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稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样硬化不稳定斑块形成Bax和Bcl-2mRNA的影响
目的：观察搜风祛痰法中药复方稳斑汤对 ApoE 基因敲除小鼠主动脉粥样硬化不稳定斑块形成 Bax 和 Bcl -2 mRNA 的影响。方法选取6~8周 ApoE 基因敲除小鼠建立动脉粥样硬化（AS）不稳定斑块模型，随机分为模型组，西药组，稳斑汤低、中、高剂量组，另取正常小鼠做空白对照组。空白对照组和模型组分别给予生理盐水灌胃，西药组及稳斑汤低、中、高剂量组分别给予阿托伐他汀及不同剂量稳斑汤干预。取小鼠主动脉组织 HE 染色进行病理学观察，并采用半定量 RT - PCR技术检测 Bax 和 Bcl -2 mRNA 表达的变化。结果与空白组比较，模型组 Bax mRNA 表达水平明显增高（P <0.05），Bcl -2 mRNA 表达水平明显降低（P <0.05）；与模型组比较，稳斑汤各剂量组及西药组 Bax mRNA 表达水平明显降低（P <0.05），Bcl -2 mRNA 表达水平明显增高（P <0.05）；稳斑汤高剂量组与西药组比较 Bax mRNA、Bcl -2 mRNA 表达水平无差异（P >0.05）。光镜下观察稳斑汤各剂量组和西药组斑块面积均小于模型组。结论搜风祛痰法复方中药稳斑汤治疗 AS 的机制可能与抑制 Bax mRNA 的表达，促进 Bcl -2 mRNA 表达有关。
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四神丸对实验性结肠炎结肠组织Bax/Bcl-2mRNA,Fas/FasL的调控作用
目的:评价四神丸灌肠给药治疗实验性结肠炎疗效的同时,探讨其对结肠炎结肠黏膜Fas/FasL,Bax/Bcl-2 mRNA的调控作用.方法:三硝基苯磺酸(trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)/乙醇法复制实验性结肠炎,实验动物随机分成正常组、模型组、四神丸高、中、低剂量组(10,5,2.5 g· kg-1)及柳氮磺吡啶(salicylazosulfapyridine,SASP,30 mg·kg-1)组,灌肠给药10d后,通过体重、结肠湿重、结肠质量指数、病理损伤评分及形态学分析评价其疗效,同时分别采用流式细胞术和RT-PCT技术检测大鼠结肠组织Fas/FasL水平和Bax/Bcl-2 mRNA表达.结果:与模型组比较,四神丸中剂量组可明显降低结肠湿重及结肠指数(P＜0.05),且3个剂量组均可明显降低病理损伤评分(P＜0.05),同时典型治疗组病理切片分析可见上皮修复,黏膜下纤维结缔组织增生,溃疡浅而小,少量淋巴滤泡增生和炎细胞浸润,而且3个剂量组均可显著降低Fas在结肠黏膜表达(P＜0.05),升高Bcl-2/Bax(P ＜0.05).结论:四神丸灌肠给药有效治疗溃疡性结肠炎的作用机制之一可能是通过调控结肠组织Fas/FasL,Bax/Bcl-2 mRNA表达,延缓结肠上皮细胞凋亡或促进炎细胞凋亡实现的.
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固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织Bcl-2及Bax mRNA表达的影响
目的 观察固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织Bcl-2、Bax mRNA蛋白表达的影响.方法 采用肌肉注射氢化可的松注射液的方法造成SD大鼠肾阳虚模型;空白组及模型组10 mL/kg生理盐水灌胃,中药高、中、低剂量组分别给予固肾培元方31 g/kg、15.5 g/kg及7.75 g/kg灌胃;用RT-PCR的方法 检测耳蜗组织Bcl-2、Bax mRNA表达.结果 固肾培元方可使肾阳虚大鼠耳蜗Bcl-2 mRNA表达增强,BaxmRNA表达减弱,Bcl-2/Bax比例增加,与空白组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 固肾培元方可通过调节耳蜗相关凋亡因子Bcl-2、Bax mRNA的表达而达到改善听力、保护耳蜗结构与功能的目的.
