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干细胞因子mRNA在原代白血病细胞的表达
目的观察白血病原代细胞中干细胞因子(SCF)mRNA的表达情况并探讨其与预后的关系.方法以巢式逆转录多聚酶链反应检测了49例(两种类型)白血病患者骨髓原代白血病细胞中SCFmRNA的表达情况.结果在19例急性淋巴细胞白血病(ALL)中,SCF mRNA 5例阳性、14例阴性;30例急性髓性白血病(AML)中,24例M1～M4亚型者表达SCFmRNA,4例M5及2例M6为阴性.两组间有显著差异(P＜0.05).在29例SCF阳性者中,8例(27.6%)属难治性白血病;在20例SCF阴性者中,12例(60.0%)为难治性白血病(P＜0.05).结论AML组的SCF表达率显著高于ALL;SCF阴性提示患者预后较差,其确切机制有待进一步研究.
关键词： 干细胞因子 白血病细胞 巢式逆转录聚合酶链反应 -
乳腺癌患者外周血Hmam-mRNA的检测及其临床意义
目的:寻找乳腺癌血道微小转移的肿瘤标志物,以利于早期发现乳腺癌的转移.方法:用巢式逆转录聚合酶链反应(Nested-RT-PCR)技术检测83例乳腺癌、20例乳腺良性肿瘤患者及20例健康志愿者外周静脉血、检测40例乳腺癌组织和癌旁正常乳腺组织中的乳腺珠蛋白(Hmam-mRNA)的表达,并分析Hmam-mRNA表达与相关临床指标的关系.结果:Hmam-mRNA在健康志愿者、乳腺良性肿瘤患者外周血中均为阴性;83例乳腺癌患者外周血中Hmam-mRNA表达率为28.9%(24/83),在乳腺癌患者的临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ中Hmam-mRNA表达率分别为:14.3%(2/14)、21.43%(6/28)、21.05%(4/19)、54.5%(12/22),Ⅳ期乳腺癌患者外周血中Hmam-mRNA的表达率明显高于其他各组(P＜0.05),Hmam-mRNA阳性表达与临床期别有一定关系.Hmam-mRNA的表达与患者年龄、原发癌灶大小、病理类型、ER和PR的状态无关(P＞0.05).结论:Hmam-mRNA特异表达于乳腺癌患者的外周血, Hmam-mRNA阳性提示血循环中有乳腺癌细胞,预示着有血源性转移的可能,Hmam-mRNA可能会成为诊断乳腺癌和判断预后的一个独立指标.
关键词： 巢式逆转录聚合酶链反应 乳腺癌 乳腺珠蛋白mRNA 外周血 微转移 -
乳腺癌患者外周血中SBEM mRNA的表达及意义
目的 探讨乳腺癌患者外周血SBEM mRNA表达情况及其与临床病理因素的相关性.方法 运用巢式逆转录-聚合酶链反应(nRT-PCR)检测56例乳腺癌患者外周血SBEM mRNA表达情况,以乳腺良性肿瘤患者及健康者各20例作为对照.结果 乳腺癌患者外周血SBEM mRNA表达阳性率为46.4%(26/56),乳腺良性肿瘤患者及健康者表达阳性率均为0.0%(0/20,P<0.05);乳腺癌患者外周血SBEM mRNA表达阳性率与患者有无淋巴结转移及TNM分期相关(P<0.05),但与年龄、肿瘤大小无关(P>0.05).结论 乳腺癌患者外周血SBEM mRNA可作为乳腺癌微转移的判断指标,对乳腺癌临床分期、预后判断和治疗起重要作用.
关键词： 乳腺肿瘤 黏蛋白类 巢式逆转录聚合酶链反应 微转移 -
非小细胞肺癌患者淋巴结、外周血及骨髓微转移分子诊断在肺癌外科治疗中的作用
目的探讨检测肺癌患者区域淋巴结、外周血和骨髓中微转移在肺癌外科治疗中的临床意义,以及区域淋巴结、外周血和骨髓肺癌微转移三者之间的相关性.方法应用巢式RT-PCR技术,对29例肺癌患者和11例肺良性病变患者的淋巴结、外周血和骨髓中CK19基因mRNA表达进行联合检测.结果本实验建立的巢式RT-PCR技术的敏感性可达到10-6.术前10例患者检测到外周血微转移,6例患者检测到骨髓肺癌微转移,101枚纵隔淋巴结中55枚检测到肺癌微转移.肺癌患者淋巴结、外周血和骨髓中微转移阳性检出率分别为54.5%、34.5%和20.7%,三者之间存在显著正相关(P＜0.05),外周血和骨髓微转移与肺癌组织学类型、细胞分化程度及P-TNM分期均存在密切关系(P＜0.05或P＜0.01).结论 RT-PCR法是一种特异性,敏感性均较高的肿瘤微转移检测方法;检测CK19 mRNA表达应用于肺癌微转移的分子诊断有助于选择外科手术适应证,并具有广阔的临床应用前景.
