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中国七个地区1998-2005年急性腹泻住院患儿中星状病毒感染研究
目的 研究中国5岁以下腹泻住院患儿中星状病毒感染的流行病学特点,确定流行毒株血清型.方法 选择国内7个地区收集5岁以下腹泻住院患儿粪便标本,应用酶联免疫或PCR方法检测星状病毒,对星状病毒阳性标本应用RT-PCR方法分型并经测序确证.结果 1998-2005年在7个地区的调查点共收集1668份急性腹泻粪便标本,检测出星状病毒阳性标本91份,平均检出率为5 5%;病例全年均有发生,发病高峰主要集中在10月份到次年1月份;95%患儿年龄在2岁以下,其中以9～11月龄儿童发病多,检出率为7.4%,12～17月龄、6～8月龄、0～6月龄儿童的检出率依次为6 1%、5.6%、5.6%.确定型别的49份标本中45份为HAstV-1型,1例为HAstV-3型,2例为HAstV-5型,1例为HAstV-8型.结论 星状病毒是中国婴幼儿病毒性腹泻的重要病原之一,流行毒株以1型为主,同时存在多个型别的散在流行.
关键词： 星状病毒 巢式逆转录聚合酶链反应 流行病学 -
巢式PCR诊断儿科患者鼻病毒感染的探讨
目的了解儿科急性呼吸道感染的病毒病原,建立快速、敏感、特异的检测鼻病毒(HRV)的方法.方法根据已发表的HRV的核苷酸序列设计巢式PCR引物,并用多种呼吸道病毒的标准毒株确定方法的特异性.收集2002年11月至2003年10月的急性呼吸道感染患儿标本771例,应用巢式PCR方法检测标本中有无HRV基因片段.结果特异性检测结果显示仅HRV cDNA有预期大小的片段扩增.771例标本中HRV总检出例数为148例(148/771),占19.2%;HRV阳性检出率在咽炎患儿中达到53.3%(8/15),喉炎患儿43.8%(7/16),支气管炎患儿为28.7%(29/101),其他如急性扁桃体炎、急性肺炎等患儿也有较高的HRV阳性检出率.在2002年11月以及2003年8-10月HRV检测阳性率较高(21.6%～32.6%),尤其在2003年9月份HRV检测阳性率高,达到32.6%;2003年3-7月HRV阳性标本所占百分率较平稳,在16.0%～19.1%之间.结论建立的巢式RT-PCR可以检测到儿科呼吸道感染患儿标本中的鼻病毒基因片段;HRV是北京婴幼儿急性呼吸道感染的重要病毒病原之一.
关键词： 鼻病毒 巢式逆转录聚合酶链反应 -
乳腺小黏蛋白在检测乳腺癌患者外周血微转移中的意义
目的 探讨乳腺小黏蛋白(small breast epithelial mucin,SBEM)mRNA作为检测乳腺癌患者外周血微转移指标的临床意义.方法 用巢式逆转录-聚合酶链反应(Nested-RT-PCR)法检测22例女性胃癌、16例结/直肠癌、107例乳腺癌、40例乳腺纤维腺瘤患者和27例健康志愿者外周血中SBEM-mRNA的表达情况.结果 107例乳腺癌患者外周血中SBEM-mRNA有57例表达,阳性率为53.27%,其余对照组中SBEM-mRNA表达均为阴性.两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).SBEM-mRNA的阳性表达与患者的淋巴结转移状况和TNM分期均有相关性(P均＜0.01);而与患者的年龄、原发肿瘤大小、病理类型、ER、PR等无相关性(P＞0.05).结论 SBEM-mRNA特异表达于乳腺癌患者的外周血,可能成为检测乳腺癌患者外周血中微转移和判断预后的指标之一.
