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辣椒素处理对电针"四白"穴诱导三叉神经脊束核尾侧亚核c-fos表达的影响
目的:探讨四白穴针刺效应的传入途径.方法:SD大鼠36只,随机分成空白组、假手术组、辣椒素组、溶媒组、电针"四白"穴+辣椒素组、电针"四白"穴+溶媒组.游离一侧眶下神经,辣椒素组将浸泡有1.5%辣椒素的棉条包绕在眶下神经上.溶媒组用浸泡在溶媒中的棉条包绕在眶下神经上.采用免疫组化技术观察三叉神经脊束核尾侧亚核(cSTN)的c-fos表达.结果:空白组在cSTN各层可见到零星、散在的阳性细胞.溶媒组、辣椒素组以及假手术组cSTN的c-fos阳性细胞数与空白组相似.电针"四白"穴+溶媒组c-fos在cSTN内主要集中在浅层(Ⅰ-Ⅱ层),其阳性细胞的数量明显多于其余各组(P<0.01);cSTN的深层(Ⅲ-Ⅳ层)c-fos数量多于空白组、溶媒组和假手术组(P<0.01,P<0.05,P<0.05).电针"四白"穴+辣椒素组cSTN的Ⅰ-Ⅱ板层的c-fos阳性细胞数与电针"四白"穴+溶媒组相比明显减少(P<0.01),但cSTN的Ⅲ-Ⅳ板层的c-fos阳性细胞数与电针"四白"穴+溶媒组相比无明显变化(P>0.05).结论:C纤维可能是四白穴针刺效应(调节胃功能活动)的主要传入途径.
关键词： c-fos表达 电针 三叉神经脊束核尾侧亚核 C纤维 -
大鼠脊髓后角内5型代谢型谷氨酸受体与C纤维的关系--免疫组织化学及电镜研究
目的揭示大鼠脊髓后角内5型代谢型谷氨酸受体(mGluR5)与一级传入C纤维的关系.方法在大鼠单侧足底注射福尔马林作为疼痛刺激,应用免疫组织化学技术光镜下观察疼痛对脊髓后角内mGluR5的影响;在大鼠蛛网膜下腔注射辣椒素,以毁损C纤维,用免疫电镜技术观察大鼠脊髓后角浅层内mGluR5阳性结构与C纤维间的超微结构关系.结果脊髓后角疼痛刺激侧Ⅰ～Ⅱ层内mGluR5免疫反应性较对照侧明显增强;在蛛网膜下腔注射辣椒素的大鼠,电镜下可见其后角浅层内大量变性的C纤维轴突终末与1至多个含mGluR5的树突形成突触联系.结论提示脊髓后角浅层内mGluR5主要作为突触后受体参与介导和调节C纤维内对伤害性信息的传入.
关键词： 第5型代谢型谷氨酸受体 C纤维 疼痛 辣椒素 大鼠 -
大鼠脊髓后角浅层初级传入C纤维内μ阿片受体的免疫组织化学定位光镜与电镜研究
目的在光镜及电镜下观察大鼠脊髓后角内μ阿片受体(MOR)与C纤维的关系,为进一步揭示阿片镇痛的突触机制提供形态学证据. 方法根据辣椒素对初级传入神经中C纤维的特异性神经毒性,在大鼠蛛网膜下腔注射辣椒素以毁损C纤维,用免疫组织化学ABC法比较脊髓后角内MOR免疫反应性的变化;根据西非单叶豆同工凝集素I-B4(griffonia simplicifolia isolectin I-B4,I-B4)与初级传入C纤维选择性结合的特性,应用双标(免疫)组织化学电镜技术(ABC-纳金法)分别标记脊髓后角内I-B4结合位点和MOR. 结果大鼠蛛网膜下腔注射辣椒素3～7d后,其脊髓后角Ⅰ～Ⅱ层内的MOR免疫反应性较对照动物明显减弱;电镜下在大鼠脊髓后角浅层内观察到,MOR不仅定位于树突内,也分布在含I-B4结合位点的C纤维终末内.无论在树突内还是在轴突终末内,MOR主要分布在非突触部位,仅少量MOR与突触前膜和/或突触后膜有关. 结论脊髓后角中部分MOR来源于辣椒素敏感的C纤维,外源性吗啡或内源性吗啡样物质如内吗啡肽等MOR激动剂在脊髓后角内既可通过突触后(树突内)的MOR发挥作用,也可通过突触前(轴突终末内)的MOR对C纤维产生突触前抑制效应,而且在此过程中,MOR激动剂在非突触部位的作用可能是主要的.