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华蟾素对晶状体上皮细胞增殖及bcl-2 mRNA、bax mRNA表达影响
目的 探讨华蟾素对兔晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LECs)增殖及凋亡抑制基因bcl-2mRNA、凋亡促进基因bax mRNA表达的影响.方法 LECs加入华蟾素[终浓度为0.1 mg/L(低剂量)、0.2 mg/L(中剂量)及0.3 mg/L(高剂量)]培养72 h;采用MTT法测定华蟾素对兔晶状体上皮细胞的增殖抑制率;采用半定量RT-PCR方法测定华蟾素对LECs bcl-2、bax mRNA表达.结果 华蟾素能明显抑制LECs增殖,增殖抑制率随药物浓度的升高而升高,华蟾素低、中及高剂量组增殖抑制率分别为24.65%、30.13%及36.98%;bax mRNA随华蟾素浓度增加而表达增强,bcl-2 mRNA随华蟾素浓度增加而表达减弱.结论 华蟾素能有效抑制LECs增殖、诱导LECs凋亡,可能成为防治后发性白内障的药物之一.
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胰岛素对心肺复苏大鼠神经元凋亡及Bcl-2,Bax mRNA表达的影响
目的 探讨脑室内注射胰岛素对心肺复苏(cardiopulmonary resuscitation,CPR)后大鼠海马CA1区神经元凋亡和对抑凋亡因子Bcl-2,促凋亡因子Bax mRNA表达的影响.方法 实验地点在首都医科大学宣武医院试验动物中心.30只雄性SD大鼠随机(随机数字法)分为假手术组(对照组,n=6)、心肺复苏组(复苏组,n=12)及CPR后胰岛素干预组(胰岛素组,n=12).经食道超速起搏诱发6min室颤制备大鼠CPR模型；以CPR后大鼠恢复室上性心率、收缩压超过60 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)并持续10 min以上,作为自主循环恢复(ROCS)标准；ROCS 10 min后,胰岛素组大鼠经立体定位仪定位,脑室内注射12.5 μL(1 U)胰岛素,其余2组大鼠注射等量生理盐水.维持生命体征,CPR后24,72 h,应用实时荧光PCR (Realtime-PCR)测定海马CA1区神经元Bcl-2,Bax mRNA的表达量；CPR后7d,应用TUNEL染色检测海马CA1区神经元凋亡；CPR前后监测大鼠静脉血糖变化.计量资料采用均数±标准差(-x±s),组间比较采用单因素方差分析(ANOVA)；相关性统计应用Pearson相关分析,以P＜0.05为差异具有统计学意义.结果 ①CPR后24,72 h,胰岛素组大鼠Bcl-2 mRNA表达量均高于复苏组(1.45±0.05) vs.(0.79±0.01)；(0.95±0.06) vs.(0.35±0.03),差异具有统计学意义(P＜0.01).组内比较发现,胰岛素组、复苏组72 h表达均低于24 h(P＜0.01).而胰岛素组与复苏组Bax mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05),胰岛素组、复苏组72 h与24h比较差异无统计学意义(P＞0.05).②CPR后7d,胰岛素组大鼠海马CA1区神经元凋亡计数,复苏组(124.75±17.35)个/mm2明显高于对照组(5.12±3.26)个/mm2和胰岛素组(92.79±7.49)个/mm2,差异具有统计学意义(P＜0.01).③各组大鼠各时间点外周静脉血糖比较无统计学意义(P＞0.05).结论 脑室内注射1U胰岛素,能够促进CPR后大鼠神经元促凋亡因子Bcl-2 mRNA的表达,抑制神经元凋亡,具有神经保护作用.脑室注射1U胰岛素不降低外周血糖.
