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电针对帕金森病模型大鼠纹状体Glu浓度、GS和PAG表达的影响＊
目的：探讨电针对帕金森病（Parkinson’s Disease，PD）治疗作用的效应机制。方法：40只SD雄性大鼠随机分为4组，分别为正常组、假手术组、模型组、电针组，每组10只；采用6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine，6-OHDA）制备PD大鼠旋转模型，假手术组仅注射含0.2%维生素C的生理盐水；电针组在模型制作成功后给予电针“风府、太冲”穴治疗，每天1次，每次30 min，7天为1疗程，连续2个疗程进行治疗。采用行为学测试PD大鼠旋转行为的改变，HPLC荧光法检测纹状体Glu浓度，免疫蛋白印迹法检测纹状体谷氨酰胺合成酶（GS）、谷氨酰胺酶（PAG）的表达。结果：电针组大鼠干预前后旋转行为有显著性差异（P<0.01）；模型组大鼠与正常组及假手术组比较，Glu浓度明显升高，GS的表达明显降低， PAG的表达明显升高，组间有显著性差异（P<0.01）；电针组大鼠与模型组比较，Glu浓度降低（P<0.05）， GS的表达显著升高，PAG的表达显著降低（P<0.01）。结论：电针防治PD的效应机制可能与电针提高脑内GS表达、降低PAG表达和减轻Glu引起的细胞毒作用有关。
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大川芎方效应组分对偏头痛大鼠降钙素基因相关肽及其受体表达的影响
目的 研究大川芎方(川芎、天麻)效应组分对偏头痛大鼠下丘脑、中脑导水管周围灰质(periaqueductal gray,PAG)中降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)及其受体表达的影响.方法 将72只大鼠随机均分为正常组,模型组,阳性药组,大川芎方高、中、低剂量组,随机均分为A、B2个亚组.皮下注射硝酸甘油注射液建立大鼠偏头痛模型.采用免疫组化染色法观察B组大鼠下丘脑、中脑导水管周围灰质中CGRP的表达;酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定A组大鼠血清、下丘脑及PAG中CGRP的水平;实时荧光定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)检测A组大鼠下丘脑、PAG中CGRP及其受体CRLR、RCP、RAMP1的基因表达.结果 与正常组相比,模型组血清、下丘脑、PAG中CGRP水平明显升高(P＜0.01),下丘脑中CGRP、RCP表达上调(P＜0.05),PAG中CGRP、CRLR表达上调,RCP表达下调(P＜0.05).给予低、中、高剂量效应组分后均可降低偏头痛大鼠血清、下丘脑、PAG中CGRP的水平,中剂量可下调下丘脑中CGRP、RCP表达(P＜0.05,P＜0.01),下调PAG中CGRP、CRLR表达(P＜0.05),上调PAG中RCP表达(P＜0.05).结论 大川芎方效应组分可能通过下调CGRP在下丘脑、PAG的表达,减少CGRP合成,抑制神经源性炎症来达到治疗偏头痛的作用.
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丹蛭降糖胶囊联合阿司匹林抗栓作用的临床观察
[目的]探讨阿司匹林联合丹蛭降糖胶囊对“气阴两虚夹瘀”型高血压及高血压合并2型糖尿病患者血小板聚集率(platelet aggregation rate， PAG)和凝血功能的影响。[方法]按照就诊顺序及病史选取50例“气阴两虚夹瘀”型单纯高血压患者为A组，50例“气阴两虚夹瘀”型高血压合并2型糖尿病患者为B组，均已常规服用阿司匹林(100 mg，1次/d)＞2周，入选后两组均加用丹蛭降糖胶囊3粒，3次/d，连服4周。于治疗前后检测血小板计数（blood platelet count，BPC）、PAG、凝血全套等。[结果]①血小板计数：两组治疗前后血小板计数均无明显差异(P>0.05)。治疗前后两组间的血小板计数均无明显差异(P>0.05)。②PAG：两组患者治疗后花生四烯酸（arachidonic acid，AA）诱导的PAG均明显低于治疗前(P<0.05)。两组间比较，治疗前B组PAG较A组高，差异有统计学意义(P<0.05)；治疗后两组PAG的差异无统计学意义(P>0.05)。