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壳聚糖-SiO_2杂化膜酶免疫传感器的研制及其快速检测副溶血性弧菌的评价
目的 为改善已有免疫传感器存在的关键技术问题--生物敏感元件的固定化方法 及其生物活性的保持,研制壳聚糖(CS)-SiO_2杂化膜酶免疫传感器,并对研制的新型传感器进行评价.方法 采用溶胶-凝胶法制备CS-SiO_2杂化膜,将辣根过氧化物酶标记的副溶血性弧菌抗体(HRP-anti-VP)掺杂于该杂化膜中,制备副溶血性弧菌酶免疫电极.通过循环伏安法表征免疫电极和监测酶促反应,根据免疫反应前后还原峰电流降低率(DP)来实现对副溶血性弧菌的检测.选择溶藻弧菌等7种菌进行特异度实验.结果 通过研究3种膜的红外光谱得出,CS-SiO_2杂化复合膜制备成功,HRP-anti-VP被固定于杂化膜中.在优化的免疫反应条件及电化学检测条件下,在10~4～10~9 cfu/ml浓度范围内,免疫电极免疫反应前后还原峰电流下降的DP与副溶血件弧菌浓度C的对数呈线性关系,线性回归方程为DP=6.5 lgC-3.319,线性相关系数0.9958,检出限为6.9×10~3cfu/ml[信/噪比(S/N)=3].该免疫电极具有较好的特异度、重现性[相对标准偏差(RSD)<6%]、稳定性(1周后电流响应为初始值的95%)和准确性(与GB/T4789.7-2003的符合率为96.7%).结论研制出的CS-SiO_2杂化膜酶免疫传感器用于快速筛检副溶血性弧菌效果良好.
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DNA电化学传感器中电极修饰条件的探讨
目的 探讨ssDNA单层膜的制备的佳条件.方法利用自组装单分子膜技术,将人工合成并修饰的含22个碱基的特异性单链DNA序列固定到金电极上制备成DNA修饰的金电极,通过控制DNA溶液的浓度、作用时间,以及改变修饰基团探讨佳的修饰条件,并利用循环伏安法初步研究了该修饰电极的电化学行为.结果 通过对不同标记探针、不同探针浓度及不同标记时间的表征,结果显示巯基化ssDNA和二硫键修饰的ssDNA探针浓度为80 μmol/L,自组装固定时间为12 h时对DNA探针的固定效率佳.结论 巯基化ssDNA和二硫键修饰的ssDNA通过自组装方法可在金电极表面形成稳定、有序的自组装单分子膜(self-assembled monolayer,SAM),可应用于SAM为基底的DNA传感器的设计与应用.
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抗癌药物马蔺子素的β-环糊精包络物研究
目的研究抗癌药物马蔺子素与β-环糊精的主-客体包络行为.方法在悬汞电极上用循环伏安法考察β-环糊精不存在和存在时马蔺子素还原波的变化.结果在0.04 mol*L-1 KH2PO4-Na2HPO4 (pH 6.8)近生理介质中,β-环糊精的引入使马蔺子素的还原波峰电流降低,峰电位正移.结论电活性客体分子马蔺子素与主体分子β-环糊精生成1∶1的包络物.用"电流法"测得其形成常数Kf值为1.92×103 L*mol-1.包络物的生成增强了马蔺子素的稳定性.
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烟酰胺在玻碳及聚吡咯修饰电极上的电化学行为
目的:研究烟酰胺在玻碳电极及聚吡咯电极上的电化学行为,有助于了解其在人体内的代谢情况.方法:在不同酸度的支持电解质溶液中,分别研究了烟酰胺在玻碳电极和聚吡咯修饰电极上的电化学信息,测试了不同电位范围内烟酰胺的循环伏安电化学信号和电化学反应产物的红外、紫外光谱.结果:在玻碳电极表面,烟酰胺可被分两步电化学还原为二氢吡啶和四氢吡啶结构.四氢吡啶结构的电化学还原产物有电活性,可被分步氧化为环内共轭双键结构和烟酰胺.结论:支持电解质的酸度对氧化还原峰的电流影响较大;聚吡咯(PPy)膜对烟酰胺的还原反应有电化学催化作用.提出了烟酰胺电化学反应的机理.
