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菟丝子总黄酮对过氧化氢损伤的血管内皮细胞的保护作用
目的:探讨菟丝子总黄酮对H202损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用.方法:于37℃、5％ CO2、95％空气饱和湿度的培养箱内体外培养内皮细胞,将细胞分为4组,即正常对照组:加入DMEM培养液(pH 7.2 ～7.4)、菟丝子对照组(菟丝子0.5mg·L-1)、模型组(过氧化氢终浓度为200 mmol·L-)、菟丝子+过氧化氢组(菟丝子0.5mg· L-1,过氧化氢200 mmol·L-),研究菟丝子总黄酮对受损血管内皮细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)释放情况、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及对细胞形态学的影响.结果:菟丝子总黄酮(0.5 mg·L-1)能明显减轻H2O2对HUVECs所致的氧化损伤,可明显改善氧化损伤的HUVECs形态学变化,H2O2模型组(200 mmol·L-)与空白组比较,LDH释放和MDA含量显著升高(P＜0.01,P＜0.05),SOD释放水平和GSH-Px活力显著下降(P＜0.01),菟丝子(0.5mg·L-1)+ H2O2(200 mmol·L-1)组与H2O2模型组(200 mmol·L-1)比较,LDH释放和MDA含量显著下降(P＜0.01,P＜0.05),SOD释放水平和GSH-Px活力显著升高(P＜0.01).结论:菟丝子总黄酮对H202诱导的HUVECs的损伤具有保护作用.
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菟丝子总黄酮对排卵障碍大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴性激素水平的影响
目的:探讨丝子总黄酮对排卵障碍大鼠下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴性激素水平的影响.方法:将大鼠分为对照组(C)、模型组(M)、菟丝子黄酮低、高剂量组(CCLD,CCHD)以及阳性对照枸橼酸氯米芬组(PC),采用羟基脲以300 mg· kg-1ig连续进行10 d制作排卵障碍大鼠模型,用不同剂量菟丝子总黄酮(10,20 mg· kg-)及阳性对照,4.5 mg· kg-ig连续5d干预.放射免疫法观察并比较大鼠血清卵泡刺激素(FSH)、雌激素(E2)、促黄体生成素(LH)以及孕激素(P)水平的变化.结果:与C组相比,M组血清FSH,LH,E2及P水平显著降低(均P＜0.05),其中FSH由(8.18±1.37) U·L-1降低至(4.22±0.94) U·L-1；LH由(17.25±5.36) U·L-1降低至(7.81±1.39) U·L-1；E2由(48.59±8.11) μg·L-1降低至(23.18±7.62) μg·L-1;p由(16.02±4.83) μg·L-1降低至(5.94±1.02) μg·L-1(均P ＜0.05).与M组相比,CCLD,CCHD以及PC组血清FSH,LH,E2及P水平显著升高(均P＜0.05).其中PC组与CCHD组FSH,LH,E2及P水平较CCLD组升高更为明显(均P＜0.05).结论:菟丝子黄酮可显著改善排卵障碍大鼠HPO轴性激素水平,且以高剂量更为有效.
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骨碎补、淫羊藿、菟丝子总黄酮对成骨细胞体外培养影响的比较研究
目的骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮及菟丝子总黄酮对成骨细胞体外培养影响的比较研究.方法UMA-1 06-01成骨细胞株进行成骨细胞培养,观察ALP活性和3H-TdR掺入的情况.结果24 h培养液中骨碎补总黄酮ALP活性高于对照组,P＜0.05;细胞内骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮ALP活性显著增加,与对照组比较,P＜0.05或P＜0.001.48 h培养液中骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮、菟丝子总黄酮ALP活性高于对照组,P＜0.05或P＜0.001;细胞内骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮、菟丝子总黄酮ALP活性显著增加,与对照组比较,P＜0.001.骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮24 h3H计数显著高于对照组,P＜0.001.结论3种中药总黄酮对成骨细胞活性的促进作用,以骨碎补总黄酮为广泛,淫羊藿总黄酮次之,菟丝子总黄酮差.
