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精子抗原肽的合成及其在酶联免疫吸附法检测抗精子抗体中的应用价值
目的:以合成精子抗原肽为抗原建立酶联免疫吸附测定法( ELISA)检测抗精子抗体(AsAb).方法:通过PS3全自动合成仪合成精于肽P10G、YLP12和SP17抗原肽,经反相高效液相色谱(HPLC)纯化和质谱鉴定,分别包板制备ELISA试剂盒,并检测血清标本.结果:成功合成3种目的肽,质谱分析结果主峰分子量与理论值基本一致,HPLC结果显示其纯度为97.5%、97.78%和95.5%.以3种合成肽为抗原建立ELISA检测AsAb,与商品化试剂盒比较,均显示极好的一致性(Kappa值>0.75).结论:全自动固相多肽合成技术可用于高纯度的精子抗原肽合成,所合成的P10G、YLP12和SP17抗原肽均具有较好的抗原活性,可作为ELISA的包被抗原用于AsAb检测.
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精子抗原肽P10G和YLP12的合成及在ELISA检测中的意义
目的 人工合成精子肽P10G和YLP12,以此为抗原建立检测抗精子抗体(AsAb)的酶联免疫吸附测定法(ELISA).方法 用PS3全自动合成仪合成精子肽P10G和YLP12,经反相高效液相色谱纯化和质谱鉴定.分别包板制备ELISA试剂盒,用以检测血清中的AsAb.结果 成功合成两种目的肽,质谱结果显示其相对分子质量均与理论相对分子质量相吻合,高效液谱法(HPLC)结果显示其纯度为97.5%和97.8%.以该两种合成肽为抗原,建立AsAb的ELISA,与商品化试剂盒比较均显示极好的一致性(Kappa值为0.77和0.79,>0.75).结论 全自动固相多肽合成技术可用于合成高纯度的精子抗原肽,所合成的P10G和YLP12均具有较好的抗原活性,可作为包被抗原用于AsAb的ELISA检测.