③凝血功能：两组患者治疗后D-二聚体、血浆纤维蛋白原（plasma fibrinogen，FIB）及部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）较治疗前均有明显改善(P<0.05)；凝血酶时间（thrombin time，TT）及凝血酶原时间(prothrombin time，PT)两组治疗前后均无明显改善(P>0.05)。两组间比较，治疗前两组D-二聚体及凝血四项无显著差异(P>0.05)；治疗后B组FIB下降值较A组明显(P<0.05)，APTT及D-二聚体下降值两组无明显差异(P>0.05)。[结论]较单独应用阿司匹林治疗，联合丹蛭降糖胶囊可以进一步降低两组患者PAG水平、改善凝血功能，对于合并糖尿病患者在降低血浆D-二聚体、FIB及APTT水平更明显。
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电针镇痛有效群和无效群大鼠下丘脑和PAG阿片肽降解酶蛋白表达的比较研究
[目的]通过检测针刺镇痛有效群、无效群大鼠下丘脑（ hypothalamus，HYPO）和中脑导水管周围灰质（ periaqueductal gray，PAG）中阿片肽降解酶中性肽链内切酶（ neutral endopeptidase，NEP）与氨基肽酶N（ aminopeptidase，APN）蛋白表达的差异，探讨电针镇痛的个体差异。[方法]选用40只 SD雄性大鼠，通过检测电针前后甩尾潜伏期（ tail flick latency，TFL）变化，筛选出电针有效群与无效群大鼠，有效群9只，无效群20只。两组大鼠适应性喂养一周后，再行一次电针治疗后立即处死，取大鼠下丘脑与PAG，采用免疫印迹法检测NEP和APN的蛋白表达情况。[结果]无效群大鼠下丘脑与PAG中NEP与APN蛋白表达均显著高于有效群大鼠，差异具有统计学意义（ P<0.01）。[结论]下丘脑和PAG内阿片肽降解酶可能是介导针刺镇痛无效的主要物质。
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氯吡格雷治疗老年冠心病的疗效及对PAG和凝血指标变化的影响
选择接诊的80例老年冠心病患者进行回顾性研究，按照随机数字表法随机分为研究组和对照组各40例，对照组采用阿司匹林治疗，研究组采用氯吡格雷治疗。观察两组凝血指标的变化及PAG情况，并对两组的临床疗效进行对比。两组治疗前、后APTT、PAG比较，差异均具有统计学意义（P＜0.05）；治疗后，研究组与对照组的APTT、PAG比较，差异均具有统计学意义（P＜0.05）；研究组总有效率为90.0%，对照组为55.0%，两组比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）。氯吡格雷治疗老年冠心病的疗效及对PAG和凝血指标变化的影响效果显著优于采用阿司匹林，且不良反应较少，安全系数较高，值得临床大力推广应用。
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伤害和非伤害性结直肠扩张时脊髓和部分脑干核团的c-fos表达
目的通过检测c-Fos表达研究伤害性和非伤害性结直肠扩张(CRD)对脊髓和脑干部分核团神经元活性的影响特点.方法分别建立20、40、80mmHg重复CRD的大鼠动物模型.扩张完毕取大鼠腰骶段脊髓和脑干组织,用免疫组化染色检测c-fos阳性神经元的表达.以插入气囊但不扩张(0mmHg)大鼠为对照组.结果①40、80mmHg扩张时c-Fos阳性神经元主要分布于脊髓后角Ⅰ-Ⅵ层,以及脊髓中间带Ⅶ层和脊髓中央管附近X层;而20mmHg时主要在脊髓后角Ⅰ-Ⅳ层表达.②40或80mmHg扩张时腰骶段脊髓c-Fos阳性神经元表达显著高于20和0mmHg(P＜0.05).③脑干延髓(NTS)的c-Fos阳性神经元表达随扩张压力增高而增高(P＜0,05),20、40、80mmHg扩张时均显著高于对照组(P＜0.05).④中脑导水管周围灰质(PAG)的c-Fos阳性神经元在40、80mmHg扩张时显著高于20和0mmHg,20mmHg扩张时c-Fos表达和对照组无显著差异(P＞0.05).结论伤害和非伤害性结直肠扩张刺激可以导致不同部位神经核团的不同反应.脊髓背角以及孤束核神经元对伤害性以及非伤害性内脏扩张刺激均产生反应,而脊髓中间带以及PAG神经元可能仅对伤害性内脏扩张刺激发生显著反应.
