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青叶胆与小儿腹痛草的比较鉴别
目的 为正确识别中药饮片青叶胆与混淆品小儿腹痛草提供参考依据.方法 对二者的性状及显微结构予以比较鉴别.结果 与结论对青叶胆和小儿腹痛草的性状、显微结构进行比较,其性状、显微结构均具代表性,并有明显区别.
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青叶胆化学成分研究
目的:对龙胆科獐牙菜属植物青叶胆Swertia mileensis的干燥全草进行化学成分研究.方法:青叶胆的干燥全草用50%乙醇提取,依次用石油醚、氯仿、正丁醇萃取,对氯仿部分采用各种柱色谱进行分离纯化,通过波谱数据分析进行结构鉴定.结果:从氯仿部分分离鉴定了12个化合物,其中8个(口山)酮,1,5,8-三羟基-3-甲氧基(口山)酮(1),1-羟基-2,3,5,7-四甲氧基(口山)酮(2),1-羟基-3,5,8-三甲氧基(口山)酮(3),1-羟基-2,3,4,6-四甲氧基(口山)酮(4),1-羟基-2,3,4,7-四甲氧基(口山)酮(5),1,8-二羟基3,5-二甲氧基(口山)酮(6),1,7-二羟基-3,8-二甲氧基(口山)酮(7),1,3,5,8-四羟基咄酮(8),1个木脂素,balanophonin(9),3个三萜,齐墩果酸(10),山楂酸(11),苏门树脂酸(12).结论:化合物1,3,7～9,11,12为首次从青叶胆中分离得到.
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云南产青叶胆及其习用品药材中5种成分的HPLC含量测定
目的:建立1种用于测定青叶胆及习用品药材中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、芒果苷和红白金花内酯含量的HPLC方法,并研究5种成分在青叶胆及习用品药材中的分布.方法:Thermo BDS Hypersil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相0.1％磷酸溶液-甲醇,梯度洗脱,流速0.7～ 1.0 mL·min-1,柱温32℃,检测波长为250,260,225 nm.结果:5种成分的分离度良好,标准曲线在检测范围内均呈良好线性,r=0.999 7 ～ 0.999 9,平均回收率97.03％ ～ 102.7％,RSD为1.8％ ～6.2％.对8种30份青叶胆测定结果显示8个青叶胆品种中5种成分的有无及含量存在差异；弥勒獐牙菜、丽江獐牙菜等獐牙菜苦苷含量高达34.47～118.05 mg·g-1；西南獐牙菜中龙胆苦苷含量高,紫红獐牙菜中獐牙菜苷的含量较高；根据獐牙菜苦苷及龙胆苦苷与獐牙菜苷含量之和的比较可以鉴别小青叶胆和大青叶胆；根据龙胆苦苷与5成分总和的比值可以区别西南獐牙菜.结论:本研究建立的方法操作简单、结果准确,具有较好的重复性和稳定性,可用于青叶胆类药材的鉴定及质量评价.
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弥勒獐牙菜药材不同部位獐牙菜苦苷与齐墩果酸的含量测定
弥勒獐牙菜Swertia mileensis T.N.Hoet W.L.Shih是龙胆科Gentianaceae獐牙菜属Swertia植物,又名青叶胆、金鱼胆、小苦草. 獐牙菜苦苷(swertiamarin)和齐墩果酸(oleanolic acid)是其有效成分[1].关于弥勒獐牙菜有效成分含量测定,文献报道了分光光度法、薄层色谱-分光光度法测定獐牙菜苦苷[2,3],未见用高效液相色谱法测定獐牙菜苦苷和齐墩果酸方面的文献报道.本研究采用高效液相色谱法对弥勒獐牙菜药材不同部位獐牙菜苦苷和齐墩果酸含量进行了测定,现报道如下.
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女贞子药材及其制剂中齐墩果酸的含量测定方法研究综述
女贞子中主要成分有齐墩果酸(Oleanalic acid)、女贞子苷(Nuzhenide)、齐墩果苷、4-羟基β-苯乙基β-D葡萄糖苷、熊果酸等.齐墩果酸为其有效成分之一.含齐墩果酸的中药材较多,如连翘、槲寄生、凌霄花、车前草、青叶胆、黄花败酱、东方沙枣、冬凌草、藏茵陈等以及牛膝和五加科属植物根中所含的苷及其苷元也为齐墩果酸.
