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PI3K／AKT及MEK／ERK信号通路在肿瘤血管内皮细胞迁移中的作用
目的：研究磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）／丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（AKT）及丝裂原细胞外信号调节激酶（MEK）／细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路在肿瘤血管内皮细胞迁移中的作用及机制。方法用不同浓度的PI3K／AKT信号通路抑制剂LY294002（2．50、7．50、15．00μmol／L）；MEK／ERK信号通路抑制剂PD98059（2．50、7．50、15．00μmol／L）分别处理肿瘤血管内皮细胞，以DMEM‐F12培养基，加入0．10％二甲基亚砜（DMSO）的培养基分别作为对照，通过细胞划痕试验，定向迁移试验和Transwell试验来检测不同的信号通路抑制剂对肿瘤血管内皮细胞的水平、垂直和定向迁移能力的影响。结果0．1％DMSO对内皮细胞的迁移无明显影响，其作用后内皮细胞的迁移能力与DMEM‐F12单独作用无明显区别，说明小剂量DMSO作为LY294002、PD98059的溶剂不影响肿瘤血管内皮细胞的迁移功能；应用信号通路抑制剂LY294002、PD98059处理后，内皮细胞迁移能力受抑制，且随着抑制剂浓度增高而增大；LY294002与PD98059组比较，前者迁移距离更小，细胞迁移数较后者少，二者比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论抑制PI3K／AKT和MEK／ERK信号通路均能抑制肿瘤血管内皮细胞的水平、垂直和定向迁移，且与抑制剂浓度呈正相关；PI3K／AKT信号通路对内皮细胞迁移的影响比MEK／ERK信号通路明显。
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PI3K/Akt/mTOR信号通路在甲状腺癌中的研究进展
甲状腺癌是常见的内分泌系统恶性肿瘤,特别是严重危害了女性健康.近年来,我国甲状腺癌的发病率呈明显上升趋势[1],以沿海城市为甚,超过了其他恶性肿瘤的增长速度.因为癌症带给社会、家庭和个人巨大的负担,寻找甲状腺癌诊疗的新方法变得尤为重要[1].近年来,磷酸酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路与恶性肿瘤的相关性研究成为热点.PI3K/Akt/mTOR信号通路不仅在正常细胞的生长增殖中起着极其重要的作用,而且也与癌细胞的生长关系密切,是细胞生长、分化的中心调控者.其参与了基因转录、蛋白质翻译、核糖体合成等生物过程,在细胞生长和凋亡中发挥着极为重要的作用.因此,研究PI3K/Akt/mTOR信号通路与甲状腺癌的相关性能为阐述甲状腺癌的发病原因及诊断提供一个全新的视角,探讨其抑制剂的应用能为甲状腺癌的靶向治疗拓展新的道路.现将目前PI3K/Akt/mTOR信号通路与甲状腺癌的相关研究进展综述如下.
关键词： 甲状腺肿瘤 1-磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶类 信号传导 综述 -
PI3K/Akt信号通路与阿尔茨海默病关系的研究进展
神经系统活动的基础是神经元以及它们之间的联系。在生长发育过程中，如果这些结构出现变化就会导致相应的疾病发生，如轻度认知障碍（mild cognitive impairment，MIC）、阿尔茨海默病（Alzheimer′s disease，AD）、帕金森病（Parkinson disease，PD）等老化疾病。导致这些疾病发生的机制很多，包括基因水平改变、细胞内外部环境变化等。目前认为磷脂酰肌醇-3-激酶/丝/苏氨酸激酶（phosphatidylinositol-3-kinases/serine threonine kinase，PI3K/Akt）信号通路与细胞生存、细胞代谢以及细胞凋亡等机制密切相关。因此本文拟对PI3K/Akt信号通路对老年痴呆疾病影响的生物学机制进行综述。
关键词： 阿尔茨海默病 1-磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B 综述 -
卵巢上皮性肿瘤组织中PI3K和p-AKT蛋白的表达
目的:探讨3羧基磷脂酰肌醇激酶(PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)在上皮性卵巢肿瘤组织中的表达、相互关系及其意义.方法:应用免疫组化方法,检测20例正常卵巢、20例卵巢良性上皮肿瘤、60例卵巢癌组织中PI3K和p-AKT蛋白的表达.结果:PI3K在卵巢癌组织中阳性表达率为58.3%,高于正常卵巢和良性上皮肿瘤组织的5%, 20%(P＜0.01).p-AKT在卵巢癌组织中阳性表达率为53.3%,高于正常卵巢和良性上皮肿瘤组织的10%, 20%(P＜0.01).PI3K和p-AKT蛋白表达与卵巢癌临床分期、病理分级、有无淋巴结转移和远处转移有关(P均＜0.05),而与年龄、病理类型、有无腹水无关(P均＞0.05).卵巢癌组织中PI3K和p-AKT蛋白间的表达呈正相关(rs=0.501, P＜0.001).结论:AKT是PI3K的一个重要靶基因,PI3K/AKT信号传导通路异常活化与卵巢癌的发生、发展有关.