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韩氏针刺对海洛因依赖大鼠PAG神经元单位放电的影响
目的 初步探讨韩氏针刺对海洛因依赖大鼠PAG神经元单位放电的影响及其作用机制.方法 将36只大鼠随机分为对照组、模型组和针刺组,每组12只,模型组和针刺组按逐日递增的原则皮下注射海洛因建立成瘾模型.玻璃微电极记录模型大鼠及针刺治疗后大鼠PAG神经元单位放电的变化.结果 PAG神经元单位放电有单个不匀、束簇状和混合型三种形式,模型组混合型、中频放电所占比例显著高于对照组(P＜0.05),针刺组放电形式及放电频率接近对照组,与模型组相比有差异(P＜0.05).结论 韩氏针刺治疗可以部分恢复由于海洛因依赖导致的大鼠神经元单位放电变化,为海洛因戒断治疗提供了理论依据.
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海洛因成瘾对大鼠PAG及海马神经元c-fos蛋白表达的影响
目的 探讨海洛因成瘾对大鼠中脑导水管周围灰质(periaqueductal gray,PAG)神经元及海马不同亚区神经元c-fos蛋白表达的影响.方法 以剂量递增法皮下注射海洛因建立海洛因成瘾大鼠模型,腹腔注射纳洛酮诱发戒断症状.采用免疫组织化学法显示海洛因成瘾组大鼠与生理盐水对照组大鼠PAG神经元及海马神经元c-fos蛋白表达的差异.结果 海洛因成瘾组大鼠PAGFos阳性细胞比纳洛酮催促戒断组大鼠和生理盐水对照组明显增多.双标染色显示Fos阳性细胞均聚集在PAG腹外侧.海洛因成瘾组大鼠海马CA1区和齿状回Fos阳性神经元数目明显增加(P<0.05),CA3区无明显改变(P>.05).纳洛酮催促戒断组大鼠海马CA1区和CA3区Fos阳性神经元数目明显增加(P<0.05),齿状回Fos阳性神经元数目也明显增加(P<0.05).海洛因成瘾组大鼠与纳洛酮催促戒断组大鼠CA3区Fos阳性神经元数目有显著性差异(P<0.05).结论 PAG神经元及海马神经元c-fos蛋白表达增强可能与海洛因成瘾对神经元的损伤有关.
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小鼠脊髓背角Ⅰ层-PAG投射神经元短时程突触可塑性的特征研究
目的:研究小鼠脊髓背角Ⅰ层向中脑导水管周围灰质(periaquaductal gray,PAG)投射神经元在双脉冲刺激下表现出来的短时程突触可塑性的特点.方法:选取18 ～ 21 d C57/B16小鼠,脑立体定位注射2.5％ DiI(100 nl)至PAG,2～3d后制备400～ 650 μm带背根的脊髓薄片,孵育1h后用全细胞膜片钳技术记录DiI阳性标记的脊髓背角Ⅰ层向PAG投射(spino-PAG)神经元,在判断其为单突触传递后,给予时间间隔为110 ms的双脉冲刺激诱致刺激外周C纤维诱发的C-eEPSCs,观察其短时程突触可塑性的特点.结果:(1)应用脑立体定位注射技术向PAG注射荧光素DiI后可在脊髓背角Ⅰ层检测到逆行标记的神经元,提示该神经元为向PAG投射的神经元(spino-PAG投射神经元).(2)在给予脊神经背根时间间隔为110 ms的双脉冲刺激后,脊髓背角Ⅰ层spino-PAG投射神经元发生不同程度和性质的短时程突触可塑性改变.其中,52.8％ (28/53)的神经元表现为短时程的双脉冲易化(paired-pulse facilitation,PPF),其PPR的平均值为1.76 ±0.18;47.2％ (25/53)的神经元表现为短时程的双脉冲抑制(paired-pulse depression,PPD),其PPR的平均值为0.61 ±0.05.结论:双脉冲刺激脊神经背根诱致C-eEPSCs可使脊髓背角Ⅰ层spino-PAG神经元呈现短时程易化和短时程抑制的突触可塑性特征,提示这种短时程突触可塑性可能在痛信息的传递和敏化过程中发挥重要作用.