关键词： 乳腺癌 微转移 巢式逆转录聚合酶链反应 SBEM-mRNA -
乳腺癌特异性标志物人乳腺小黏蛋白的检测及临床意义
目的 通过检测乳腺癌特异性的标志物人乳腺小黏蛋白(hSBEM)在良、恶性乳腺组织及外周血中表达,探讨其作为乳腺癌细胞血行转移标志物的可能性.方法 应用巢式逆转录聚合酶链反应(nested-RT-PCR)技术,对67例乳腺癌、癌旁正常乳腺组织,16例乳腺良性肿瘤组织和患者外周血,以及20位健康志愿者外周血hSBEM的表达进行检测;同时分析胃癌、大肠癌、食管癌、肺癌和卵巢癌各5例组织中hSBEM的表达情况.结果 hSBEM在乳腺癌、乳腺良性疾病及正常乳腺组织中的表达分别为92.54%(62/67)、87.50%(14/16)及88.05%(59/67),3组间差异无统计学意义(P＞0.05);hSBEM在非乳腺癌的其他癌组织中无表达.67例乳腺癌患者外周血hSBEM检出率为50.75%(34/67),转移性及伴淋巴结转移乳腺癌患者外周血中hSBEM表达率明显高于局限性乳腺癌及无淋巴结转移者(P＜0.05);hSBEM在健康人及乳腺良性疾病患者外周血中均无表达.hSBEM的表达与患者的年龄、原发肿瘤大小、病理类型、ER和PR的状态无关(P＞0.05).结论 hSBEM特异性表达于乳腺组织,乳腺癌患者外周血检测出hSBEM提示已有癌细胞进入血液循环,因此可作为检测乳腺癌血行微转移的标志物.
关键词： 乳腺肿瘤 巢式逆转录聚合酶链反应 人乳腺小黏蛋白 微转移 -
GAGE基因表达在胸腔积液的鉴别诊断中的意义
目的 探讨胸腔积液G-抗原(GAGE)基因表达情况及其在鉴别诊断良、恶性中的意义.方法 收集胸腔积液97例,分为A、B、C和D四组,其中A组为结核性胸腔积液组,共41例;B组为其它病因组共10例;C组为恶性胸腔液细胞学检查阳性组,共40例;D组为恶性胸腔液细胞学检查阴性组,共6例.A组与B组合并为良性胸腔积液组,C组与D组合并为恶性胸腔积液组,采用通用引物巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法 检测各组标本GAGE基因表达.结果 GAGE基因在良、恶性胸腔积凌阳性率分别为3.9%(2/51)、60.9%(28/46),表达差异有统计学意义(P<0.05).结论 GAGE基因在鉴别良、恶性胸腔积液中体现出较高的敏感性和特异性,有望成为鉴别良、恶性胸腔积液有效的检测方法 之一.
关键词： Gage 巢式逆转录聚合酶链反应 胸腔积液 -
肝癌患者围手术期外周血黑色素瘤抗原-1mRNA和甲胎蛋白mRNA检测与术后复发的关系
目的探讨肝细胞癌患者围手术期外周血MAGE-1mRNA和甲胎蛋白(AFP)mRNA表达水平其与术后转移复发的关系.方法通过巢式RT-PCR,在围手术期检测了45例肝细胞癌患者外周血MAGE-1mRNA和AFPmRNA,并进行平均11个月的随访.同时以22例肝炎后肝硬化、11例肝血管瘤、12例肝转移癌患者和20例健康志愿者外周血标本作为对照组进行了MAGE-1 mRNA和AFP mRNA的对比检测.结果 MAGE-1 mRNA在12例肝转移癌患者外周血中的检出率为33.3%(4/12);肝炎后肝硬化、肝血管瘤患者和健康志愿者中均未检出.AFP mRNA在肝炎后肝硬化患者外周血中的检出率为13.6%(3/22),在肝转移癌、肝血管瘤患者和健康志愿者中均未检出.45例肝细胞癌患者外周血中,MAGE-1 mRNA/AFP mRNA的检出率分别是术前42.2%(19/45)/ 51.1%(23/45),术后7 d 20%(9/45)/ 24.4%(11/45),术后28 d 15.6%(7/45)/ 22.2%(10/45).统计分析提示,术后28 d肝细胞癌患者外周血检出MAGE-1 mRNA/AFP mRNA预示患者近期复发.并且双标志物联合检测较单标志物检测对预测复发具有更高的敏感性.结论采用巢式RT-PCR的方法联合检测肝细胞癌患者术后28 d外周血中癌特异性的MAGE-1 mRNA和肝细胞特异性的AFP mRNA有助于预测肝细胞癌患者术后的转移复发.