关键词： 卵巢肿瘤 1-磷脂酰肌醇3-激酶 AKT -
胰岛素对烫伤血清诱导骨骼肌成肌细胞凋亡的调控作用
目的 探讨胰岛素对烫伤大鼠血清诱导大鼠骨骼肌成肌细胞株L6凋亡的调控作用及机制.方法 体外培养L6细胞,按照随机数字表法分为对照组、烫伤血清组、胰岛素组和烫伤血清+胰岛素组.在上述4组细胞培养液中分别添加体积分数20％正常大鼠血清、体积分数20％烫伤大鼠血清、体积分数20％正常大鼠血清+100 nmol/L胰岛素、体积分数20％烫伤大鼠血清+100 nmol/L胰岛素,孵育48 h.行Hoechst 33258染色,于倒置荧光显微镜下观察细胞凋亡形态并计数凋亡细胞；行膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双标记染色,用流式细胞仪检测细胞凋亡率；蛋白质印迹法检测细胞磷酸化(p一)蛋白激酶B(Akt)、p-磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、Bax、Bcl-2、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3( caspase-3)的蛋白表达量.对实验数据行组间或配对t检验.结果 (1)倒置荧光显微镜下可见,烫伤血清组凋亡细胞为每视野(59.6±3 9)个,显著多于对照组、胰岛素组、烫伤血清+胰岛素组[每视野(4 9±2.6)、(5 5±2 1)、(19.7±2 3)个,t值分别为28.53、29.86、21.53,P值均小于0.01].(2)流式细胞仪检测结果显示,烫伤血清组细胞凋亡率为(18.5±1.8)％,明显高于对照组、胰岛素组及烫伤血清+胰岛素组[(1.1±0 6)％、(1 5±0 3)％、(7.8±0.6)％,t值分别为22.41、22 83、13 92,P值均小于0 01].(3)蛋白质印迹检测显示,烫伤血清组Bax蛋白表达量(1.12±0.63)及活化caspase-3蛋白表达量(2.15±0.51)明显高于对照组(0.16±0 03、0.21±0.03,t值分别为3 80、10 69,P值均小于0 01),p-Akt蛋白表达量(0.20±0.03)明显低于对照组(0 42±0 07,t=-8.46,P＜0.01)；Bcl-2及p-PI3K蛋白表达量(0.19±0 03、0.17±0.03)与对照组(0.26±0 09、0 28±0.07)接近(t值分别为-2.73、-1.14,P值均大于0 05).与烫伤血清组比较,烫伤血清+胰岛素组Bax蛋白表达量(0.40±0.14)和活化caspase-3蛋白表达量(0.83±0.18)明显降低(t=-3.23,P ＜0.05;t =6.66,P ＜0.01),Bcl-2、p-Akt及p-PI3K蛋白表达量均升高(0.39±0.10、0 78±0 03、0.47±0.12,t值分别为4.07、18.71、5 05,P＜0.05或P＜0.01).结论 烫伤大鼠血清可显著促进骨骼肌成肌细胞凋亡,胰岛素能通过PI3K/Akt信号途径抑制细胞凋亡.
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罗格列酮通过与IRS-2相关的磷脂酰肌醇3激酶途径逆转慢性高游离脂肪酸引起的胰岛素分泌
目的:研究罗格列酮逆转由慢性高浓度游离脂肪酸引起的胰岛素分泌的效果并探讨介导其作用的可能信号转导机制.方法:分离纯化的SD大鼠胰岛细胞用游离脂肪酸2 mmol/L或/和加用罗格列酮(0.05-10 μmol/L)培养.胰岛素释放功能采用放免法测定,胰岛素受体底物-2(IRS-2)蛋白的表达水平以及IRS-2与磷脂酰肌醇3激酶(PI 3K)的p85亚单位的相关作用通过免疫沉淀和蛋白质印迹分析法检测.结果:与对照组比较,对胰岛β细胞高浓度游离脂肪酸的慢性温育显著增加了基础胰岛素分泌而显著降低了葡萄糖刺激的胰岛素分泌(P＜0.01),IRS-2蛋白的表达水平降低了65%(P＜0.01),IRS-2与p85的相关作用降低了73%(P＜0.01).当加入罗格列酮继续培养后,基础和葡萄糖刺激的胰岛素分泌均恢复到接近对照水平(P＜0.01,P＜0.05),IRS-2蛋白的表达水平增加了2.6倍(P＜0.01),IRS-2与p85的相关作用增加了2.7倍(P＜0.01).PI 3K抑制物wortmannin 100 nmol/L抑制了罗格列酮逆转胰岛素分泌的作用.结论:罗格列酮逆转高浓度游离脂肪酸引起的胰岛素分泌改变,可能是通过与IRS-2相关的磷脂酰肌醇3激酶途径所介导.
关键词： 罗格列酮 脂肪酸 胰岛素 信号转导 1-磷脂酰肌醇3-激酶