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添加rhGH与Gln的肠外营养对短肠大鼠小肠代偿作用的研究
目的研究添加生长激素(rhGH)及谷氨酰胺(Gln)的肠外营养(PN),对短肠大鼠残存小肠代偿的作用及作用机制.方法将SD大鼠按2×2析因设计方案随机分成STD组(-rhGH,-Gln)、rhGH组(+rhGH,-Gln)、Gln组(-rhGH,+Gln)及GG组(+rhGH,+Gln)共四组,建立PN短肠大鼠动物模型,行PN6天.PN结束后行小肠粘膜形态学定量检查,以免疫组化及TUNEL法行小肠粘膜上皮细胞PCNA表达及凋亡小体测定,RT-PCR法行凋亡相关基因bcl-2与baxmRNA表达测定,Northernblot法行小肠粘膜IGF-ImRNA表达测定.结果GG组残余小肠粘膜形态学上呈显著代偿表现,其PCNA表达明显增高,凋亡指数下降;凋亡相关基因bcl-2mR-NA表达升高,baxmRNA表达下降,P<0.01.析因分析表明rhGH与Gln间存在协同作用.小肠局部IGF-ImRNA表达在rhGH组及Gln组均增高,在GG组增高为明显,P<0.05.结论联用rhGH组与Gln,显著促进PN时短肠大鼠残余小肠代偿,二者间作用存在协同肠粘膜上皮细胞增生增加及凋亡抑制与小肠代偿密切相关;小肠局部IGF-I在rhGH与Gln协同作用的发挥中起重要介导作用.
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金欣口服液含药血清对呼吸道合胞病毒感染细胞早期凋亡调控基因mRNA影响的研究
目的:探讨金欣口服液含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)感染细胞早期凋亡及Bcl-2和Bax mRNA表达的影响.方法:采用细胞培养、血清药理学、流式细胞术和RT-PCR等实验技术检测金欣口服液含药血清抗RSV,影响细胞早期凋亡作用途径的变化.结果:RSV感染人胚肺成纤维细胞(HELF)12和24 h后细胞凋亡率均低于未感染细胞对照组(P<0.05),RSV攻击宿主细胞24 h后,Bcl-2 mRNA表达量下降,Bax mRNA表达量上升,但不足2倍增长.金欣口服液作用后,凋亡率明显高于病毒组(P<0.05),Bcl-2 mRNA表达量下降,Bax mRNA表达量上升≤0.5.结论:金欣口服液在RSV感染早期,可能通过调控凋亡相关基因拮抗其抑制细胞凋亡的作用,从而影响进入细胞内的病毒复制增殖的过程,阻止病毒的扩散.
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西酞普兰对慢性应激大鼠额叶皮质神经细胞bax mRNA、bcl-2 mRNA表达及凋亡的影响
目的:探讨西酞普兰对慢性应激大鼠的额叶皮质神经细胞bax、bcl-2 mRNA表达的影响.方法:取24只雄性SD大鼠随机分为对照组(不进行任何处理)、应激组(应激+生理盐水灌胃)、实验组(应激+西酞普兰灌胃),采用强迫游泳制造慢性应激模型(15 min/d,共4周),用原位杂交技术检测bax、bcl-2 mRNA表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡,尼康图像分析(NIS DR)软件测量各指标阳性细胞数量.结果:应激组较对照组,大鼠额叶皮质baxmRNA阳性表达细胞明显增多(P＜0.01)、染色加深;bcl-2 mRNA阳性表达细胞明显减少(P＜0.01)且染色变浅,且TUNEL阳性细胞数量增多(P＜0.01),染色增强.而实验组较应激组大鼠,额叶皮质baxmRNA阳性表达细胞减少(P＜0.01)、染色变浅,bcl-2 mRNA阳性表达细胞明显增多(P＜0.05),染色加深,且TUNEL阳性细胞数量减少(P＜0.01),染色减弱.结论:大鼠额叶皮质神经细胞bax mRNA和bcl-2mRNA的表达水平受到慢性应激的影响,导致细胞凋亡加剧,西酞普兰能够有效调控额叶皮质神经细胞bax和bcl-2 mRNA的表达水平,拮抗细胞凋亡,这可能是西酞普兰防治慢性应激引起的神经精神疾病的相关机制之一.