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基于层层自组装技术的对乙酰氨基酚药物电化学传感器研究
本文利用层层自组装技术制备了一种新型的Nafion/GNPs/RTIL/MWNTs/GC电极.利用循环伏安法研究对乙酰氨基酚(ACOP)在该修饰电极上的电化学特性.结果表明:ACOP在裸GC电极上表现为不可逆的电极过程,而在Nafion/GNPs/RTIL/MWNTs/GC电极上表现为很好的可逆性,氧化峰电位由0.562 V移至0.413 V,具有0.149 V的电位降；其还原峰电位为0.384 V,峰电位差仅为29 mV.该修饰电极与MWNTs/GC电极和裸GC电极比,具有更高的电催化活性；同时可加速电极与ACOP间的电子转移.本文探索了不同实验条件对该电极性能的影响,在优化的实验条件下,检测ACOP药物的线性浓度范围为2×10-7～4.0×10-4 mol·L-1,线性相关系数为r= 0.9992,其检出限为2.6×10-8 mol·L-1(信噪比为3:1)；回收率为97.9％～100.8％.将该电极用于对乙酰氨基酚片剂中ACOP的含量测定,并与药典方法比较无显著性差异.
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丝裂霉素与DNA在固体石墨电极上的相互作用研究
应用循环伏安法(CV)研究了药物丝裂霉素(MC)与小牛胸腺DNA(ctDNA)在自制的浸蜡石墨电极上的相互作用.在Na2HPO4-NaH2PO4溶液体系中,MC及MC -ctDNA反应物在电极上出现良好的还原-氧化峰.根据相应的电化学理论方程,由实验数据求得了MC及MC-DNA反应复合物的自由扩散系数及反应的表观速率常数.结果表明,固体浸蜡石墨电极可方便、灵敏地用于研究丝裂霉素及与ctDNA相互作用的电化学特性并能用于求取相关参数.
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甘珀酸钠苦参碱包合作用的研究
目的制备甘珀酸钠和苦参碱的包合物,研究甘珀酸钠和苦参碱的包合作用,测定了包合物的包合比.方法分别配制甘珀酸钠和苦参碱溶液,将两种溶液按不同比例混合,形成包合物.用X射线粉末衍射,红外光谱和核磁共振谱来表征包合物,用紫外可见分光光度法确定包合物的形成常数,用循环伏安法对包合物的电化学性质进行了研究.结果XRD,IR,1H-NMR等分析数据及熔点、比旋光度的变化确证了包合物的形成.结论甘珀酸钠和苦参碱可以形成1:1的包合物.
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循环伏安法测定银杏叶中芦丁的含量
目的 研究银杏叶中芦丁在玻碳电极上的电化学行为,测定银杏叶中芦丁的含量.方法 应用三电极体系,循环伏安法测定银杏叶中芦丁的含量,优化电解质、pH值、扫速测定条件.结果 在pH=4.2乙酸-乙酸钠缓冲溶液中、0.05 Ws扫速下,芦丁浓度与峰电流在0.404～8.08 μg/ml范围内呈线性关系,曲线方程为Y=0.079X+0.1871,相关系数(r)=0.9956.银杏叶中芦丁的含量为0.22％,平均回收率为102.87％.结论 在玻碳电极上运用循环伏安法测定银杏叶中芦丁的含量,是一种相对简捷、快速的方法.