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菟丝子总黄酮对大鼠排卵障碍的治疗作用及其机制研究
目的 探讨菟丝子黄酮对排卵障碍大鼠的治疗作用.方法 将50只SD大鼠平均随机分为对照组、模型组、低剂量菟丝子黄酮组、高剂量菟丝子黄酮组以及阳性对照组,每组10只.采用羟基脲灌胃法制作排卵障碍动物模型,模型制作成功后,高剂量菟丝子黄酮组给予2 g/L菟丝子黄酮进行干预,低剂量菟丝子黄酮组给予1 g/L菟丝子黄酮进行干预,阳性对照组给予4.5 mg/kg克罗米芬,模型组及对照组均给予相同剂量生理盐水进行干预.均连续干预4周.观察并比较各组大鼠一般状况、动情周期、卵巢及子宫指数,并对卵巢组织学进行观察.结果 菟丝子黄酮可显著改善排卵障碍大鼠的一般状况,恢复大鼠动情周期,改善子宫及卵巢指数,且以高剂量菟丝子黄酮更为显著(P＜0.05)；菟丝子黄酮对排卵障碍大鼠卵泡的生长发育具有促进作用,能够提高次级卵泡的数量.结论 菟丝子黄酮对排卵障碍具有显著的改善作用.
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菟丝子总黄酮对血管平滑肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响
目的：观察菟丝子总黄酮对血管平滑肌细胞凋亡的影响，并探讨其保护作用机制。方法菟丝子经溶剂提取，聚酰胺柱分离得黄酮提取物；大鼠胸主动脉平滑肌细胞传代培养，实验分四组，采用流式细胞仪检测细胞凋亡、Westen 印迹法测定细胞 Bcl－2和 Bax蛋白表达及 RT－PCR测定C－myc基因表达情况。结果菟丝子总黄酮高剂量组能够增加活细胞数量，降低死亡细胞数，特别是降低早期凋亡细胞数，与模型组比较有显著差异（P＜0．05）；菟丝子总黄酮高剂量组能够下降Bax蛋白表达量，与模型组比较有显著差异（P＜0．05），而菟丝子总黄酮低剂量组升高 Bcl－2蛋白表达量，与模型组比较有显著差异（ P＜0．05）；菟丝子总黄酮高剂量和低剂量组 C－myc mRNA 表达量显著升高，与模型组比较有显著性差异（ P＜0．05），无剂量依从效应。结论菟丝子总黄酮能抑制平滑肌细胞凋亡，其可能是通过能够下降Bax蛋白和升高 Bcl－2蛋白表达，改善抗凋亡和促凋亡的蛋白失衡，增加细胞周期C－myc的基因的表达来发挥对心血管起保护作用。
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菟丝子总黄酮对大鼠睾丸曲细精管无血清培养所致细胞凋亡的保护作用
目的 观察中药菟丝子总黄酮对大鼠睾丸细胞氧化损伤和凋亡的保护作用.方法 测定丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)、活性氧(ROS)等氧化损伤指标,原位末端标记(TdT-mediated dUDP-Xnick end labeling,TUNEL)法检测睾丸细胞凋亡.结果 不同剂量的菟丝子总黄酮可抑制无血清培养所诱导的大鼠睾丸细胞氧化损伤和凋亡,且其作用具有剂量依赖性,以500 mg·L-1明显.结论 菟丝子总黄酮是一种有效的抗氧化剂,具有抗氧化、抗凋亡的作用.
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菟丝子总黄酮防护离体培养小鼠睾丸组织细胞凋亡的研究
目的 研究菟丝子总黄酮对无血清培养睾丸细胞所致凋亡的保护作用及其机制.方法 应用流式细胞仪PI法检测亚二倍体细胞凋亡;酶标仪测定MDA(丙二醛)含量.结果 菟丝子总黄酮可抑制无血清培养诱导的睾丸细胞凋亡,降低丙二醛含量.其作用具有剂量依赖性,以500mg/L明显.结论 菟丝子总黄酮是具有抗凋亡、抗氧化的作用.