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Bax/Bcl-2mRNA在甲减合并子痫前期胎盘组织中的表达趋势
妊娠期高血压疾病是妊娠期特有的疾病,其病理生理变化是全身小动脉痉挛和水钠潴留,以高血压、蛋白尿为主要临床表现的疾病,可造成多脏器功能损伤.严重影响母婴健康[1-3].本研究采用原位杂交法检测Bax/Bcl-2 mRNA表达,探讨甲状腺功能减退症(甲减)合并子痫前期胎盘Bax/Bcl-2mRNA比值的表达趋势.
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氟桂利嗪对杏仁核点燃鼠海马Bax mRNA表达的影响
目的:观察氟桂利嗪对杏仁核点燃鼠癎性发作及海马促凋亡基因Bax mRNA表达的影响.方法:建立杏仁核点燃模型,予不同剂量氟桂利嗪灌喂点燃鼠.原位杂交法检测鼠脑海马Bax mRNA表达,图像分析软件测量阳性细胞平均吸光度.结果:正常大鼠海马存在少量Bax mRNA表达阳性细胞,点燃鼠海马各区Bax mRNA表达阳性细胞数及平均吸光度增加,氟桂利嗪处理后平均吸光度下降与剂量有关.结论:氟桂利嗪具有抗癫癎效应和拮抗点燃鼠海马Bax mRNA表达的作用.
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幽门螺杆菌对GES-1细胞Bax mRNA影响的研究
目的通过不同基因型的幽门螺杆菌(Hp)培养上清作用GES-1细胞，研究细胞Bax表达的变化。方法分组：（1）不同浓度NCTC11637Hp上清液的试验组，浓度分别为A组(1.3875mg/ml)，B组（2.775mg/ml），C组（5.55mg/ml）；（2）不同浓度NCTC11639Hp上清液的试验组，浓度分别为A（1.875mg/ml），B（3.75mg/ml），C（7.5mg/ml）；（3）阴性对照组(Hp培养液)；(4)空白对照组(DMEM)。各组作用GES-1细胞时间均为24h、48h、72h，用RT-PCR检测mRNA的表达。结果2.775mg/mlNCTC11637上清和3.75mg/mlNCTC11639上清作用GES-1细胞48h后BaxmRNA均显著上调（P<0.01~0.05）。结论不同基因型的Hp培养上清液可上调胃黏膜上皮细胞内Bax的表达，提示Hp可能通过激活Bax而诱导细胞凋亡。
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川芎嗪对脑缺血再灌注后皮质Bax mRNA表达的影响
目的 探讨川芎嗪对脑缺血再灌注皮质Bax mRNA表达的影响.方法 采用Wistar雄性大鼠30只,随机分组.A组为正常对照组,B组为模型对照组,C组为川芎嗪治疗组.采用原位杂交与医学图像分析技术检测Bax mRNA阳性细胞数目、平均灰度值.结果 大脑皮质Bax mRNA在B组阳性神经元多、着色深,平均数密度值高而平均灰度值低;A组中着色浅、阳性细胞数少,平均灰度值大,二者差异较显著(P<0.01).C组与B组比较,Bax mRNA阳性神经元少,平均灰度值升高(P<0.05).结论 脑缺血再灌注后Bax mRNA表达增强;川芎嗪可使其表达下降,在脑缺血再灌注损伤中起到神经保护作用.