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肺癌3p缺失区基因传感器的研究
目的：研究3p缺失区基因传感器，早发现人类个体的基因缺失，以便预测、预防肺癌的发生，即使有早期肺癌，本人积极参与治疗，也是可以治愈的。方法采用电化学中的循环伏安法与金电极的自组装法对缺失的靶基因进行检测。结果自组装的金电极用循环伏安法可检测出缺失的靶基因。结论对3p多个缺失基因的检测，可早预防、预测、治疗肺癌，具有较好的临床意义。
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多巴胺在纳米金/氰霉氨修饰金电极上的电化学行为
目的:探索一种利用纳米金(Nano - Au)修饰电极测定多巴胺(DA)的新型检测方法.方法:通过循环伏安法(CV)对纳米金修饰电极进行表征并研究多巴胺(DA)在此修饰电极上的电化学性质.结果:在pH为7.0的磷酸盐缓冲液(PBS)中,多巴胺在该修饰电极上产生一灵敏的氧化峰,峰电流与DA浓度成线性关系.利用差分脉冲法(DPV)测定DA的浓度在1.0×10-6 mol/L～1.0×10-4 mol/L范围内线性关系良好,检出限为5.6×10-7mol/L.结论:本方法用于多巴胺针剂的检测具有检出限低,稳定性好的特点,可灵敏、准确地获得满意的结果.
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聚DL-α-氨基丙酸修饰电极的制备及应用
目的建立修饰电极测定多巴胺的新方法.方法在pH6.0的磷酸盐缓冲溶液中,用循环伏安法制备聚DL-α-氨基丙酸修饰玻碳电极,研究多巴胺在聚DL-α-氨基丙酸修饰电极上的电化学行为,建立测定多巴胺的电化学分析方法.结果在pH7.0的磷酸盐缓冲溶液中,测定多巴胺的线性范围:1.0×10-4mol/L～1.0×10-6mol/L,1.0×10-6mol/L～8.0×10-9mol/L,检测限:1.0×10-9mol/L.结论该方法简单、快速、灵敏,用于药剂中多巴胺的测定,结果满意.
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对苯二酚与牛血清白蛋白相互作用研究
目的 探讨对苯二酚与血清白蛋白的相互作用.方法 在0.05 mol/L Na2HPO4-0.05 mol/L NaH2PO4 -0.10mol/L NaCl缓冲溶液中(pH=7.30),观察对苯二酚及牛血清白蛋白与对苯二酚结合后在L-半胱氨酸修饰金电极上的电化学行为.结果 牛血清白蛋白与对苯二酚结合后可使对苯二酚的氧化峰峰电位正移,还原峰电位负移,且使苯二醌还原峰电流减小,根据对苯二酚、对苯二醌和血清白蛋白结合的饱和度,计算苯二酚、对苯二醌和血清白蛋白结合比分别为48:1和16:1.结论 牛血清白蛋白与对苯二酚结合以较强的氢键结合,对苯二醌与血清白蛋白结合力较大.
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苯酚与脱氧核糖核酸的相互作用
苯在人体内可代谢为苯酚、氢醌、苯醌等多种代谢产物.研究毒物代谢产物与DNA相互作用的方法有体内同位素前标记法[1]、体外加合物的研究[2]、体内加合物的研究[3]等,这些方法多在生物体内或在体外细胞组织中进行,由于生物代谢的复杂性,单种毒物与DNA的相互作用的实验结果不明确,不能考察单种毒物对DNA损伤机制.因此,从分子水平讨论DNA与毒物的相互作用,可以更加准确地阐明DNA损伤机制,为认识致癌机制,有效治疗癌症提供依据.本文通过循环伏安法和荧光光谱法、紫外光谱法、量子化学方法研究苯酚与DNA的相互作用方式.现将结果报告如下.
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盐酸氯丙嗪对模拟生物膜作用的实验研究
利用循环伏安法和交流阻抗谱,以金电极支撑的硫醇单层膜(DDM)和铂电极支撑的磷脂双层膜(s-BLM)作为生物膜的模型.以Fe(CN)<,6><'3->和Fe(CN)<,6><'4->为探针分子,研究了盐酸氯丙嗪对硫醇单层膜和磷脂双层膜电化学行为的影响.结果 显示,盐酸氯丙嗪可以与硫醇单层膜和磷脂双层膜发生比较强烈的相互作用,致使[Fe(CN)<,6>]<'3-/4->穿透生物膜.本实验将为盐酸氯丙嗪体内作用机制的研究提供有效帮助.