关键词： 癌 肝细胞 黑色素瘤抗原-1 甲胎蛋白 巢式逆转录聚合酶链反应 -
肋骨骨髓CK19 mRNA基因表达在食管癌微转移中的意义
目的：利用巢式RT-PCR 法对食管癌患者的肿瘤组织及肋骨骨髓中的CK19 mRNA进行检测，探讨两者之间的相关性，结合相应的临床资料，从而对食管癌早期远处微转移做出诊断。方法采用巢式RT-PCR 法检测食管癌患者（无远处转移35例，有远处转移8例）及食管良性病变患者的肋骨骨髓中CK19mRNA基因的表达（共12例）。结果食管良性病变患者的肋骨骨髓中均未检测出CK19mRNA基因表达，无远处转移食管癌患者肋骨骨髓中 CK19mRNA表达阳性率为54.3%(19/35)，有远处转移的食管癌肋骨骨髓中 CK19mRNA 表达阳性率为100%(8/8)，对无远处转移的患者随访24个月，CK19mRNA表达阳性的患者出现远处转移率为68.4%（13/19），CK19mRNA表达阴性的患者出现远处转移率为12.5%（2/16）。结论食管癌在早期阶段，如果在骨髓中检测到CK19mRNA 表达，提示已有食管癌远处微转移，因此早期发现食管癌微转移对判断预后及制定相应的治疗方案有重要的临床意义。
关键词： 食管癌 巢式逆转录聚合酶链反应 角蛋白 微转移 -
应用激光显微切割技术检测单个结肠细胞的基因表达
目的:探讨检测单个结肠细胞的基因表达的方法.方法: 应用激光显微切割技术(laser microdissection)从冰冻切片上将单个结肠细胞切下, 提取总RNA, 将RNA逆转录成cDNA, 采用巢式逆转录聚合酶链反应(nested RT-PCR)检测mRNA的表达.结果: 在显微镜下用紫外激光显微切割机, 将单个结肠细胞成功切下,提取RNA后, 逆转录成cDNA, 经过巢式RT-PCR扩增后,扩增产物在琼脂糖凝胶上清晰可见.结论: 联合应用激光显微切割和巢式RT-PCR可以检测单个结肠细胞的基因表达.
关键词： 激光显微切割 单细胞 基因表达 巢式逆转录聚合酶链反应 -
巢式RT-PCR方法检测胃癌病人周围静脉血癌细胞及其意义
目的:探讨胃癌患者外周血癌细胞的检测及其意义.方法:以CK19作指标,用巢式RT-PCR方法检测42例胃癌患者术前外周血中癌细胞.结果:健康人外周血中不能检测出CK19mRNA表达,用巢式RT-PCR方法检测外周血中胃癌细胞的敏感性可达1/106;42例胃癌病人外周血中检测出CK19mRNA阳性表达13例,阳性率30.9%,阳性结果与肿瘤大小、浸润深度和肿瘤分期密切相关.结论:巢式RT-PCR方法检测胃癌外周血癌细胞具有高度的特异性和敏感性,检测外周血癌细胞有助于判断肿瘤的进展程度.
