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电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质Slit-Robo三磷酸鸟苷酶激活蛋白-1和细胞分裂周期蛋白42表达的影响
目的:观察电针对大脑中动脉闭塞(MCAO)模型大鼠皮质Slit-Robo三磷酸鸟苷酶激活蛋白-1(Slit-Robo GTPase-activating protein-1,srGAP 1)和细胞分裂周期蛋白42 (cell division-cycle 42,Cdc 42)表达的影响,探讨srGAP 1和Cdc 42在电针治疗MCAO后神经恢复中的作用.方法:雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、非经穴组和电针组,每组12只.利用改进的Longa法复制MCAO模型.电针组取“曲池”“足三里”穴,非经穴组取手足阳明经与少阳经之间非经穴处,每日1次,每次30 min,共14 d.分别在术后1、3、7、14 d时间点对各组大鼠进行神经功能评分(mNSS),并利用免疫荧光法检测缺血侧大脑皮质中sr-GAP 1和Cdc 42的荧光强度及分布,用免疫印迹(Western blot)法检测大鼠梗死区周围大脑皮质中srGAP1和Cdc 42蛋白表达.结果:神经功能评分显示,在术后7、14 d时电针组较模型组、非经穴组同时间段的mNSS评分显著降低(P＜0.01).免疫荧光检测结果显示,srGAP 1和Cdc 42主要在细胞质表达;模型组srGAP 1高于正常组(P＜0.01),而电针组显著低于模型组和非经穴组(P＜0.01);模型组Cdc 42显著低于正常组(P＜0.01),而电针组明显高于模型组和非经穴组(P＜0.01).Western blot检测结果显示,模型组srGAP 1蛋白表达量较正常组明显升高(P＜0.01),电针组srGAP 1蛋白表达显著低于模型组及非经穴组(P＜0.01);模型组Cdc 42蛋白表达量与正常组的差异无统计学意义(P＞0.05),而电针组Cdc 42蛋白表达显著高于模型组和非经穴组(P＜0.01).结论:局灶性脑缺血再灌注后大鼠脑损区周围皮质srGAP 1明显增高,而Cdc 42明显减少,这可能与srGAP 1使Cdc 42失活有关;电针治疗后srGAP 1显著下调,而Cdc42上调,可能是电针促进脑梗死后神经功能恢复的机制之一.
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Cdc42基因在表皮生长因子促进HepG22细胞丝状伪足形成中的作用
目的:探讨表皮生长因子(EGF)对HepG2细胞丝状伪足形成和细胞体外侵袭能力的影响以及细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)在其中的作用.方法:将Cdc42 siRNA转染HepG2细胞株,RT-PCR和Western blot检测EGF组、EGF+siRNA干扰组、siRNA干扰组及空白对照组细胞Cdc42 mRNA转录以及蛋白的表达水平,微丝绿色荧光探针(actin-tracker green)染色检测HepG2细胞丝状伪足形成,侵袭小室检测细胞体外侵袭能力.结果:经EGF处理后HepG2细胞可见明显丝状伪足形成,EGF组细胞Cdc42 mRNA及总蛋白(Total-Cdc42)表达量无显著变化,但活性Cdc42(Active-Cdc42)显著增高(0.713±0.021vs0.423±0.015,P<0.05),siRNA干扰细Cdc42表达及活性受到明显抑制(0.118±0.017 vs 1.128±0.024;0.351±0.021 vs 0.936±0.024,均P<0.05),并抑制EGF诱导的细胞丝状伪足形成,EGF组细胞体外侵袭能力显著高于其余各组(98.43+3.11vs61,09±3.58,50.53±2.34,62.73±2.64,均P<0.05).结论:EGF通过激活Cdc42诱导HepG2细胞丝状伪足形成并增强其体外侵袭能力.
