检验,测出他们所患肝功能疾病的类型及在治疗完成后对疾病的跟踪检验;然后通过检测25例正常人的这些体内酶指标,将两组数据进行对比,比较各种酶指标。结果患急性肝炎的患者的谷丙转氨酶指标超过正常值。若谷丙转氨酶和谷草转氨酶的指标正常,γ-谷氨酰转肽酶的指标升高,超过标准,出现的患者一般是酒精性肝炎。AST/ALT>1,则肝功能受损严重,而如果两者指标的比值大于等于二则将会导致肝硬化或肝癌。具体情况还要根据患者的以往病史、症状、身体状态等确定。比较正常人和患者,两者所得的结果具有统计意义(p<0.05)。讨论利用上述酶联合进行肝病临床检验具有实际意义,在目前临床中也被广泛应用,能被应用于临床肝病检测。

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