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斜茎獐牙菜化学成分指纹图谱研究
目的研究青叶胆常见市场习用品斜茎獐牙菜的化学成分指纹图谱,并比较斜茎獐牙菜与正品青叶胆(弥勒獐牙菜)的主要成分差异,为药材品种鉴定、寻找青叶胆替代品提供依据.方法采用HPLC方法,测定了12份斜茎獐牙菜的指纹图谱,确定了13个色谱峰作为共有峰;运用该方法比较了斜茎獐牙菜与弥勒獐牙菜指纹图谱的差异,通过相似度评价和聚类分析对图谱数据进行分析.结果测定了12批斜茎獐牙菜样品、5批弥勒獐牙菜样品,种内和种间相似度结果均大于0.94,相似程度高.结论所测定的12批斜茎獐牙菜样品具有很高的相似度,与药典规定正品青叶胆样品也具有高的相似度,斜茎獐牙菜具有替代药典规定正品青叶胆使用的可能性.
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青叶胆(口山)酮类化合物的成分研究
目的分离鉴定青叶胆Swertia mileensis全草的酮(口山)类成分.方法95%乙醇浸提,经硅胶柱色谱分离纯化,UV,IR,MS,1H和13CNMR波谱方法确定化学结构.结果分得12个(口山)酮成分,分别为1-羟基-2,3,4,5-四甲氧基(口山)酮(1-hydroxy-2,3,4,5-tetramethoxyxanthone,I);1-羟基-2,3,7-三甲氧基(口山)酮(1-hydroxy-2,3,7-trimethoxyxanthone,Ⅱ);1-羟基-2,3,5,7-四甲氧基(口山)酮(1-hydroxy-2,3,5,7-tetramethoxyxanthone,Ⅲ);1,5-二羟基-2,3-二甲氧基酮(口山)(1,5-dihydroxy-2,3-dimethoxyxanthone,Ⅳ);1,5-二羟基-2,3,7-三甲氧基(口山)酮(1,5-dihy-droxy-2,3,7-trimethoxyxanthone,Ⅴ);1-羟基-2,3,5-三甲氧基(口山)酮(1-hydroxy-2,3,5-trimethoxyxanthone,Ⅵ);1,5-二羟基-2,3,4,7-四甲氧基(口山)酮(1,5-dihydroxy-2,3,4,7-tetramethoxyxanthone,Ⅶ);1,8-二羟基-2,3,6-三甲氧基(口山)酮(1,8-dihydroxy-2,3,6-trimethoxyxanthone,Ⅶ);1-羟基-2,3,4,7-四甲氧基(口山)酮(1-hydroxy-2,3,4,7-te-tramethoxyxanthone,Ⅸ);1,2,3,5-四甲氧基(口山)酮(1,2,3,5-tetromethoxyxanthone,X);1-羟基-2,3,4,6-四甲氧基(口山)酮(1-hydroxyl-2,3,4,6-tetramethoxyxanthone,Ⅺ);1-羟基-2,3,6,8-四甲氧基(口山)酮(1-hydroxyl-2,3,6,8-te-tramethoxyxanthone,XⅡ).结论化合物I,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ,Ⅶ～Ⅻ为首次从青叶胆中分得.
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青叶胆化学成分的UPLC-ESI-Q-TOF-MS分析
目的 运用超高效液相色谱-电喷雾四级杆飞行时间质谱(UPLC-ESI-Q-TOF-MS)技术对中药青叶胆Swertia mileensis 的主要化学成分进行定性分析.方法 采用ACQUITY HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),用0.1％甲酸乙腈-0.1％甲酸水为流动相进行梯度洗脱,体积流量为0.4 mL/min,质谱使用ESI离子源,正负离子模式下采集数据,运用Masslynx4.1软件并结合SciFinder数据库、獐牙菜属相关文献以及对照品信息进行数据分析.结果 从青叶胆中鉴定出化学成分28个,包括7个环烯醚萜类、14个(口山)酮类、3个黄酮类、2个三萜类以及2个酚类.其中断马钱子苷半缩醛内酯、8-O-β-D-吡喃木糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖-1,7-二羟基-3-甲氧基(口山)酮、3-氧去甲双(口山)酮苷和sweriyunnanlactoneA为首次从该植物中发现.结论 UPLC-ESI-Q-TOF-MS技术能够快速准确地鉴定青叶胆中的化学成分,为其质量控制和药效物质基础研究提供一种新的研究策略.
