您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
人鹅型溶菌酶2文献资料
-
人精浆中人鹅型溶菌酶2(HLysG2)的纯化及其酶学活性分析
目的 从人精浆中分离纯化天然人鹅型溶菌酶2 (HLysG2)并对其酶活性进行分析.方法 通过Western blot法检测HLysG2在精液中的分布;分别使用阳离子交换层析、甲壳素亲和层析和分子筛层析技术从精浆中分离目的蛋白并利用Westernblot法及质谱分析对其进行鉴定;使用高效液相色谱(HPLC)法分析纯化产物的纯度;使用比浊法测定HLysG2的适pH值、适离子浓度、适温度和标准酶活性;使用克隆形成单位法测定HLysG2的杀菌活性.结果 利用Western blot法在精浆中检测到HLysG2的存在;从人精浆中分离到相对分子质量(Mr)约21 500的目的蛋白并通过Western blot法及质谱分析鉴定其为HLysG2.纯化产物纯度达到99.0％以上.在pH6.4,30℃,Na+浓度为0.09 mol/L的条件下,HLysG2高酶活性达到13 800 U/mg.体外检测显示HLysG2对溶壁微球菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌具有杀菌作用,但对铜绿假单胞杆菌和大肠埃希菌的杀菌作用不显著.结论 使用层析方法可以从人精浆中成功分离纯化到天然HLysG,其在体外具有对Gram阳性菌的杀菌活性,提示其可能在男性生殖系统的先天免疫中发挥作用.