关键词： 胃肿瘤 微转移 外周血 细胞角蛋白19 巢式逆转录聚合酶链反应 -
外周血glypican-3 mRNA的检测及其临床意义
目的:寻找肝细胞癌微小转移的标志物.方法:用巢式逆转录聚合酶链反应(nested-RT-PCR)技术检测60例肝细胞癌、20例非肝癌的恶性肿瘤、20例慢性乙型肝炎、20例肝硬化患者和20例健康志愿者外周静脉血中的glypican-3 mRNA.结果:Glypican-3 mRNA在健康志愿者、非肝癌恶性肿瘤、慢性乙型肝炎、肝硬化组患者的外周血中均为阴性;在肝细胞癌组外周血中glypican-3的检出率为80%(48/60).Glypican-3检出率与临床分期、门静脉癌栓、肝外转移明显相关(P＜0.05).在12例血清AFP＜25μg/L的肝癌患者血中,8例(66.7%)可检出glypican-3.结论:Glypican-3可作为血循环中有肝癌细胞的标志物,在肝癌患者中阳性预示有血源性转移的可能;并且glypican-3对血清AFP阴性或低值的肝癌患者能起到辅助诊断作用.
关键词： 癌 肝细胞 肿瘤转移 血样采集 标志监测 基因表达 glypican-3 巢式逆转录聚合酶链反应 -
食管癌患者外周血中CK19mRNA、CYFRA21-1、TPS联合检测的临床意义
目的 评价食管癌患者外周血中微转移基因标记物细胞角蛋白19(CK19)mRNA和细胞角蛋白片段21-1(CYFRA21-1)、组织多肽特异性抗原(TPS)联合测定的临床价值. 方法 取48例食管癌患者术前外周血标本,应用巢式逆转录聚合酶链反应法(nested-PCR)检测外周血单个核细胞CK19 mRNA的表达,同时采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定患者血清CYFRA21-1和TPS水平. 结果 食管癌患者外周血中CK19 mRNA和血清CYFRA21-1和TPS的阳性检出率分别为 52.1% 、83.3%和66.7%.联合检测CK19 mRNA 、CYFRA21-1和 TPS在食管癌患者中的阳性表达,发现其与患者肿瘤细胞分化程度、浸润深度、临床分期及有无淋巴结转移和远处转移等有相关性(P＜0.05或P＜0.01). 结论 在食管癌患者的随访中开展外周血中CK19 mRNA和血清CYFRA21-1和TPS的联合检测可提高食管癌微转移的检出率,以及时监控患者的病情.
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复方参七汤在人结肠癌细胞株裸鼠肝转移中的应用
目的:建立人结肠癌细胞株裸鼠肝转移模型,研究复方参七汤对裸鼠肝转移的影响.方法:对24只BALB/C裸鼠,经脾脏注入指数生长期的人结肠癌(低分化腺癌)细胞悬液(Ls174t)0.1ml,含细胞数1×106个,切除脾脏,分成实验组和对照组各12只.实验组每天喂以含0.6ml/20g体重复方参七汤颗粒饲料,对照组裸鼠喂以颗粒饲料,记录裸鼠体重、神志、摄食.喂养3周后,抽取各组裸鼠心脏血后处死,观察腹腔内肿瘤生长情况,检查肝转移癌灶数目,挖出各个癌结节并称重.标本作病理组织学检查,同时采用免疫组化(SP)方法检测肿瘤转移抑制基因nm23H1-NDPK表达;采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测裸鼠血中CK20 mRNA表达.结果:(1) 建立人结肠癌细胞株裸鼠肝转移模型,肝转移率100%.病理组织学证实肝转移癌细胞具有人结肠癌(低分化腺癌)特征.(2)实验组裸鼠实验前后体重增长4.12±0.53g,明显高于对照组3.21±0.59g(P<0.05).(3)实验组裸鼠肝转移癌结节的数目2.42±0.99个,明显低于对照组4.17±1.99个(P<0.05).(4)实验组裸鼠肝转移癌重63.67±21.29mg,明显低于对照组94.32±37.86mg(P<0.05).(5)实验组裸鼠肝转移癌重/肝重为(8.9±3.1)%,明显低于对照组(13.2±5.3)%(P<0.05).(6)实验组裸鼠肝转移nm23H1-NDPK阳性表达率为66.7%明显高于对照组16.7%(P<0.05).(7)实验组裸鼠肝转移血中CK20 mRNA表达采用半定量方法测定的相对值为 0.398±0.143,明显低于对照组0.518±0.090(P<0.05).结论:复方参七汤可抑制人结肠癌细胞株裸鼠肝转移的发生及发展.
