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辣椒碱对乳腺癌MCF-7细胞增殖及p21和FBI-1表达的影响
目的:观察辣椒碱对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响及可能的分子机制.方法:设立辣椒碱组以及空白组,采用细胞计数试剂盒-8法(CCK-8)检测辣椒碱(50,100,150,200,250,300 μmol· L-1)处理MCF-7细胞24,48,72 h后的细胞活性;克隆形成实验检测辣椒碱(100,150,200 μmol·L-1)处理MCF-7细胞18 h再更换为完全培养基继续培养14 d后的克隆形成能力;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测辣椒碱(100,150,200μmol·L-1)处理MCF-7细胞24 h后细胞中细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子p21(p21)和人类免疫缺陷病毒短转录诱导物连接因子-1(FBI-1) mRNA表达水平;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测辣椒碱(100,150,200 μmol·L-1)处理MCF-7细胞24 h后细胞中p21和FBI-1蛋白的表达水平.结果:与空白组比较,辣椒碱(50,100,150,200,250,300 μmol· L-1)在体外对MCF-7细胞活性具有明显的抑制作用(P ＜0.05,P＜0.01),并且这种抑制作用呈浓度和时间依赖效应;与空白组比较,辣椒碱(100,150,200 μmol·L-1)均能显著抑制MCF-7细胞的克隆形成能力(P＜0.01);与空白组比较,辣椒碱(100,150,200 μmol·L-1)能显著上调MCF-7细胞中p21 mRNA和蛋白的表达水平(P＜0.01),下调FBI-1 mRNA和蛋白的表达水平(P＜0.01).结论:辣椒碱干预在体外对乳腺癌MCF-7细胞增殖具有抑制作用,潜在机制可能与其上调细胞中p21 mRNA和蛋白的表达水平,下调细胞中FBI-1 mRNA和蛋白的表达水平有关.
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白藜芦醇苷对人类乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响及其机制
目的:研究白藜芦醇苷(polydatin)在体外对乳腺癌细胞MCF-7增殖的作用,进一步探索其潜在的机制.方法:设定空白组及白藜芦醇苷(0.2,0.4,1.2,2.0,2.8 mg·L-1)组,5-氟尿嘧啶组,采用噻唑蓝(MTT)比色法测定不同质量浓度白藜芦醇昔对MCF-7细胞的生长抑制率;应用细胞克隆集落形成实验验证白藜芦醇苷对MCF-7细胞增殖的抑制作用;通过实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测5-氟尿嘧啶(1.0μg·L-1)和白藜芦醇苷(0.2,0.4,1.2 mg·L-1)对DNA聚合酶δ催化亚基P125(P125),P125编码基因(POLD1),p53基因(p53),细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子p21 mRNA表达水平的影响;应用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测白藜芦醇苷(0.2,0.4,1.2 mg·L-1)对P125,p53,p21蛋白表达水平的影响.结果:与空白组比较,白藜芦醇苷(0.2,0.4,1.2,2.0,2.8 mg·L-1)在体外对MCF-7细胞具有明显的抑制作用(P ＜0.05,P＜0.01),并且这种抑制作用呈浓度依赖性.与空白组比较,白藜芦醇苷(0.2,0.4,1.2 mg·L-1)均能明显抑制细胞集落的形成(P ＜0.05,P＜0.01).与空白组比较,5-氟尿嘧啶组和白藜芦醇苷(0.4,1.2 mg·L-1)能够显著抑制POLD1 mRNA表达水平,同时显著抑制P125 mRNA和蛋白表达水平,明显升高p53,p21 mRNA和蛋白表达水平(P ＜0.05,P＜0.01).与5-氟尿嘧啶组比较,白藜芦醇苷(1.2 mg·L-1)对POLD1,P125,p53,p21 mRNA和蛋白表达水平影响均无显著差异.结论:白藜芦醇苷在体外能够显著抑制MCF-7细胞的增殖,其潜在机制可能与提高p53表达水平,抑制POLD1表达,促进p21表达有关.