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益气养阴方对Graves病合并白细胞减少小鼠骨髓Bax、Bcl-2 mRNA影响的实验研究
目的 观察Graves病(GD)小鼠外周血白细胞计数和小鼠骨髓Bax、Bcl-2 mRNA的表达及益气养阴方对其的影响.方法 基因枪造模建立GD小鼠模型,应用中药益气养阴方治疗30天后,检测各组小鼠外周血白细胞计数、甲状腺激素水平和小鼠骨髓Bax、Bcl-2 mRNA的表达的变化.结果 模型组小鼠外周血白细胞计数、甲状腺激素水平和小鼠骨髓Bax、Bcl-2mRNA的表达与正常组均有显著性差异(P＜0.01).中药益气养阴方可明显增加外周血白细胞数量(均P＜0.05),其中中药大剂量组明显优于中药小、中剂量组(均P＜0.01);在降低小鼠骨髓Bax mRNA的表达和升高小鼠骨髓Bcl-2 mRNA的表达方面,与模型组比较均有显著差异(P＜0.05,P＜0.01),其中中药大、中剂量组明显优于小剂量组(P＜0.01,P＜0.05).结论 益气养阴方对Graves病合并白细胞减少有较好的治疗作用.
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化浊解毒调经方对多囊卵巢综合征大鼠血清激素、Bcl-2、Bax影响的实验研究
目的:探讨化浊解毒调经方对多囊卵巢综合征大鼠血清激素、卵巢组织中抗凋亡基因Bcl-2及促凋亡基因BaxmRNA表达的影响.方法:将50只健康雌性SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、模型对照组(B组)、达英-35对照组(C组),化浊解毒调经方低剂量组(D组)、化浊解毒调经方高剂量组(E组)5组,每组10只,建立多囊卵巢综合征模型,检测5组干预前后的黄体生成素和雄激素变化及干预后大鼠Bcl-2 mRNA和Bax mRNA的表达水平.结果:高剂量化浊解毒调经汤能明显降低血清黄体生成素和血清雄激素水平,上调PCOS大鼠Bcl-2 mRNA表达量,并可降低Bax mRNA表达量,与模型组(B组)比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:化浊解毒调经方可能是通过影响卵巢组织中细胞凋亡因子的表达而改善卵巢功能.
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新福菌素对人鼻咽癌细胞株CNE-2凋亡杀伤作用的研究
目的 探讨新福菌素对人鼻咽癌细胞株CNE-2的体外杀伤效应及作用机制.方法 体外培养CNE-2细胞,应用MTT比色法观察新福菌素对CNE-2细胞增殖的抑制作用.倒置显微镜下观察实验组细胞的生长及结构变化,同时采用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测Bax mRNA基因的表达.结果 新福菌素在体外对CNE-2细胞有较强的增殖抑制作用,能诱导CNE-2细胞凋亡;同时进行Bax mRNA基因表达检测发现对照组CNE-2细胞Bax mRNA表达呈弱阳性;实验组CNE-2细胞Bax mRNA表达均呈阳性,且随着新福菌素浓度的增加而逐渐增强.结论 新福菌素对CNE-2细胞有明显的杀伤效应,杀伤机制可能是诱导鼻咽癌细胞凋亡,并与凋亡相关基因Bax mRNA表达上调有关.
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四物汤配方颗粒对骨髓抑制小鼠造血功能调控的实验研究
目的 观察四物汤配方颗粒对骨髓抑制小鼠造血功能的影响.方法 50只小鼠随机分成5组,正常组、照射处理组及3个不同剂量组.应用流式细胞术(FCM)检测小鼠骨髓细胞周期,采用原位杂交技术测定骨髓细胞凋亡基因Bcl-2 mRNA和Bax mRNA表达.结果 四物汤配方颗粒各组均能明显促进骨髓G0/G1期细胞向S期细胞以及S期细胞向G2/M期细胞的转化,增殖指数(PI)明显升高.提高骨髓细胞中Bcl-2 mRNA的表达,降低Bax mRNA的表达.结论 四物汤配方颗粒通过促进骨髓抑制小鼠细胞周期的转化及抑制骨髓细胞凋亡,而达到促进造血功能的目的.
关键词： 四物汤配方颗粒 骨髓抑制小鼠 Bcl-2 mRNA Bax mRNA -
牛蒡多糖对K562细胞增殖的抑制及其机制的探讨
目的 研究牛蒡多糖对K562细胞增殖的抑制作用并初步探索其机制.方法 MTT法检测牛蒡多糖对K562细胞增殖的抑制作用,RT- PCR检测BCL-2mRNA、Bax mRNA的表达.结果牛蒡多糖能明显抑制K562细胞的增殖;BCL-2基因表达下调,Bax的基因表达增多.结论 牛蒡多糖对K562细胞增殖有抑制作用,其机制可能与BCL-2基因表达下调,Bax的表达上调有关.