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人结肠癌细胞裸鼠肝转移模型及其血中CK20mRNA表达的研究
目的:建立人结肠癌裸鼠肝转移模型,检测血中CK20 mRNA表达,应用于结肠癌肝转移的防治研究.方法:BALB/C裸鼠12只,腹腔内注射戊巴比妥钠麻醉,经脾脏注入指数生长期的人结肠癌低分化腺癌细胞悬液(LS174t)0.1ml, 含细胞数1×106个,切除脾脏,喂养20天后,建立人结肠癌裸鼠肝转移模型.随后,心脏采血检测血中CK20 mRNA表达,处死裸鼠观察腹腔内肿瘤生长和肝转移癌灶数目及大小,作病理组织学检查.采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测裸鼠血中CK20 mRNA表达.结果:12只裸鼠均建立人结肠癌裸鼠肝转移模型,无1只死亡.初期活跃如常体形无改变,10天后裸鼠出现消瘦、精神差,摄食量减少.裸鼠尸解肝脏表面均有灰白色转移癌结节形成,其它脏器未发现转移癌灶.病理组织学示肝转移癌灶具有人结肠癌低分化腺癌特征.血中CK20 mRNA均阳性表达.结论:经脾脏注入LS174t细胞悬液可建立人结肠癌裸鼠肝转移模型,裸鼠血中CK20 mRNA阳性表达,证实血中存在着结肠癌细胞,是形成肝转移灶的条件.
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用改良的巢式逆转录聚合酶链反应技术检测血中CK20mRNA
目的:建立一种简便、快速的检测血中微量大肠癌细胞CK20mRNA的方法.方法:用改良的巢式逆转录聚合酶链反应技术检测血中大肠癌标准细胞株VoLo的CK20mRNA.结果:浓度分别为1、10、100、1 000个/mL的大肠癌标准细胞株LoVo的每份标本,均扩增出了符合所设计片段大小的303 bp的目的产物条带.结论:用改良的巢式逆转录聚合酶链反应技术检测血中微量存在的大肠癌细胞CK20mRNA具有简便、快速、灵敏的优点,可以大力地推广于临床.
关键词： 细胞角蛋白20 大肠癌 逆转录聚合酶链反应 巢式逆转录聚合酶链反应 -
以黑色素瘤抗原基因mRNA为标记检测乳腺癌患者循环肿瘤细胞
目的 以黑色素瘤抗原-A1和A3(MAGE-A1和MAGE-A3) 基因mRNA为标记,检测乳腺癌患者循环肿瘤细胞,并探讨其临床意义.方法 采集60例乳腺癌患者癌组织、癌旁组织标本及术前、化疗后外周血和60例非肿瘤患者外周血,用巢式RT-PCR检测癌组织、癌旁组织标本及外周血单核细胞(PBMC)中MAGE-A1和MAGE-A3基因mRNA.结果 28.3%(17/60)和23.3%(14/60)的乳腺癌患者PBMC中分别检测到MAGE-A1和MAGE-A3 基因的mRNA,35.0%(21/60)的乳腺癌患者PBMC中至少可以检测到1种MAGE基因mRNA.乳腺癌患者PBMC中MAGE-A1和MAGE-A3基因mRNA的检出率与肿瘤组织中MAGE的检出率相关(P＜0.0005),肿瘤组织及外周血中MAGE的表达与肿瘤的分期、肿瘤的病理类型、年龄、受体状况、CerbB-2、 Ki-67无相关性(P＞0.05).结论 MAGE-A1和MAGE-A3基因mRNA可以作为特异性肿瘤标记物用于检测乳腺癌患者PBMC中的乳腺癌细胞,其检测结果可能有助于判断乳腺癌患者的预后.
