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高效液相色谱法测定一次性使用真空采血管中的EDTA-Na2
目的：建立一次性使用真空采血管中的E D TA-N a2的高效液相色谱检测方法。方法：采用Venusil MP C18柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相为甲醇-25%四丁基氢氧化铵-88%甲酸-水（20：1.3：0.6：980）（pH3.5）；检测波长：254nm；柱温：30?C；流速：0.6 mL/m i n。结果：乙二胺四乙酸二钠峰不受干扰，在4μg~100μg/m l浓度范围内线性关系良好（r=1.0000）。高、中、低3种浓度的平均回收率为97.4%。结论：本方法快速简便，专属性强，重复性好，结果准确可靠，适用于多种一次性使用真空采血管中EDTA-Na2的检测。
关键词： 乙二胺四乙酸二钠盐 一次性使用真空采血管 高效液相色谱法 -
加强结核分枝杆菌的检验
结核分枝杆菌(结核菌)，自20世纪80年代以来，引起的感染明显回升。世界上有三分之一的人口已经感染上结核菌，其中10%的人发展成活动型,每年大约有300万人死亡［1］。我国有4亿以上人口受到结核菌感染，每年至少有113万新结核病发生，死亡人数达25万［2］。结核菌对多种药物产生耐药性并呈上升趋势,根据我国25个省市对1 595例耐药性测定者中，结核菌初始耐药率为28.1%,继发耐药率为41.1%，耐3种及4种以上药物的占5.7%(全国结核流行病学抽样调资料汇编)。总之，结核菌感染率高、患病率高、耐药率高、死亡率也高，因此，加强结核菌的检测十分必要。实验室在探讨应用简便可靠的方法快速检出结核菌方面取得了很大成绩，但尚有不足，还存在着标本的收集和处理以及涂片镜检欠规范化，快速培养方法未广泛普及，快速检出的方法还不够完善。实验室应该从各个环节进一步加强对结核菌的检测，提高阳性率，为结核病的早期诊断、治疗和预防提供可靠依据。 一、标本的收集与处理 1.标本的收集： 收集标本应该使用一次性无菌容器，尽可能避免污染。收集痰标本不能使用蜡盒，因其易导致涂片结果假阳性［3］。咽拭子标本不适于涂片和培养结核菌。标本采集后应尽快送检，避免污染菌大量繁殖，除血液标本外，其他标本如不能及时送检，应放4℃冰箱保存。(1)痰标本：收集晨痰5～10 ml，连续3 d送检，一般不超过5 d。如果用于培养，好留取下呼吸道咳出的痰。(2)支气管肺泡灌洗液和支气管洗液：至少收集5 ml，置于无菌容器中，需要注意的是支气管镜不能被自来水污染，自来水中可能会有腐生菌，支气管刷洗液可放入10 ml米氏(Middlebrook)7H9肉汤中，其中含有1%～2%的牛血清白蛋白和0.5%吐温80。(3)胃灌洗液：禁食，晨起时留取标本，收集5～10 ml标本放入无菌容器中，不加防腐剂，在4 h内用碳酸钠调pH 7.0。胃灌洗液标本中易含有腐生分枝杆菌，涂片时可能有假阳性结果。(4)血液：主要是免疫功能低下，特别是艾滋病（AIDS）病人的血液标本，主要依靠BACTEC血培养瓶进行培养，一般不要把血液直接接种到固体培养基上，如果血液标本需要运送，则用肝素和聚茴香脑磺酸钠(SPS)抗凝，不能用乙二胺四乙酸二钠盐（EDTA）抗凝。(5)尿液：晨起第1次尿，留取尿前应清洗外生殖器，既可导尿也可留取中段尿。24 h贮存尿和导尿袋中的尿都是不合格的标本，标本量不应少于40 ml。(6)粪便：粪便标本应收集在无菌、无蜡、1次性使用的清洁容器内，不能少于1 g。(7)体液：脑脊液、胸腹水和心包积液应采用无菌方法收集，血性标本应用SPS抗凝，脑脊液和腹膜透析液一般只有少量分枝杆菌，较多的标本量可增加阳性率，脑脊液至少需要2 ml。(8)组织标（淋巴结、皮肤、其他活组织材料）：无菌方法取1 g组织放入无菌容器内，加入适量无菌盐水，不加固定剂和防腐剂，福尔马林浸泡的标本不能应用。
