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固肾培元方对肾阳虚大鼠听力影响的实验研究
目的 观察固肾培元方对肾阳虚大鼠听力的影响,为中医肾与耳的关系提供新的实验资料.方法 将耳廓反应灵敏的健康SD大鼠随机选取6只用于空白组,其余24只用于肾阳虚造模.采用肌注氢化可的松注射液的方法造成肾阳虚模型,造模14 d后,分为模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组.治疗组造模结束后开始给药,连续给药2周.实验期间观察大鼠的反应、活动情况、进食量、毛色、大小便等.给药结束后,采用MEB-2200肌电图/诱发电位仪检测大鼠的Ⅰ波、Ⅲ波潜伏期、Ⅰ-Ⅲ波峰间潜伏期及听性脑干反应(ABR).结果 固肾培元方可使肾阳虚大鼠ABR阈值降低,Ⅰ波、Ⅲ波潜伏期、Ⅰ-Ⅲ波峰间潜伏期均缩短,与空白组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 固肾培元方能够起到改善听力作用.
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补肾活血方对肾阳虚大鼠耳蜗组织Fas mRNA表达的影响
目的:观察补肾活血方对肾阳虑后大鼠耳蜗组织Fas mRNA表达的影响.方法:将耳廓反应灵敏的健康SD大鼠随机选取8只用于空白对照组,其余16只用于肾阳虚造模.采用氢化可的松注射液0.02 g·kg-1im的方法造成肾阳虚模型,造模14 d后,分为模型组、补肾活血方ig3.1 g·kg-1组.治疗组造模结束后开始给药,连续ig给药2周.给药结束后测试大鼠听性脑干反应(ABR),随后处死动物.股动脉取血测试环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)；在超净工作台上剥离耳蜗,用RT-PCR的方法检测耳蜗组织Fas mRNA的表达.结果:空白组耳蜗Fas mRNA的表达为0.210 1±0.025 6,模型组Fas mRNA的表达为0.551 4 ±0.090 3,补肾活血方组Fas mRNA的表达0.242 9±0.052 5.经统计学分析,模型组大鼠耳蜗组织Fas mRNA的表达与空白组相比,明显上调,具有统计学意义(P＜0.01)；补肾活血方可降低肾阳虚大鼠耳蜗Fas mRNA的表达,与模型组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:耳蜗组织中Fas蛋白的改变可能是促进肾阳虚后耳蜗病变发展的因子之一,补肾活血方可能通过调节Fas mRNA的表达而起到提高听力,改善耳蜗结构的作用.
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固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织NF-κBp65mRNA表达的影响
目的:观察固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织NF-κBp65mRNA蛋白表达的影响.方法:采用肌注氢化可的松注射液的方法造成SD大鼠肾阳虚模型,用RT-PCR的方法检测耳蜗组织NF-κBp65 mRNA表达.结果:固肾培元方可使肾阳虚大鼠耳蜗NF-κBp65 mRNA表达增强,与模型组比较,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论:固肾培元方可能通过调节耳蜗相关凋亡因子NF-κBp65 mRNA的表达而达到改善听力、保护耳蜗结构与功能的目的.
关键词： 固肾培元方 肾阳虚 耳蜗 NF-κBp65 mRNA 肾与耳 -
补肾活血方对肾阳虚大鼠耳蜗组织JNK mRNA表达的影响
目的:观察补肾活血方对肾阳虚大鼠耳蜗组织JNK mRNA表达的影响.方法:随机选取耳廓反应灵敏的健康SD大鼠8只用于空白对照组,模型组、补肾活血方组采用肌注氢化可的松注射液的方法造成肾阳虚模型,治疗组在造模的同时,每日给予补肾活血方药灌胃,空白对照组、模型组每日给予0.9％氯化钠溶液灌胃.2周后 测试大鼠听性脑干反应(ABR),随后处死大鼠.在超净工作台上剥离耳蜗,用RT-PCR的方法检测耳蜗组织JNKmRNA的表达.结果:与空白对照组比较,模型组ABR及内耳JNK mRNA的表达显著升高(P＜0.01);与模型组比较,补肾活血方组ABR及JNK mRNA的表达显著下调(P＜0.01).结论:补肾活血方可能通过调节JNK mRNA的表达而起到提高听力,改善耳蜗结构的作用.
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固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织Bcl-2及Bax mRNA表达的影响
目的 观察固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织Bcl-2、Bax mRNA蛋白表达的影响.方法 采用肌肉注射氢化可的松注射液的方法造成SD大鼠肾阳虚模型;空白组及模型组10 mL/kg生理盐水灌胃,中药高、中、低剂量组分别给予固肾培元方31 g/kg、15.5 g/kg及7.75 g/kg灌胃;用RT-PCR的方法 检测耳蜗组织Bcl-2、Bax mRNA表达.结果 固肾培元方可使肾阳虚大鼠耳蜗Bcl-2 mRNA表达增强,BaxmRNA表达减弱,Bcl-2/Bax比例增加,与空白组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 固肾培元方可通过调节耳蜗相关凋亡因子Bcl-2、Bax mRNA的表达而达到改善听力、保护耳蜗结构与功能的目的.
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固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织HSP70mRNA表达的影响
目的 观察固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织HSP70mRNA蛋白表达的影响.方法 采用肌注氢化可的松注射液的方法造成SD大鼠肾阳虚模型,用RT-PCR的方法检测耳蜗组织HSP70mRNA表达.结果 固肾培元方可使肾阳虚大鼠耳蜗HSP70mRNA表达增强,与空白组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 固肾培元方可能通过调节HSP70mRNA的表达而达到改善听力、保护耳蜗结构与功能的目的.
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基于肾虚大鼠耳蜗p38蛋白的表达探讨肾与耳关系的分子机制
目的:通过观察细胞凋亡因子p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)在肾虚大鼠耳蜗中的表达,探讨肾耳关系的部分分子学机制.方法:随机将健康SD大鼠24只分为空白组、模型组及治疗组(各8只).采用肌肉注射氢化可的松注射液(25 mg·kg-)连续10 d肌肉注射的方法制作肾阴虚模型,治疗组在造模的同时,每日给予补肾方药(10 mL·kg-1)灌胃.实验第11天取材,观察大鼠耳蜗和肾脏的病理改变,检测大鼠血浆cAMP/cGMP值,采用RT-PCR法测耳蜗内p38 mRNA的表达.结果:①与空白组比较,模型组大鼠与治疗组大鼠cAMP/cGMP值上升(P＜0.01),且模型组比值高,结合大鼠一般状态可认为肾阴虚大鼠造模成功.②模型组与治疗组大鼠耳蜗均出现毛细胞缺失、排列不规则等病理改变;模型组与治疗组大鼠肾脏出现肾间质纤维化或消失,肾小管扩张,脂肪变等病理改变.两组大鼠中模型组为严重.③RT-PCR法结果表明,与空白组比较,模型组和治疗组内耳p38蛋白的表达均升高(P＜0.01);与模型组比较,治疗组p38蛋白的表达显著下调(P＜0.01).结论:①肾虚能导致肾脏及耳蜗同时发生病理学改变;②肾虚能增强耳蜗p38蛋白的表达,通过开启p38MAPK从而影响耳蜗细胞的凋亡;③补肾方改善大鼠肾虚的状态则能降低P38蛋白的表达,缓解大鼠耳蜗的病理学变化.
关键词： 肾与耳 肾虚 耳蜗 p38丝裂原活化蛋白激酶 大鼠