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药用植物青叶胆的组织培养
目的针对青叶胆野生资源受到严重破坏的情况,系统地探讨了通过组织培养为手段进行人工繁殖的方法.方法以幼茎和老叶为外植体,在MS培养基上添加不同的激素配比,改变培养方式.结果在所有实验方案中,对叶片来说,较适宜诱导愈伤组织的激素组合是Zt 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.1 mg/L或BA 0.5mg/L+2,4-D 0.1 mg/L+IBA 0.1 mg/L,对幼茎来说,较适宜的诱导愈伤组织的激素组合则是BA 0.02 mg/L+Kt 0.04 mg/L+IBA0.05 mg/L;对于芽的增殖,较适宜的激素组合是BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L或BA 2.0mg/L+IBA 0.1 mg/L;而根的诱导则在MS+Kt 0.01 mg/L+IBA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L培养基上进行.结论采用组织培养方式可进行青叶胆的快速繁殖,为确保这一珍稀药用植物资源的保护和可持续利用提供有效途径.
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青叶胆滴丸的成型工艺研究
青叶胆可用于护肝降脂,同时对人体的免疫系统及变态反应还具有一定的影响,有类似于肾上腺皮质激素类药物的药理作用.本院医师在临床治疗中发现,对患有瘙痒、荨麻疹及湿疹等变态反应性皮肤病的患者,使用其片剂治疗时可以达到一定的疗效,且无一般抗组胺药物的不良反应.但片剂溶出度低,影响其临床效果.以聚乙二醇为载体制成滴丸,其体外溶出速度显著高于片剂,溶出量为片剂的4倍,具有溶解快、吸收好、生物利用度高等优点.因此,本实验对青叶胆滴丸的成型工艺进行了考察.
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珠子肝泰分散片的提取工艺研究
珠子肝泰分散片是从已有国家标准剂型珠子肝泰胶囊中改变剂型而来的,处方由珠子草(1000g)、青叶胆(200g)、黄芪(200g)和甘草(200g)四味药组成.
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青叶胆中7种主要活性成分超声提取工艺及HPLC含量测定
目的:通过HPLC-DAD多谱功能,建立多波长同时检测青叶胆中7种有效成分含量的HPLC方法:优化检测时青叶胆中7种有效成分提取的佳工艺.方法:采用HPLC-DAD扫描3D图谱,直接获得各环烯醚萜类、各酮山及齐墩果酸的适宜吸收波长.根据结果开启210 nm、240 nm和265 nm多波长采集数据同时检测7种有效成分;采用L9(34)正交试验,以7种有效成分含量为指标,考察提取溶剂的单次液料比、单次提取时间、提取温度、提取次数等因素的影响,优化超声提取工艺.结果:7种成分在线性范围内线性关系良好,相关系数r均达到0.9999,平均回收率99％～101％,RSD均小于2％;佳提取工艺单次液料比为10,每次提取30 min,提取温度为50℃,提取次数为3次.结论:HPLC-DAD多波长多通道检测青叶胆质量具有简便、高效、重复性好等特点;该提取工艺操作简单、合理、可行.
关键词： 青叶胆 HPLC-DAD 多波长检测 提取工艺 L9(34)正交试验 -
HPLC法同时测定青叶胆中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷的含量
目的:建立青叶胆中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷的含量测定方法,为控制其质量提供科学依据.方法:采用高效液相色谱法.色谱条件:色谱柱为Phenomsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)；流动相为甲醇-0.02％磷酸溶液(23:77)；检测波长为243 nm；流速为l mL/min；柱温为30℃.结果:3种成分均达到基线分离,獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷的线性范围分别为0.33 ～ 1.98 μg(r =0.9997),0.16 ～0.96 μg(r=0.9999),0.20 ～ 1.20 μg(r=0.9997),回收率分别为100.2％,99.5％,98.2％.结论:该法快速、准确、稳定,可用于青叶胆药材质量评价.
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RP-HPLC法测定不同产地青叶胆中齐墩果酸的含量
目的:建立反相高效液相色谱法测定青叶胆中齐墩果酸含量的方法.方法:采用反相高效液相色谱法.色谱条件:色谱柱为Phenomsil C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-水-冰乙酸(90∶10∶0.1);检测波长为205nm;流速为1mL/min;柱温为30℃.结果:齐墩果酸的线性范围为0.535～3.210 μg(r=0.9997),回收率为101.1%,RSD为2.2%.结论:本法简便,准确、稳定,可用于青叶胆药材质量评价.
