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X连锁的α地中海贫血/精神发育迟滞综合症(ATRX)文献资料
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抗ATRX-C2193-2492多克隆抗体的制备和鉴定
目的 制备X连锁的α地中海贫血/精神发育迟滞综合症(ATRX)蛋白C端的多克隆抗体,分析ATRX蛋白在宫颈组织中的表达和定位.方法 将纯化后的6 His-ATRX-C2193-2492蛋白免疫BALB/c小鼠,获得抗血清;饱和硫酸铵盐析沉淀法以及亲和层析法纯化抗血清,制备抗ATRX-C2193-2492多克隆抗体.采用ELISA检测抗体效价;并用Western blot法鉴定其特异性;利用免疫组织化学技术检测宫颈癌组织细胞中ATRX的表达与定位.结果 制备的ATRX-C2193-2492抗血清效价可达1:12 800,该抗体能特异性识别ATRX-C2193-2492蛋白;并检测出在宫颈癌癌旁组织中ATRX具有较高表达并主要定位在细胞核,而在宫颈癌组织细胞中虽仍主要表达于细胞核,但表达量明显减少.结论 成功制备了抗ATRX-C2193-2492多克隆抗体,能够应用于宫颈组织中的ATRX蛋白表达的检测.