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黄芩素在纳米金修饰电极上的电化学行为及其测定
目的:研究黄芩素在纳米金修饰电极上的电化学行为,建立对其测定的电化学分析方法.方法:该文采用循环伏安法和差示脉冲伏安法研究了黄芩素在纳米金修饰电极上的电化学行为,具体考察了支持电解质和缓冲溶液的pH及扫速等测定条件.结果:在pH 6.0的PBS缓冲溶液中,黄芩素氧化峰电流Ⅰ与其浓度C在1.25×10-7～6.98×10-6 mol/L范围内呈良好的线性关系,线性方程为Ip=0.0414x(C黄芩素)+0.8159,r=0.9956,依据LOD=3 σ/S,该方法的检测限为4.56×10-8 mol/L.结论:该方法操作简便,灵敏度高,可用于实际样品中黄芩素的直接测定.
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双分子层脂膜嵌入克霉唑前后的电化学性质研究
报道了抗真菌药克霉唑与人工脂膜的相互作用,试图阐明该药的分子生物学的作用基础.用注射方法分别制备3种双分子层脂膜(BLM),并运用循环伏安法测量了修饰物克霉唑加入前后人工双分子层脂膜的电性质.结果发现克霉唑可显著降低膜电阻并证实该药确能改变人工双分子层脂膜的通透性.
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槲皮素在电活化玻碳电极上的电化学行为测定
目的 利用循环伏安法对槲皮素在电活化玻碳电极上的电化学行为进行研究.方法 玻碳电极在pH=7.0的磷酸盐缓冲溶液中,用恒电位法在1.4 V电位下阳极氧化400 s.结果 在pH=4.4的醋酸-醋酸钠缓冲溶液中,槲皮素在0.3859 V和0.3283 V处产生一对准可逆的氧化还原峰.氧化峰峰电流与槲皮素浓度在6.04～24.16 mg/L范围内呈良好的线性关系(R2=0.9708).结论 此方法适合测定槐花中的槲皮素含量,平均回收率为103.78％.
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黄嘌呤氧化酶在SWNTs+DDAB/EPG上的电化学性质研究
目的:制备双十二烷基二甲基溴化铵与单壁碳纳米管修饰热解石墨电极(SWNTs+DDAB/EPG),研究黄嘌呤氧化酶在SWNTs+DDAB/EPG上的电化学性质.方法:采用循环伏安法对黄嘌呤氧化酶的电化学行为进行测定.结果:SWNTs+DDAB/EPG增大了黄嘌呤氧化酶的氧化还原峰电流强度,黄嘌呤氧化酶的峰电位随着pH值的增加向负电位方向移动.结论:SWNTs+DDAB/EPG对黄嘌呤氧化酶的氧化还原反应具有催化作用,并且酸度影响其电化学行为.
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邻苯二酚和邻苯二醌与牛血清白蛋白的相互作用
[目的]探讨邻苯二酚、邻苯二醌与血清白蛋白的相互作用.[方法]在Na2HPO40.05mol/L-NaH2PO40.05mol/L-NaCl 0.10mol/L缓冲溶液(pH 730)中研究牛血清白蛋白与邻苯二酚结合后在L-胱氨酸修饰金电极上的电化学行为.[结果]牛血清白蛋白与邻苯二酚结合后可使邻苯二酚的氧化峰峰电位正移、邻苯二醌还原峰电位负移,且峰电流减小,根据邻苯二酚、邻苯二醌和血清白蛋白结合的饱和度,计算邻苯二酚、邻苯二醌和血清白蛋白结合比分别为71:1和115:1.[结论]牛血清白蛋白与邻苯二酚以较强的氢键结合,邻苯二醌与血清白蛋白结合力较大.
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甲硝唑片及其伏安行为的示波极谱法测定
用示波极谱法测定甲硝唑片,并对其伏安行为进行了研究.结果表明,在pH8的Britton-Robinson缓冲液和1.5mol/L氯化钾溶液组成的底液中,甲硝唑在-0.54V(vs.SCE)出现了一个极谱还原峰,峰电流与其溶液浓度在0.4～1.5ug/L范围内呈良好线性关系(r=0.9975),检测限为1.85×10 6g/L.并用循环伏安法、脉冲极谱法研究了甲硝唑还原峰的电流性质,发现电极反应是完全不可逆的,存在吸附性.