关键词： 乳腺癌 黑色素瘤抗原 巢式逆转录聚合酶链反应 信使核糖核酸 -
改良巢式逆转录聚合酶链反应检测大肠癌血中微转移
目的 探讨改良巢式RT-PCR法检测大肠癌患者外周血中CK20 mRNA 的表达情况,并分析其与微转移的关系,建立一种简便、快速的检测血中癌细胞微转移的方法.方法 采用改良的巢式RT-PCR技术检测大肠癌患者及正常对照组外周血CK20 mRNA的表达.结果 CK20 mRNA 在正常对照组中均无表达,在大肠癌患者中阳性表达率为55.4 %(62/112).不同细胞分化程度大肠癌患者其外周血中CK20 mRNA 阳性表达率无显著性差异(P＞0.05);而不同Dukes分期大肠癌患者其外周血中CK20 mRNA阳性表达率有显著性差异(P＜0.05).结论 改良的巢式RT-PCR技术检测血中微转移大肠癌细胞的CK20 mRNA具有简便、快速、灵敏的优点,有助于癌细胞微转移的早期诊断,有助于指导辅助化疗和监测疗效.
关键词： 大肠癌 细胞角蛋白20 巢式逆转录聚合酶链反应 -
下咽鳞状细胞癌中FHIT基因异常表达的研究
目的:分析下咽鳞状细胞癌中脆性组氨酸三联体FHIT基因转录本的表达,探讨FHIT基因与下咽鳞状细胞癌生物学行为的相关性.方法:应用nested RT-PCR及DNA测序技术检测24例下咽鳞状细胞癌组织及对应的正常组织标本中FHIT基因的表达情况.结果:24例正常配对下咽组织中23例有FHIT基因完整表达,1例未见任何转录本,9例 (37.5%)下咽癌标本中检测出FHIT基因mRNA转录本的异常表达.高分化鳞状细胞癌FHIT基因转录本异常率为28.6%(2/7),中分化鳞状细胞癌为50.0%(4/8),低分化鳞状细胞癌为33.3%(3/9),各个病理分级之间的差异无统计学意义(rs=-0.0198,P>0.05 );无淋巴结转移下咽癌FHIT基因转录本异常率为33.3%(4/12),伴淋巴结转移癌组41.7%(5/12),差异无统计学意义(P<0.01).2例原发性下咽癌经测序发现,分别缺失exon8,exon7～9,所有缺失的起始处均为外显子之间的连接部位.结论:位于3P14.2的FHIT基因在下咽鳞状细胞癌中存在较高的缺失率,提示FHIT基因为下咽鳞状细胞癌的候选抑制基因,在下咽癌的发生、演化和进展中起着重要作用.
