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SHSY5Y人神经母细胞瘤细胞文献资料
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MALAT1抑制Aβ25-35诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖并促进细胞凋亡及其机制
目的 探讨长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)对Aβ25-35诱导的阿尔茨海默病(AD)神经细胞的细胞周期、细胞增殖凋亡的影响.方法 利用β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)处理人神经母细胞瘤细胞SHSY5Y建立AD细胞模型.将AD SH-SY5Y细胞随机分为对照组、pCDH空载体(pCDH-EV)组、MALAT1过表达(pCDH-MALAT1)组、抑制表达空载体(pSICOR-EV)组、抑制MALAT1表达(pSICOR-shMALAT1)组.噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测转染48 h后的细胞周期和细胞凋亡率,Western blot法检测细胞BAX、Bcl2、胱天蛋白酶3(caspase-3)以及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化的PI3K (p-PI3K)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和磷酸化的mTOR(p-mTOR)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、磷酸化的GSK3β(p-GSK3β)蛋白水平.结果 成功构建AD细胞模型和过表达及敲低MALAT1的表达载体.敲低MALAT1水平后,显著抑制AD模型细胞的增殖、细胞阻滞于G1期、促进细胞凋亡.同时上调BAX、caspase-3蛋白水平,下调Bcl2、p-PI3K、p-mTOR、p-GSK3β蛋白水平.过表达MALAT1则可逆转以上作用.结论 敲低MALAT1水平可阻断PI3K/mTOR/GSK3β通路抑制Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞增殖,促进细胞凋亡.