关键词： 肺肿瘤 微转移 细胞角蛋白 巢式逆转录聚合酶链反应 外科手术适应证 -
病毒性脑炎患儿脑脊液人类鼻病毒检测的价值
目的：了解儿童病毒性脑炎的病原体，建立快速、特异检测鼻病毒的方法，探讨病毒性脑炎与鼻病毒的相关性。方法收集2012年1月～12月全年期间收住在汕头大学医学院第二附属医院儿科重症监护室出现发热、惊厥症状的患儿脑脊液标本169份，应用巢式 RT-PCR 扩增脑脊液标本的鼻病毒核酸，对阳性结果进行核酸序列测定和同源性分析。结果巢式 RT-PCR 总共检测出39份鼻病毒阳性样本，总阳性检出率为23.1％；人类鼻病毒（HRV）感染的儿童中年龄在5岁以下的占87.6％；7～9月份 HRV 阳性检出率较高；序列分析显示39例 HRV 检测阳性标本中 HRV-A 型18例（46.1％，18／39），HRV-B 型7例（17.9％，7／39），HRV-C 型14例（35.9％，14／39）；28例病毒性脑炎有 8例检出 HRV，其中3例为HRV-C。结论建立的巢式 RT-PCR 可以检测到脑脊液标本中的鼻病毒片段，并且 HRV-A，B 和 C 三型均有检出，结合临床症状可认为 HRV 可能是病毒性脑炎的病原体之一。
关键词： 鼻病毒 病毒性脑炎 儿童 巢式逆转录聚合酶链反应 -
尿及癌组织中Survivin的表达对膀胱癌的早期诊断价值
目的通过对膀胱移行上皮癌患者尿脱落细胞及癌组织中抑制凋亡相关基因Survivin的检测,探讨早期发现、常规筛选膀胱癌且无损伤的方法.方法留取53例膀胱移行上皮癌、20例泌尿系其他疾病患者及10例健康志愿者新鲜中段晨尿200 mL,对53例膀胱移行上皮癌患者术后癌组织,用巢式逆转录聚合酶链反应(nested RT-PCR)检测Survivin的表达,同时行尿脱落细胞学检查及膀胱镜取材病检.结果用巢式RT-PCR检测53例膀胱移行上皮癌患者尿及癌组织中Survivin均有表达,所有样本尿中Survivin的表达敏感性为100%,特异性为90%.尿脱落细胞学敏感性为37.7%,特异性为100%.膀胱镜病检敏感性、特异性均为100%.尿及癌组织中Survivin与尿脱落细胞学敏感性比较有显著差异(P＜0.05),与膀胱镜检相同.而特异性分别为90%、100%、100%,P＞0.05,无差异.结论用巢式RT-PCR方法检测膀胱移行上皮癌患者尿及癌组织中Survivin的表达,其敏感性、特异性相同.尿脱落细胞Survivin表达敏感性、特异性高.尿取材无损伤、方便,敏感性优于尿脱落细胞学检查,与膀胱镜检相当,特异性与尿脱落细胞学检查及膀胱镜病检无差别,且对膀胱癌前病变的归转有一定价值.检测尿中Survivin有望成为临床诊断、筛检膀胱癌的较可靠方法.
关键词： 膀胱肿瘤 基因 巢式逆转录聚合酶链反应 基因表达 -
巢式RT-PCR技术检测肺癌76例微量癌细胞转移分析
目的:建立检测肺癌患者外周血及淋巴结微转移癌细胞的敏感的分子检测方法,并探讨其临床应用的意义.方法:采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术特异引物扩增CK19-mRNA,以检测肺癌患者外周血及淋巴结中CK19-mRNA的表达情况.分析CK19-mRNA扩增结果与患者临床指标的关系.结果:76例肺癌患者外周血标本中39例CK19-mRNA阳性,阳性率为51.3%,27例肺良性病变中仅1例阳性,阳性率为3.7%,15例健康对照者均为阴性.全部患者157枚淋巴结中CK19-mRNA检测出阳性率为38.9%(61/157),常规病理方法检出阳性率为14.6%(23/157),两种方法比较,有显著性差异(P＜0.05),且HE染色阴性的134枚淋巴结中,经RT-PCR法证实存在癌转移的阳性率为28.3%(38/134),两组比较有显著性差异(P＜0.05).结论:巢式RT-PCR是一种特异性和敏感性均较高的癌细胞微量转移检测方法;可能有助于肺癌细胞微转移的早期诊断.
关键词： 肺肿瘤/诊断 巢式逆转录聚合酶链反应 肿瘤转移 -
围手术期检测肝细胞癌病人外周血AFP mRNA的临床意义
目的检测围手术期肝细胞癌病人外周血AFP mRNA,通过随访评估其预后价值.方法通过巢式RT-PCR的方法,在围手术期检测了45例肝细胞癌病人外周血中AFP mRNA的表达,并进行了1～20个月不等的随访.结果在45例肝细胞癌病人外周血中,AFP mRNA的检出率分别是术前51.1%,术后7 d 24.4%,术后28 d 22.2%.多因素统计分析提示,术后28 d外周血检出AFP mRNA是提示病人复发的独立预后因素.结论采用巢式RT-PCR的方法检测肝细胞癌病人术后28 d外周血AFP mRNA有助于预测肝癌转移复发.
关键词： 肝细胞癌 甲胎蛋白 巢式逆转录聚合酶链反应 信使核糖核酸