关键词： 细胞分裂周期蛋白42 表皮生长因子 肝癌 RNA干扰 -
细胞分裂周期蛋白42高表达在雌激素诱导的乳腺癌细胞耐药性增强过程中的作用
目的 观察细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)在雌激素作用下的变化,探讨细胞内物质运输的改变在雌激素引发的乳腺癌细胞耐药中的意义.方法 分别以100 ng/ml 17β雌二醇(E2)处理MCF-7细胞,以Cdc42的小干扰RNA(siRNA) Stealth Select RNAiTM siRNA转染MCF-7细胞.采用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞的药物敏感性,流式细胞术检测细胞内阿霉素(ADM)的蓄积量,实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞的Cdc42 mRNA表达,Western blot法检测细胞活化的Cdc42蛋白及总Cdc42蛋白表达量.结果 E2处理后,ADM对MCF-7细胞的半数抑制浓度(IC50)由(0.098±0.011) μg/ml增高到(0.134±0.130)μg/ml(P＜0.05),细胞内ADM的相对含量则由7.253±0.310下降为3.233±0.313(P＜0.05),而Cdc42 mRNA、活化Cdc42蛋白及总Cdc42蛋白的表达量均显著增加(P＜0.05).Cdc42 siRNA转染后,ADM对MCF-7细胞的IC50下降到(0.057±0.017)μg/ml(P＜0.05),细胞内ADM的相对含量增高为11.217±0.521(P＜0.05),而Cdc42 mRNA、活化Cdc42蛋白及总Cdc42蛋白则均有显著下降(P＜0.05).结论 雌激素可以诱导乳腺癌细胞耐药性增强,其机制可能是通过上调Cdc42基因的转录、表达和活化,加速胞内物质运输速度,使得化疗药物无法在细胞内聚集.
关键词： 细胞分裂周期蛋白42 乳腺肿瘤 MCF-7细胞 雌激素 多药耐药 -
Cdc42在缺血再灌注损伤中对内皮细胞凋亡的影响及其机制
目的 研究细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42,Cdc42)在缺血/再灌注(I/R)中对内皮细胞凋亡的影响及其机制.方法 培养人脐静脉内皮细胞,建立I/R模型.实验分组:①control组;②I/R组;③Oli组;④AS组;⑤MS组;⑥SP600125+ AS组;⑦SP600125组.用TUNEL测定细胞凋亡率,western blot测定Cdc42、JNK、p-JNK、Bax、Bcl-2的蛋白表达量.结果 I/R组与control组相比较,Cdc42的蛋白表达、内皮细胞凋亡率和JNK的磷酸化程度增高,Bcl-2/Bax降低;AS组Cdc42的蛋白表达,内皮细胞凋亡率和JNK磷酸化程度低于I/R组、脂质体组和MS组,且Bcl-2/Bax的比值在这4组中是高的.结论 Cdc42在I/R中可以促进内皮细胞的凋亡,而AS可以降低I/R中内皮细胞凋亡率,AS通过JNK、Bcl-2和Bax信号通路抑制Cdc42在I/R的促凋亡作用.
关键词： 细胞分裂周期蛋白42 内皮细胞 缺血再灌注 凋亡 -
胶质瘤miR-29c表达异常减少及其对肿瘤细胞增殖的影响
目的：探讨microRNA-29c（miR-29c）在胶质瘤中的表达及其对细胞分裂周期蛋白42（CDC42）的调控作用和对细胞增殖的影响。方法：用锁定寡核苷酸原位杂交法和免疫组织化学法检测60例不同级别胶质瘤及10例非肿瘤对照脑组织中miR-29c和CDC42的表达水平，实时荧光定量RT-PCR、Western blot及MTS法分别检测U87MG细胞中miR-29c瞬时表达、CDC42 mRNA和蛋白表达及其对胶质瘤细胞增殖的影响。结果：各级别胶质瘤的miR-29c表达水平均明显低于非肿瘤对照脑组织，且随肿瘤级别升高而显著降低，各组间的差异均有统计学意义（P<0.001）。而CDC42表达水平则呈相反趋势，其表达水平随胶质瘤良恶性级别增加相应升高，除Ⅰ～Ⅱ级组与非肿瘤对照组之间外，其余各组间的差异均有统计学意义（P<0.001）。与对照组相比， miR-29c转染组的CDC42 mRNA（P<0.001）和蛋白表达水平（P<0.01）均明显降低。miR-29c转染组细胞的增殖能力明显低于U87MG空白对照组和Scr转染组（P<0.05）。结论：miR-29c是胶质瘤的抑瘤miRNA，其表达水平可作为评价胶质瘤良恶性级别的重要参考指标。miR-29c在胶质瘤中表达减少解除了其对靶基因CDC42转录后水平的抑制作用，并导致肿瘤细胞无限增殖。表明miR-29c表达异常减少可能是引起胶质瘤发生、发展的关键事件。
关键词： 胶质瘤 微小RNA-29c 细胞分裂周期蛋白42 细胞增殖 -
Cdc42在消化道疾病中的研究进展
细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42,CdcA2)在消化道的正常结构和功能维持等许多生物学过程中发挥重要作用.目前研究结果表明Cdc42参与消化道的发育及先天性肠道疾病、炎症性肠道疾病、感染性肠道疾病甚至消化道肿瘤等多种疾病的发病,但是目前关于其引起发病的机制尚不清楚,有待进一步明确,为消化道各种疾病的诊疗提供新的思路.