关键词： 下咽肿瘤 癌 鳞状细胞 脆性组氨酸三联体基因 抑癌基因 巢式逆转录聚合酶链反应 -
肝细胞癌患者外周血甲胎蛋白mRNA与单核细胞端粒酶活性检测
目的 探讨外周血甲胎蛋白(AFP)mRNA和外周血单核细胞(PBMC)端粒酶活性的检测在肝细胞癌(HCC)诊断中的意义.方法 采用巢式逆转录PCR(Nest RT-PCR)法检测HCC、肝脏良性肿瘤、慢性肝病患者及正常人外周血的AFP mRNA表达,聚合酶链反应-酶联免疫吸附测定(PCRELISA)检测PBMC的端粒酶活性.结果 (1)AFP mRNA在HCC外周血中阳性率为73.3%(22/30),在肝脏良性肿瘤、慢性肝病患者及正常人外周血中无表达(分别为0/10,0/30,0/30),(均P<0.001).(2)HCC患者PBMC端粒酶活性的阳性率(93.3%,28/30)显著高于肝脏良性肿瘤患者(40%,4/10)和慢性肝病患者(6.7%,2/30)及正常人(0),(分别P<0.01,<0.001,<0.001).(3)外周血AFP mRNA与HCC PBMC的端粒酶活性表达呈显著正相关(r=0.6742,P<0.05).结论 AFP mRNA是外周血HCC细胞的特异性标志物;端粒酶活性的检测具有更高的敏感性;两者的联合检测具有重要的临床意义.
关键词： 癌 肝细胞/诊断 甲胎蛋白/血液 端粒酶/血液 巢式逆转录聚合酶链反应 -
乳腺癌患者外周血SBEM mRNA的检测及其临床意义
背景与目的:乳腺癌患者的死亡原因几乎均为肿瘤远处转移.目前乳腺癌诊断尚无公认的特异性标志物,本文旨在探讨特异性的乳腺癌标志物椚橄儋小粘蛋白(small breast epithelial mucin,SBEM)在乳腺癌外周血的表达及其意义.方法:用巢式逆转录聚合酶链反应(Nested-RT-PCR)技术检测67例乳腺癌、16例乳腺良性肿瘤及20例健康志愿者外周静脉血中的SBEM mRNA的表达情况.结果:SBEMmRNA在健康志愿者及乳腺良性肿瘤患者外周血中表达均为阴性;67例乳腺癌患者外周血中SBEM mRNA表达率为50.7%(34/67),在乳腺癌患者的临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期中SBEM mRNA表达率分别为25.0%(2/8)、45.8%(11/24)、43.8%(7/16)和73.7%(14/19),在Ⅳ期乳腺癌患者外周血中SBEM mRNA的检出率明显高于其他各期(P＜0.05).SBEM mRNA的表达与患者年龄、原发癌灶大小、病理类型、ER和PR的状态无关(P＞0.05).结论:SBEM mRNA特异表达于乳腺癌患者的外周血,有可能作为判断乳腺癌血道微小转移的指标之一.
关键词： 乳腺肿瘤 肿瘤转移 巢式逆转录聚合酶链反应 乳腺小粘蛋白mRNA 外周血 诊断 -
肝细胞癌患者外周血甲胎蛋白mRNA的检测及意义
目的：探讨肝细胞癌患者外周血中微小转移及其临床意义。方法：用巢式逆转录聚合酶链反应(Nested-RT-PCR)技术检测65例肝细胞癌、21例非肝癌的恶性肿瘤、22例慢性乙型肝炎或肝硬化患者及21例健康志愿者外周静脉血中的甲胎蛋白(AFP)mRNA。结果：AFPmRNA在健康志愿者、非肝癌恶性肿瘤患者外周血中均为阴性；在肝细胞癌组外周血中AFPmRNA的检出率(67.7％，44/65)明显高于慢性乙型肝炎或肝硬化组(9.1％，2/22，P<0.01)。AFP-mRNA检出率与临床分期、门静脉癌栓、肝外转移显著相关。经1年的随访发现治疗后外周血AFP-mRNA阳性与肝癌患者预后有显著相关。在12例血清AFP<25μg/L的肝癌病人血中，7例(58.3％)可检出AFP-mRNA。结论：AFP-mRNA可作为血循环中有肝癌细胞或肝细胞的标志物，在肝癌患者，阳性预示有血源性转移的可能，可作为预测肝癌复发、转移的参考指标；并且AFPmRNA对血清AFP阴性或低值的肝癌患者能起到补充诊断作用。
关键词： 巢式逆转录聚合酶链反应 肝肿瘤 甲胎蛋白mRNA