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第一疼痛和第二疼痛的神经影像学研究
疼痛分为第一疼痛和第二疼痛.第一疼痛表现为短暂、尖锐并且有良好的定位感;而第二疼痛表现为灼痛、持续时间长并且无明显的定位感.两种疼痛信号分别通过快速传导的有髓Aδ纤维和慢速传导的无髓C纤维传导.根据激光刺激分别选择性刺激这两种纤维,利用脑电图、功能磁共振等神经影像学手段,探索人体大脑疼痛认知的研究结果显示:丘脑、第二躯体感觉中枢、脑岛中部、扣带回与第一和第二疼痛都相关.而脑岛前部和脑区BA32/8/6只与第二疼痛相关.这种功能解剖上的差异,不仅与这两种疼痛均受注意力的影响相关,而且解释了重复经颅磁刺激治疗下表现出相反的镇痛作用.以上研究将为临床上疼痛治疗提供基础的科学依据.
关键词： 疼痛 Aδ纤维 C纤维 功能磁共振(fNRI) -
直接充填树脂引起牙髓神经痛觉反应的电生理学研究
目的研究树脂直接充填深窝洞引起牙髓神经的即刻疼痛反应.方法在20只猫下尖牙上进行深窝洞的树脂直接充填,测量猫下齿槽神经痛觉传入神经C纤维在树脂充填过程中的诱发放电变化.结果在酸蚀、涂布粘接剂、光固化粘接剂和光固化充填树脂过程中观察到,C纤维产生明显的放电变化,与刺激前静息状态相比,放电频率由0.80±0.35Hz分别增加到30.52±13.43、34.83±16.15、54.50±20.01和36.69±15.04Hz,经统计学分析,均有显著性差异(P<0.05).结论确定了树脂充填过程中在酸蚀、涂布粘接剂、光固化粘接剂和光固化充填树脂的各环节能刺激牙髓神经产生疼痛反应,提示临床在树脂直接充填深窝洞时,应在术中采取措施减少疼痛.
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咳嗽机制研究进展
咳嗽是机体重要的防御性反射,但反复剧烈的咳嗽会影响休息、生活,甚至引起气胸、支气管破裂、纵隔气肿等并发症.咳嗽机制的探究有助于咳嗽管理.目前咳嗽机制尚未完全明确.因此,对咳嗽机制的研究进展进行综述很有必要.
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奥曲肽对谷氨酸钠诱发的Aδ和C纤维放电活性的抑制效应
目的:探讨生长抑素激动剂奥曲肽是否通过抑制兴奋性神经递质谷氨酸的作用而产生抗伤害感受作用.方法:在DA大鼠脊神经背侧皮支分离细束,随机分为对照组、谷氨酸钠组、奥曲肽组和环生长抑素组.观察大鼠感受野注射谷氨酸钠、奥曲肽或环生长抑素预处理后Aδ和C纤维放电率.结果:与对照组比较,谷氨酸钠组大鼠Aδ及C纤维放电率明显升高(P＜0.05);与谷氨酸钠组比较,奥曲肽组大鼠注射过程中以及注射后5 min内Aδ和C纤维放电率明显降低(P＜0.05);与谷氨酸钠组比较,环生长抑素组大鼠注射过程中以及注射后5 min内平均放电率差异无统计学意义(P＞0.05).结论:外周生长抑素受体激动剂奥曲肽通过抑制谷氨酸钠诱导的外周Aδ和C纤维放电活性而抑制伤害感受器.
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大鼠脊髓后角内初级传入C纤维中δ阿片受体的免疫电镜定位
目的:观察大鼠脊髓后角浅层内δ阿片受体是否存在于初级传人C纤维内,为脑啡肽在痛觉初级传人调制中的突触前抑制机制提供更为可靠的形态学依据.材料与方法:应用双标(免疫)组织化学电镜技术标记大鼠脊髓后角浅层(Ⅰ～Ⅲ层)凝集素Ⅰ-B4结合位点和δ阿片受体.结果:大量轴突及轴突终末呈δ阿片受体阳性免疫反应,特别是在双标切片上,观察到约40%的凝集素Ⅰ-B4结合位点阳性纤维及其终末内也含有δ阿片受体.结论:脊髓后角浅层内的δ阿片受体部分存在于传递伤害性信息的初级传人C纤维中,以介导阿片物质脑啡肽对初级传入C纤维的突触前抑制作用.