关键词： 细胞分裂周期蛋白42 肠道发育 消化道疾病 -
细胞分裂周期蛋白42在肿瘤发生发展和治疗中作用的新进展
细胞分裂周期蛋白42 (Cdc42)是一类广泛表达的小三磷酸鸟苷(GTP)酶,因其具有GTP酶活性,因而又被称为Rho GTP酶.Cdc42可以调节细胞骨架的形态学改变,并调节诸如细胞生长和增殖、细胞活力、细胞极性等生理过程中涉及的膜运输功能.Cdc42在多种恶性肿瘤中呈现高表达,并和肿瘤的发生、侵袭和转移密切相关,提示Cdc42可能为肿瘤治疗的潜在靶点.该文拟从Cdc42的形态结构、功能、信号通路上下游效应分子以及在人类肿瘤侵袭和转移中的作用等方面进行综述.
关键词： Rho GTP酶 细胞分裂周期蛋白42 信号通路 微小RNA 肿瘤 -
异氟醚和七氟醚对人肺腺癌A549细胞迁移及细胞分裂周期蛋白42、成束蛋白表达的影响
目的 观察异氟醚和七氟醚对人肺腺癌A549细胞迁移及细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42,Cdc42)和成束蛋白( Fascin)表达的影响.方法 人肺腺癌A549细胞接种于培养板,培养24 h后,按随机数字表法分为3组(每组6例):对照组(C组)、2.3％异氟醚组(Iso组)、3.4％七氟醚组(Sev组).Iso组和Sev组的A549细胞分别暴露于2.3％异氟醚或3.4％七氟醚2、4、6h.C组不接受异氟醚或七氟醚处理.3组处理结束后,继续培养24 h.于24 h时,采用Transwell法检测各组A549细胞处理2、4、6h后的迁移细胞数目,蛋白印迹法检测各组A549细胞处理4h的Cdc42和Fascin表达水平.结果 与C组和Iso组比较,Sev组的迁移细胞数目降低[(102±21)、(97±19)、(105±30)、(104±27)、(92±20)、(90±18) vs(81±16)、(65±11)、(42±9)](P＜0.05)；与C组和Iso组比较,Sev组的Cdc42表达下调[(75±l6)％,(79±13)％vs(31±7)％](P＜0.05)；与C组和Iso组比较,Sev组的Fascin表达下调[(71±13)％、(77±18)％vs(40±8)％](P＜0.05).结论 七氟醚能抑制人肺腺癌A549细胞的迁移,该效应可能与抑制Cdc42和Fascin表达有关.异氟醚无抑制A549细胞迁移的效应.
关键词： 吸入麻醉药 肺癌 A549细胞 细胞分裂周期蛋白42 成束蛋白 -
miR-101对结直肠癌细胞放疗敏感性的影响及机制探讨
目的 观察miR-101对结直肠癌细胞放疗敏感性的影响,并探讨其分子机制.方法 取结直肠癌细胞株SW620、SW480,稳定过表达miR-101细胞株SW620(miR101-SW620)及其阴性对照GV209-SW620,瞬时沉默miR-101表达细胞株SW480(SW480-miR101)及其阴性对照SW480-NC,采用Western blotting法检测细胞中miR-101靶基因Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)及其下游关键蛋白细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)、人Ras同源基因家族成员A(RhoA).取SW620、GV209-SW620、miR101-SW620细胞,分别给予0、2、4、6、8 Gy射线处理24 h;Westernblotting法检测DNA损伤标志性蛋白γ-H2AX、细胞凋亡标志蛋白Caspase-3判断细胞放疗敏感性变化,同时检测细胞Rac1、Cdc42、RhoA蛋白.结果 与SW620、GV209-SW620细胞比较,miR101-SW620细胞Rac1、Cdc42、RhoA蛋白表达降低(P均＜ 0.05);与SW480、SW480-NC细胞比较,SW480-miR101细胞Rac1、Cdc42、RhoA蛋白表达均增高(P均＜ 0.05).随着照射剂量增加,结直肠癌细胞γ-H2AX、Caspase-3表达均增高,而Rac1、RhoA、Cdc42蛋白表达均降低(P均＜ 0.05);与同等照射剂量下SW620、GV209-SW620细胞比较,miR101-SW620细胞γ-H2AX、Caspase-3蛋白表达均增高,而Rac1、RhoA、Cdc42蛋白表达均降低(P均＜0.05).结论 miR-101可能通过调控Rac1/Cdc42/RhoA信号通路增强结直肠癌细胞对放疗的敏感性.