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基于PI3K/PTEN/VEGF的菟丝子总黄酮抗肝癌作用机制研究
目的:基于PI3K/PTEN/VEGF通路探讨菟丝子总黄酮(TF)体外抗肿瘤作用机制,考察合适的给药浓度,为菟丝子药材的临床合理应用提供参考.方法:以人肝癌细胞HepG2为实验对象,CCK-8法检测TF给药后的细胞活性,计算其IC 50值;Annexin V-FITC/PI双染法分析细胞凋亡坏死比例;实时荧光定量PCR(qPCR)法检测胞内磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、人类第十号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)、血管内皮细胞生长因子(VEGF) mRNA的相对表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮细胞生长因子受体2、3(VEGFR-2、VEGFR-3)表达变化趋势.结果:相对阴性对照组,给药组细胞抑制率和凋亡率均具有良好的量-效正相关;qPCR结果显示TF给药可以显著的上调PTENmRNA,下调PI3K、VEGF mRNA;ELISA结果显示HIF-1α、VEGFR-2、VEGFR-3蛋白的表达在给药后均有下降(P＜0.01).结论:菟丝子总黄酮有较好的体外抗肝癌药效,其作用可能与上调PTEN的表达对PI3K-Akt通路进行负调控诱导细胞发生凋亡、下调HIF-1α以及VEGF相关基因和受体蛋白的表达等作用机制共同发挥抗肿瘤作用.
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菟丝子总黄酮对早孕期人细胞滋养细胞增殖能力的影响及其信号机制
目的:探讨菟丝子总黄酮对早孕期人细胞滋养细胞增殖的影响及其信号转导机制.方法:应用硅化聚乙酞胺吡咯烷酮(Percoll)密度梯度离心法,分离纯化早孕期人细胞滋养细胞,经免疫细胞化学法鉴定其分子表达特征和纯度;采用MTT法评价早孕期人细胞滋养细胞活力;流式细胞术分析细胞滋养细胞PCNA的表达;用Western blotting法观察pERK1/2的水平.结果:菟丝子总黄酮呈时间和剂量依赖性增强早孕期人细胞滋养细胞活力,促进细胞滋养细胞ERK1/2的磷酸化.结论:菟丝子总黄酮可能通过活化MAPK/ERK1/2信号通路促进人细胞滋养细胞增殖.
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菟丝子总黄酮对大鼠流产模型血清P、PR、Th1/Th2细胞因子表达的影响
目的:探讨菟丝子总黄酮对大鼠流产模型蜕膜PR及Th1/Th2细胞因子表达的影响,同时观察血清P和PR的变化.方法:对溴隐亭致SD孕鼠流产模型,设菟丝子总黄酮高、低剂量治疗组、达芙通为阳性对照组,于孕12d处死各组大鼠,酶联免疫检测血清P和PRL的水平,免疫组化法检测蜕膜PR的表达,RT-PCR法检测蜕膜Th1/Th2 mRNA的表达.结果:模型组蜕膜IL4、IL-10 mRNA及PR蛋白表达明显低于正常妊娠组,TNF-α、IFN-γ mRNA表达明显高于正常妊娠组,差异有显著性(P<0.05),菟丝子总黄酮可上调流产大鼠蜕膜IL-4、IL-10、PR的表达,下调TNF-α、IFN-γ表达,同时可提高血清P的水平,其作用与孕激素达芙通相似.结论:菟丝子总黄酮可能通过调节母胎界面内分泌-免疫网络平衡而起到维持早孕的作用.
