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肌源神经营养因子(MDNF)对体外培养的大鼠脊髓运动神经元缺氧时p53表达的影响
本研究目的是观察缺氧时肌源神经营养因子(MDNF)对体外培养的大鼠脊髓运动神经元p53蛋白表达的影响.从成鼠和胎鼠骨骼肌中提取MDNF.在胎鼠脊髓运动神经元培养第7 d时将其分成对照组和实验组(包括成鼠MDNF组和胎鼠MDNF组),取100 μl MDNF(0.1 μg/ml)加入培养大鼠脊髓运动神经元的培养液中,对照组加入等量的PBS.然后用液体石蜡封闭液面造成神经元缺氧损伤,缺氧3 d后,应用Nissl染色、原位末端标记、免疫组化方法,对损伤的大鼠脊髓运动神经元进行检测.结果表明:培养的大鼠脊髓运动神经元缺氧3 d后,经MDNF孵育可使脊髓运动神经元TUNEL、p53表达均较对照组明显减弱,神经元损伤程度减轻,神经元存活数明显高于对照组,且胎鼠MDNF的效果更好.提示:大鼠脊髓运动神经元缺氧后可出现神经细胞凋亡,但胎鼠MDNF较成鼠MDNF更能减弱缺氧时脊髓运动神经元p53的表达,抑制缺氧后神经元的死亡.
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肌源神经营养因子(MDNF)对体外培养大鼠脊髓运动神经元划伤后Bcl-2表达的影响
为检测大鼠肌源神经营养因子对体外培养大鼠脊髓运动神经元划痕损伤后Bcl-2表达的影响,本实验从成鼠和乳鼠骨骼肌中提取出肌源神经营养因子.在胎鼠脊髓运动神经元培养第7d时将其随机分成对照组和实验组(成鼠组和乳鼠组),取100μl肌源神经营养因子(0.1μg/ml)加入实验组,对照组加入等量的PBS,同时进行划痕损伤.损伤后第3 d计数各组存活的运动神经元,行Nissl染色和免疫组化反应,计数Bcl-2免疫反应(Bcl-2-IR)阳性神经元数量,并在图像分析仪上对Bcl-2-IR阳性神经元作光密度分析.结果发现,损伤后第3 d,实验组运动神经元存活数,bcl-2-IR阳性神经元数和平均光密度均明显高于同期对照组,而乳鼠肌源神经营养因子组功效优于成鼠肌源神经营养因子组.结果提示,大鼠肌源神经营养因子对体外培养的受损运动神经元具有增强Bcl-2表达、减少凋亡和损伤修复等作用,且乳鼠的此因子效能尤佳.
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肌源神经营养因子修复大鼠周围神经损伤
目的:观察肌源神经营养因子(MDNF)对大鼠周围神经损伤修复的影响. 方法:从成鼠骨骼肌中提取出MDNF,取10 μL MDNF(0.1 mg/L)注射到大鼠坐骨神经损伤段为实验组,同时设实验对照组(注射生理盐水)和正常对照组. 术后20 d用辣根过氧化物酶示踪法(HRP)、尼氏染色法、特殊三色染色法对再生神经进行形态学观察和计量学统计. 结果:注射MDNF的周围神经损伤部有再生的神经纤维通过;MDNF组的再生神经在形态学及计量学上均优于生理盐水组. 结论: 肌源神经营养因子对周围神经损伤后的修复有较好的促进作用.