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二仙汤对乳腺癌细胞转移大鼠Cdc42的影响
目的:观察二仙汤对乳腺癌细胞转移大鼠细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle42,Cdc42)的表达影响,分析其抗乳腺癌转移的作用机制.方法:SD雌性大鼠60只,共分为3组,分别为二仙汤治疗组、5-氟尿嘧啶组、生理盐水组,每组大鼠20只.给药4d后处死大鼠采取药物血清.乳腺癌HCC1937细胞株培养后分3组,分别加入终体积分数为10％各组血清,处理细胞.统计并检测各组药物血清处理培养后的细胞数目,肿瘤细胞的侵袭能力以迁移细胞的相对数目来表达.另取处理后的各组细胞检测细胞内Cdc42蛋白的水平.结果:二仙汤组对肿瘤细胞的侵袭能力抑制作用明显,与生生理盐水组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).二仙汤组细胞内Cdc42水平明显降低,与5-氟尿嘧啶组及生理盐水组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:二仙汤有抑制乳腺癌细胞转移的作用,机制可能与抑制体外乳腺癌细胞Cdc42的表达有关.
关键词： 二仙汤 乳腺癌 细胞分裂周期蛋白42 大鼠 -
B7-H4和细胞分裂周期蛋白42在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义
目的 探讨B7-H4和细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与NSCLC临床生物学特征之间的关系.方法 采用免疫组织化学法检测92例NSCLC患者的癌组织和癌旁组织中B7-H4和Cdc42表达水平.结果B7-H4在NSCLC癌组织中表达率明显高于癌旁组织(44.57％比8.70％,P＜0.01),B7-H4表达水平与NSCLC的TNM分期、淋巴结转移明显相关(P＜0.05);Cdc42在NSCLC癌组织中表达率明显高于癌旁组织(56.52％比4.35％,P＜0.01),Cdc42表达水平与NSCLC的组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关(P＜0.05).结论B7-H4和Cdc42可能在NSCLC的发生发展过程中发挥作用.
关键词： B7-H4 细胞分裂周期蛋白42 非小细胞肺癌 免疫组织化学 -
细胞分裂周期蛋白42和基质金属蛋白酶-9在乳腺癌中的表达及其临床意义
目的 探讨细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组织化学法检测66例乳腺癌患者手术切除的癌组织和相应癌旁组织中Cdc42和MMP-9的表达水平.结果 Cdc42在乳腺癌组织中表达率为80.30％,在癌旁组织中表达率为25.76％,两者差异有统计学意义(P＜0.01),Cdc42表达水平与乳腺癌组织学分级、淋巴结转移明显相关(P＜0.05);MMP-9在乳腺癌组织中表达率为72.73％,在癌旁组织中表达率为12.12％,两者差异有统计学意义(P＜0.01),MMP-9表达水平与乳腺癌TNM分期、淋巴结转移明显相关(P＜0.05).结论 Cdc42及MMP-9过表达在乳腺癌的发生发展及浸润转移中具有一定作用.
关键词： 细胞分裂周期蛋白42 基质金属蛋白酶-9 乳腺癌 免疫组织化学法 -
Cdc42在人乳腺癌细胞MCF-7阿霉素敏感株和耐药株中的表达
目的 探讨细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)在乳腺癌细胞MCF-7阿霉素敏感株和耐药株MCF-7/Adr中表达的变化以及对细胞耐药性的影响.方法 将Cdc42 siRNA转染MCF-7/Adr细胞株后,用RT-PCR和Weastem Blot方法检测MCF-7组,MCF-7/Adr组,MCF-7/Adr siRNA干扰组细胞Cdc42的转录以及蛋白的表达水平;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定siRNA处理后阿霉素(ADM)对MCF-7/Adr细胞的杀伤作用;用荧光分光光度计测定细胞内ADM药物浓度.结果 MCF-7/Adr细胞中Cde42 mRNA及蛋白表达量显著高于MCF-7细胞(P<0.05);siRNA干扰后Cde42表达受到明显抑制(P<0.05),并显著提高细胞内ADM的浓度(P<0.05).结论 特异性siRNA能明显抑制Cde42 mR-NA及蛋白表达,并逆转细胞耐药性.
关键词： 乳腺肿瘤 细胞分裂周期蛋白42 多药耐药 小RNA干扰