关键词： 自然流产 菟丝子总黄酮 Th1/Th2细胞因子 蜕膜孕激素 -
菟丝子总黄酮对大鼠流产模型妊娠结局及胎盘、蜕膜形态学的影响
目的:探讨菟丝子总黄酮对大鼠流产模型妊娠结局及其胎盘、蜕膜形态学的影响.方法:对溴隐亭致SD孕鼠流产模型,设菟丝子总黄酮高、低剂量治疗组和达芙通阳性对照组,于孕12d处死各组大鼠,观察各组流产率、胎仔总数及胎仔平均数,并用光镜观察各组胎盘、蜕膜形态学的变化.结果: ①模型组流产率显著升高,胎仔总数、平均胎仔数明显降低;菟丝子总黄酮高、低剂量组均可显著降低流产率,增加妊娠率,提高胎仔成活率及胚胎数量和质量,并呈现一定的量效关系,其作用与孕激素达芙通相似.②组织形态学:菟丝子总黄酮高、低剂量组与模型组比较,绒毛血窦面积明显增大,血管含量较丰富,管腔形态规则,同时还观察到血管合体细胞膜明显增多,着床部位蜕膜腺体较丰富.结论:菟丝子总黄酮可降低溴隐亭致SD孕鼠流产模型的流产率,并能逆转流产胎盘、蜕膜结构的病理改变,黄酮类有效部位可能是菟丝子补肾安胎的主要物质基础.
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菟丝子总黄酮对大鼠流产模型母-胎界面Fas/FasL、PCNA、HB-EGF表达的影响
目的:观察菟丝子总黄酮对大鼠流产模型母-胎界面Fas/FasL、PCNA、HB-EGF表达的影响.方法:对溴隐亭致SD孕鼠流产模型,以菟丝子总黄酮高、低剂量为治疗组,达芙通为阳性对照组,于孕12 d处死各组大鼠,应用免疫组织化学方法检测胎盘和蜕膜Fas/FasL、PCNA、HB-EGF的表达.结果:菟丝子总黄酮高、低剂量组、达芙通及正常妊娠组蜕膜和胎盘PCNA表达显著高于模型组,蜕膜和胎盘Fas/FasL表达显著低于模型组,胎盘HB-EGF表达显著高于模型组,差异均有显著性,菟丝子总黄酮高、低剂量组与孕激素达芙通组比较,差异无显著性,各组蜕膜皆无HB-EGF表达.结论:菟丝子总黄酮可能通过调节滋养细胞的增殖与凋亡,使其恢复到正常妊娠状态而起到保胎的作用.
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菟丝子总黄酮对氢化可的松致大鼠少弱精子症的治疗作用及其机制
目的 研究菟丝子总黄酮(TFSC)对氢化可的松致大鼠少弱精子症的治疗作用及其可能的作用机制.方法 将39只♂ Wisatr大鼠随机均分为空白对照组、模型组和TFSC组,每天ip给予模型组和TFSC组大鼠25 mg· kg-1氢化可的松,ip给予空白对照组同体积蒸馏水,连续给药10 d后,从3组中分别随机取出3只大鼠检测脏器指数、生化指标,并采集附睾精子检测数量及活动率.确定造成少弱精子症模型后,每天ig给予TFSC组大鼠100 mg·kg-1TFSC,均ig给予剩余大鼠同体积蒸馏水,治疗15 d后检测大鼠的脏器指数、计量附睾精子数量及活动率,用试剂盒检测血清中睾酮水平、酸性磷酸酯酶(ACP)、乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性及氧化应激相关指标丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)的变化,利用Reahime RT-PCR技术检测凋亡基因Fas和Fasl的表达情况.结果 TFSC能明显改善精子质量、促进睾酮分泌、提高睾丸内ACP、LDH、SDH的活性,降低MDA的含量、提高GSH和T-SOD的水平,并下调Fas和Fasl的基因表达.结论 TFSC能有效治疗少弱精子症,其机制与抑制氧化应激及下调凋亡基因Fas与Fasl的表达相关.