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纳洛酮对脑缺血再灌注模型大鼠神经元形态和促凋亡基因Bax mRNA
目的:观察纳洛酮对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法:36只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组(生理盐水)和纳洛酮(0.4 mg·kg-1)治疗组(n=12),后2组采用颈动脉血管引流法建立脑缺血再灌注模型.纳洛酮于缺血和再灌注开始时分别给药.灌注120 min后光镜及电镜下观察神经元形态,检测神经元及血管周围明亮带宽度及Bax mRNA阳性细胞平均密度及灰度值.结果:与模型对照组比较,纳洛酮治疗组神经元细胞形态相对完整,神经元及血管周围明亮带宽度更窄,Bax mRNA阳性细胞平均密度值减小,灰度值升高,表达减弱.结论:纳洛酮可能通过减弱促凋亡细胞Bax mRNA的表达对大鼠脑缺血再灌注损伤发挥一定的保护作用.
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小白菊内酯对人前列腺癌细胞PC-3凋亡作用的机制探讨
目的:探讨小白菊内酯诱导人前列腺癌细胞PC-3凋亡的作用及其机制.方法:体外培养人前列腺癌细胞PC-3,用不同浓度(0、10、20、40μmol·L-1)小白菊内酯作用PC-3细胞24、48、72 h后,采用CCK8法观察PC-3细胞在增殖方面的变化,采用流式细胞术检测小白菊内酯对PC-3细胞凋亡的影响,采用RT-PCR技术检测PC-3细胞bax、bcl-2的mRNA表达水平.结果:经小白菊内酯处理后,CCK8检测显示PC-3细胞增殖率显著下降(P＜0.05),流式细胞术检测显示PC-3细胞凋亡率显著升高(P＜0.05),RT-PCR检测显示PC-3细胞bax mRNA表达水平增高(P＜0.05)、bcl-2 mRNA表达水平降低(P＜0.05).结论:小白菊内酯通过诱导凋亡能抑制人前列腺癌细胞PC-3的增殖,这可能与其上调bax和降低bcl-2 mRNA表达有关.
关键词： 小白菊内酯 PC-3细胞 凋亡 Bcl-2 mRNA Bax mRNA -
前列地尔联合针刺对噪音性耳聋大鼠耳蜗毛细胞血管内皮生长因子、Bcl-2及Bax表达的影响
目的:观察针刺联合前列地尔对噪音性耳聋大鼠耳蜗毛细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、Bax及Bcl_2表达的影响.方法: 32只雄性Wistar大鼠按照随机数字法分为4 组:空白对照组、模型组、前列地尔治疗组和针刺联合前列地尔治疗组.除对照组外,其余3组制备噪音性耳聋大鼠模型.对各组大鼠进行听觉脑干诱发电位( au-ditory brainstem response,ABR)听力阈值测试.联合治疗组的针刺治疗穴位选取三焦经腧穴翳风(双)、外关(双).对各组大鼠进行耳蜗VEGF、Bax及Bcl-2表达检查.结果: 造模结束后,各组大鼠ABR听力阈值显著高于对照组;模型组VEGF水平较空白对照组低,耳蜗Bcl-2 mRNA表达减弱, Bax mRNA表达增强,差异有统计学意义(P＜0. 05);联合治疗组与模型组相比,大鼠耳蜗基底膜毛细胞VEGF水平显著恢复,耳蜗Bcl-2 mRNA表达增强, Bax mRNA表达减弱,差异有统计学意义( P＜0. 01).结论: 针刺联合前列地尔治疗能改善噪声导致的听力损害,其改善听力、保护耳蜗结构是通过调节耳蜗基底膜毛细胞VEGF、耳蜗相关凋亡因子Bcl-2、BaxmRNA的表达而达到的.
