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  • 从呼吸道标本中分离人偏肺病毒及病毒培养方法比较

    作者:黄文博;伍时冠;刘文宽;周荣;杨子峰

    目的 从急性呼吸道感染患者的鼻咽拭子标本中分离人偏肺病毒(hMPV),同时利用分离株比较3种病毒培养方法,探索适合于临床病毒实验室分离培养hMPV的方法.方法 接种55份经实时荧光定量PCR (real time PCR)法检测为hMPV阳性的鼻咽拭子标本至Vero E6细胞,连续盲传培养3代.每天观察细胞病变,结合real time-PCR和直接免疫荧光法(DFA)检测病毒的核酸复制和蛋白抗原,对分离株的G和F基因序列进行同源性分析.利用real time-PCR比较转鼓培养法、离心培养法和静置培养法3种方法hMPV的复制效率.结果 从55份临床标本中分离鉴定出3株hMPV病毒(GZ/1/12、GZ/2/12、GZ/3/12),序列同源性分析显示3株临床分离株属于B型.hMPV病毒复制效率比较:转鼓培养法与离心培养法对hMPV复制效率相当,二者皆优于静置培养法.而离心培养法的操作更简便,更适用临床病毒实验室.结论 成功分离鉴定出3株hMPV临床株,离心培养法更适合临床病毒实验室分离培养hMPV.

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