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中药"肝炎草"药学研究概况
通过文献调研,整理了在民间被称为"肝炎草"的常见几种植物,并对其药学研究资料进行了概述.
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基于高通量测序的青叶胆转录组研究
目的 探讨青叶胆中獐牙菜苦苷生物合成的遗传基础.方法 采用Illumina Hiseq 2500高通量测序技术,对青叶胆全草进行转录组测序.结果 共获得68 643个unigene,平均长度901 bp,共有42 954条unigene注释到NR,SwissProt,COG,KOG,GO,Pfam数据库中,獐牙菜苦苷生物合成的3个阶段中,有43条unigene参与中间体的生成,3条unigene参与萜类骨架合成,25条unigene可能参与萜类后的修饰.结论 首次对青叶胆转录组进行测序分析,获得了可能参与獐牙菜苦苷生物合成的候选基因,为后续功能基因的挖掘奠定了基础.
关键词： 青叶胆 转录组 Illumina Hiseq 2500 獐牙菜苦苷 -
正品青叶胆遗传多样性的ISSR分析
目的 对青叶胆(Swertia mileensis)种质资源的遗传多样性进行研究.方法 采用ISSR分子标记技术分析青叶胆的遗传多样性.利用NTSYS软件分析遗传距离及相似系数,UPGMA方法聚类,构建亲缘关系系统图.结果 从30个ISSR引物中筛选出8个用于多态性分析,8条引物共检测到82个位点,其中79个位点具有多态性,占96.34％.遗传相似系数变化范围0.3537 ～0.9756.结论 聚类结果显示,来源于同一地区不同居群的青叶胆亲缘关系较近,并与其近缘种具有显著差异.该实验从分子水平为青叶胆及其近缘种药用植物的鉴定和开发提供了遗传基础.
关键词： 青叶胆 遗传多样性 分子水平 简单重复序列区间分析 -
青叶胆高效液相色谱特征图谱研究及指标性成分的含量测定
目的:建立青叶胆高效液相特征图谱的测定方法,并对其中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷3种指标性成分进行含量测定.方法:采用Phenomsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.02%磷酸,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温35℃,检测波长254 nm,记录时间70 min,对10批青叶胆药材的特征图谱进行研究及含量测定.结果:初步建立了青叶胆药材的高效液相特征图谱,标定了14个共有特征峰.实验中各共有峰相对保留时间的RSD小于5%,相对峰面积的相似度在80%左右.待测的3种成分均达到基线分离,獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷的线性范围分别为0.33～1.98μg(r=0.9997)、0.16～0.96μg(r=0.9997)、0.20～1.20μg(r=0.9999),回收率分别为99.9%,98.2%,100.7%.结论:此方法稳定、准确、有效,可以全面的反映青叶胆药材的质量,可作为控制青叶胆药材质量的依据.
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区域性特有濒危药用植物青叶胆的传粉生物学研究
目的:对我国区域性特有药用植物青叶胆Swertia mileensis进行系统的传粉生物学研究,了解其有性生殖特性.方法:野外定点观察结合TTC法、联苯胺-过氧化氢法、花粉-胚珠比(P/O)、杂交指数、繁育系统检测等方法.结果:青叶胆单花期2～3d,种群花期约120 d,花综合特征暗示青叶胆繁育系统属于异交,部分自交亲和,需要传粉者;然而连续2年的野外观察与套袋实验说明青叶胆有较高的自交亲和性.结论:青叶胆为异交和自交综合特征并存,并倾向于自交,为青叶胆在恶劣生境下的异交失败提供了繁殖保障;青叶胆片断化种群的有性生殖系统受到花粉限制和缺少访花昆虫的影响.
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青叶胆及民间习用品的鉴定
青叶胆为云南特有植物,具有治疗肝炎的特别效用.既是中药饮片配方药,又是制药工业生产多种制剂的原料药.以青叶胆为原料生产的制剂具有较好的发展前景.由于青叶胆药用资源日益紧缺,加之民间习用多种替代品,影响了以青叶胆为原料的方剂、制剂的药效和质量.本文就青叶胆的民间习用品作了调查,并对正品及常见的习用品的原植物和药材做了鉴定.探讨了青叶胆药用资源可持续利用的途径.
