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  • 帕金森病细胞模型中维生素C调控SIRT3影响自噬水平的研究

    作者:王元欣;岳康异;鱼洋;武秀权;孙季冬;张磊

    目的 探讨维生素C(Vit C)通过调控沉默信息调解转录因子3(SIRT3)影响帕金森病模型中PC12细胞自噬的意义和作用机制.方法 培养拟神经元PC12细胞株,随机分组为:正常对照组(Control组)、单纯Vit C组(Vit C组)、帕金森病组(MPP+组)和Vit C治疗组(Vit C+MPP+组),在含有Vit C组中分别加入400 μmol/L Vit C孵育6h后,在含有MPP+组中均加入700 μmol/LMPP+,模拟帕金森病的神经细胞损伤,孵育48 h后,利用细胞增殖-毒性检测试剂盒(cell countingKit-8,CCK-8)检测细胞存活率;利用小鼠乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH变化;Western blot(WB)检测PC12细胞中SIRT3、微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ)的表达变化情况,免疫荧光检测细胞SIRT3、LC3-Ⅱ的表达变化情况.结果 CCK-8和LDH检测结果提示,Vit C能改善细胞生存环境,明显减轻帕金森病PC12细胞损伤,提高细胞活力;同样的,WB结果提示,与MPP+组比较,Vit C上调SIRT3和LC3-Ⅱ的表达,促进神经元自噬的发生,组间差异有统计学意义(P<0.05);同样的,免疫荧光结果显示,Vit C+MPP+组中SIRT3和LC3-Ⅱ荧光强度均较MPP+组增加.结论 Vit C可以激活SIRT3表达,并提高细胞自噬,发挥一种内源性的神经保护作用,拮抗MPP+对PC12细胞的损伤.

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