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CaMKⅡ抑制剂阻抑脊髓背角C纤维诱发电位LTP的诱导和早期维持
目的:探讨钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(calmodulin-dependent protein kinase Ⅱ,CaMKⅡ)的高特异性抑制剂(autocamtide-2-related inhibitory peptide,AIP)在脊髓背角C纤维诱发电位长时程增强(long-term potentiation,LTP)的诱导和维持中的作用.方法:用单方波(10～20 V,0.5 ms,1 min/次)刺激左侧坐骨神经,细胞外记录脊髓背角诱发电位.强直刺激(40 V,0.5 ms,100 Hz,持续1 s,以10 s间隔重复4次,)坐骨神经诱导背角C纤维诱发电位LTP.在LTP诱导前后,在暴露的脊髓表面局部给予AIP,观察其对LTP的影响.结果:(1)200 μmol/L的AIP不影响脊髓背角C纤维诱发电位的幅度(n=4),但在强直刺激前30 min给予同样浓度的AIP可完全阻断脊髓背角LTP的诱导(n=5).(2)200 μmol/L的AIP呈时间依赖性翻转脊髓背角LTP.在LTP诱导后30 min给予AIP,LTP逐渐降低,于3 h降至对照水平(n=6);在LTP诱导后1 h脊髓局部给予AIP,10例动物中有7例LTP被抑制;但同样浓度的AIP,在LTP诱导后3 h,不能翻转业已建立的LTP(n=6),且增加AIP的浓度至500μmol/L也不能抑制脊髓背角LTP.结论:CaMKⅡ参与脊髓背角C纤维诱发电位LTP的诱导和早期维持,但AIP对晚期LTP无抑制作用.
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电刺激大鼠腓肠神经引起Aδ、 C类传入神经纤维的背根反射
在距脊髓约15 mm处切断大鼠L5背根, 将中枢端分成4～5条细束, 电刺激腓肠神经在背根细束上记录背根反射(dorsal root reflex, DRR).共记录到DRR 51例, 根据引起DRR所兴奋的腓肠神经纤维类别和DRR在背根逆向传出的纤维类别将DRR分为5类: Aαβ-Aαβ * DRR、 Aβδ-Aδ * DRR、 Aβδ-C * DRR、 Aαβδδ-C * DRR和C-C * DRR.结果证明, 电刺激外周神经激活各类纤维不但能引起A类(包括Aδ)纤维的DRR, 而且也能引起C类纤维的DRR.记录的Aδ * DRR和C * DRR为细纤维传入终末产生突触前抑制提供了客观指标, 为DRR逆向传出冲动到达外周组织, 释放神经肽类递质, 调节外周效应器的功能提供了证据.
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机械性刺激对大鼠牙髓中P物质神经纤维表达的影响
目的:观察大鼠牙齿硬组织在受到不同程度机械损伤刺激时,牙髓中P物质神经纤维的表达,探讨机械性损伤刺激与神经肽P物质的关系.方法:采用间接免疫荧光法观察大鼠牙齿硬组织损伤时牙髓P物质神经纤维的表达情况.结果:随着机械性损伤程度加深,牙髓中P物质神经纤维末梢膨大、数量发生变化(P<0.05).结论:牙齿在受到不同程度机械性损伤刺激时,牙髓内P物质神经纤维表达发生变化.
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大鼠脊髓背角内第5型代谢型谷氨酸受体免疫组织化学特征
应用免疫组织化学方法在光镜下观察到，大鼠脊髓内第5型代谢型谷氨酸受体(mGluR5)主要分布在背角Ⅰ～Ⅲ层内；行单侧背根（L1～L6）切断术后，未见术侧mGluR5免疫反应性明显变化；脊神经节内仅见极少数神经元呈mGluR5免疫反应弱阳性。由此提示，脊髓背角内mGluR5的主要来源为非一级传入神经元。免疫电镜研究显示，在脊髓背角浅层内，mGluR5主要定位在部分神经元胞体和大量树突内，并常见部分含mGluR5的树突与具有一级传入C纤维终末形态特征的轴突终末构成突触小球。mGluR5在脊髓背角浅层内的超微定位特征表明，脊髓背角内的mGluR5可能主要作为突触后受体介导或调节谷氨酸传递一级感觉(包括痛觉)的功能。
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TTX对糖尿病大鼠机械刺激诱发C纤维高频放电的抑制作用
目的:探讨糖尿病大鼠机械刺激诱发C纤维高频放电的机制.方法:24只SD大鼠随机分为对照组和模型组,模型组腹腔注射70 mg/kg链脲菌素制作糖尿病模型,对照组腹腔注射相同剂量的生理盐水.造模前48 h、造模后48 h和4周分别取尾静脉血测血糖浓度;造模前3 d,造模后3、7、14、21、28 d通过刺激后爪,采用vonFrey法测定大鼠50%机械缩爪阈值(PWT).取造模后4周的大鼠,分离尾神经,测定传导速度以确定纤维类型,并给予60s的阈上(100 g)机械刺激,记录单根C纤维的放电.在糖尿病大鼠的尾巴上暴露尾神经,给予100nmol/L的TTX 10 min后施加60 s阈上(100 g)机械刺激,观察并记录其放电.结果:造模后48 h模型组(n=12)随机血糖浓度高于16.7 mmol/L的比率为91.7%,与对照组(n=12)比较,模型组在48 h、4周时血糖明显增高;造模后3周模型组PWT明显低于对照组(P<0.05);糖尿病组大鼠c纤维对60 s阈上(100 g)机械刺激诱发的放电数明显高于对照组;加100 nmol/L 低浓度的TTX后,糖尿病大鼠中C纤维对机械刺激的放电数明显减少(P
