首页 > 文献资料
-
4株志贺菌无抗生素压力下连续传代90次的耐药表型及CRISPR/Cas系统变化
目的 分析无抗生素压力下连续传代90次的4株志贺菌耐药表型及成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白(Cas)基因变化.方法 对临床分离的4株耐药谱不同的志贺菌进行无抗生素压力连续传代90次,传代结束后用琼脂稀释法检测传代前、后志贺菌小抑菌浓度;用PCR对CRISPR位点进行扩增并测序,CRISPR Finder和Clustal X 2.1分析CRISPR位点的变化.结果 经无抗生素压力传代90次后,4株志贺菌对某些抗生素的敏感性有不同程度的增加:mel-sf1998024/zz对氨苄西林、头孢氨苄、头孢噻肟、氯霉素的耐药性降低,mel-s2014026/sx对诺氟沙星、甲氧苄啶的耐药性降低,mel-sf2004004/sx对氨苄西林、头孢呋辛、头孢噻肟、氯霉素、甲氧苄啶的耐药性降低,mel-sf2013004/bj对氯霉素的耐药性降低;志贺菌mel-sf1998024/zz和mel-sf2013004/bj经无抗生素压力传代后,CRISPR3位点3′的重复-间隔序列丢失,其中间隔序列匹配基因的编码产物是Cas蛋白.结论 志贺菌在无抗生素压力下,可降低或丢失对某些抗生素的耐药性.部分志贺菌CRISPR3位点的结构发生了变化,CRISPR3位点与cas基因可能存在共进化.
关键词： 志贺菌属 抗药性 无抗生素压力 连续传代 CRISPR/Cas系统 -
碳青霉烯类抗生素超级耐药细菌检测及抗茵策略研究进展
抗生素的滥用导致越来越多“超级细菌”的出现,对几乎所有已知抗生素耐药,严重危害人类健康.碳青霉烯类抗生素是治疗革兰阴性杆菌感染的强效β—内酰胺类药物,但近年来出现的耐碳青霉烯类肠杆菌可将其水解,对抗感染治疗构成极大威胁.由于传统抗生素类治疗发展缓慢且疗效有限,新型抗菌药物和疗法的研究开发成为对抗超级耐药菌感染的重要发展方向.本文总结了超级细菌的新型快速检测技术和抗菌策略等方面的研究进展,为实验室研究和临床治疗提供参考.
关键词： 超级细菌 耐碳青霉烯类肠杆菌 抗菌策略 CRISPR/Cas系统 综述 -
CRISPR/Cas靶向编辑技术系统与耳聋动物模型的建立
CRISPR( Clustered regularly interspaced short palindromicrepeats)/Cas( CRISPR-associated)系统是新一代的靶向基因组编辑技术系统，其突出特征是Cas蛋白，其通过gRNA( guide RNA)的引导下对外源性的DNA进行靶向切割，从而为细菌入侵核酸提供了免疫力。由CRISPR/Cas系统介导的基因靶向修饰技术成功地应用于多种细菌及多种生物的基因组靶向修饰，对人类基因组DNA的靶向修饰也已经得到了证实，并且CRISPR/Cas系统与以往技术相比在很多方面显示出了的优点。CRISPR/Cas系统在遗传缺陷疾病动物模型的建立技术中已经占有重要地位，而各种类型基因修饰动物模型是目前内耳基因功能、聋病分子机制研究的理想方法和必备条件。随着耳聋的遗传学研究不断深入，诊断水平的不断提高，对遗传性耳聋动物模型的需求也不断增多，CRISPR/Cas系统介导的基因组靶向修饰技术也会不断完善，该技术将在耳聋的遗传学研究和诊断治疗等多领域发挥更大作用。
关键词： CRISPR/Cas系统 耳聋 动物模型 -
疾病模型构建新时代——CRISPR/Cas基因编辑技术
在医学研究中,根据疾病构建模型一直是极其重要的.模型的构建对研究疾病的发生与治疗有着极为重要的意义.随着科学技术的发展,对在疾病模型构建中所应用的基因编辑技术的要求不断提高,CRISPR/Cas基因编辑技术应运而生.CRISPR/Cas是存在于细菌和古细菌中的一种免疫机制,通过人工改造CRISPR/Cas,可以使其成为一种新的基因编辑技术.相较于传统编辑方法,CRISPR/Cas系统更简单高效,易于操作,构建疾病模型成本低、耗时短,因此成为当今广泛研究和应用的方法.就CRISPR/Cas系统的基本构成、作用原理、技术方法与当前应用进行综述,并对该技术的前景进行展望,希望对有关领域的研究者有所帮助.
关键词： CRISPR/Cas系统 Cas9蛋白 基因编辑 疾病模型 -
CRISPR干扰:一种由假说到现实的基因沉默技术
在细菌和古细菌中,成簇而规律间隔的短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)是其适应性免疫系统的重要部分.Cas蛋白与crRNA形成复合体,后者以碱基互补配对方式特异性识别外源基因,Cas蛋白发挥酶活性将其切断;CRISPRi系统是将Cas9蛋白酶活性去除,复合体仅与目的基因结合而非剪切,直接阻断编码区转录,此作用机制完全不同于RNA干扰.本文重点综述CRISPRi系统基本结构及其作用机理.
关键词： CRISPR/Cas系统 基因沉默 CRISPR干扰 -
CRISPR/Cas系统在人眼相关疾病中的应用
CRISPR/Cas系统原是在细菌的免疫系统内发现的用来抵抗外源遗传物质(如噬菌体病毒)的一种防御系统.由于其精确的靶向功能,CRISPR/Cas系统被开发成一种高效的基因编辑工具,被广泛地应用于生命科学研究的各个领域,并取得了革命性的进展.本文回顾性研究相关文献中关于CRISPR/Cas系统在人眼相关疾病中的应用,并进行总结.
关键词： CRISPR/Cas系统 基因编辑技术 眼科学
