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黄芪散有效部位群对胰岛素抵抗HepG2细胞SREBP-1c及其靶基因表达的影响
目的:观察黄芪散有效部位群(HQS)对胰岛素抵抗HepG2细胞固醇调控元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)及其靶基因表达的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:噻唑蓝(MTT)比色法检测HQS对细胞活性的影响,采用高糖高胰岛素诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗模型,造模同时予以不同浓度HQS进行干预,并以二甲双胍(MET)作为阳性药,另设空白组.采用荧光D-葡萄糖同系物2-脱氧-D-葡萄糖(2-NBDG)检测细胞糖摄取量,测定细胞内甘油三酯(TG),游离脂肪酸(FFA)含量,油红O染色法观察细胞脂质沉积情况,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞内SREBP-1c,乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1),脂肪酸合成酶(FAS),硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD1)基因的表达.结果:依据MTT实验结果,选择25,50,100 mg·L-1分别作为HQS低、中、高质量浓度值(HQS-L,HQS-M,HQS-H),处理时间为24 h.与空白组比较,模型组细胞糖摄取显著减少(P＜ 0.01),细胞内TG,FFA含量显著升高(P＜0.01),胞浆内可见大量红色的小泡性脂滴,SREBP-1c,ACC1,FAS,SCD1 mRNA的表达显著上调(P＜0.01).与模型组比较,不同质量浓度HQS均可显著升高细胞糖摄取量(P＜0.05,P＜0.01),HQS-H,HQS-M可显著降低细胞中TG,FFA含量(P＜0.01),减少细胞内脂滴数量,HQS-L亦可降低FFA含量(P＜0.05),此外,HQS-H可显著下调SREBP-1c,ACC1,FAS,SCD1 mRNA的表达(P ＜0.05,P＜0.01),HQS-M亦可下调SREBP-1c,FAS,SCD1 mRNA的表达(P＜0.05),对ACC1 mRNA表达具有一定程度的抑制.结论:HQS可能通过抑制SREBP-1c的表达,减少脂质合成,改善HepG2细胞胰岛素抵抗.
关键词： 黄芪散有效部位群 脂毒性 胰岛素抵抗 HepG2细胞 固醇调控元件结合蛋白-1c -
沙苑子总黄酮对肾阳虚高脂血症模型大鼠血脂、甘油三酯合成途径的影响
目的 探讨沙苑子总黄酮(TFS)对肾阳虚高脂血症的治疗作用及其对肝脏甘油三酯(TG)合成途径的影响.方法 10周龄雌性SD大鼠,按体重随机区组法分为6组,即假手术组,模型组,雌激素组和TFS高、中、低剂量组,每组10只.双侧卵巢切除手术并连续给予6周高脂饲料复制肾阳虚高脂血症大鼠模型.假手术组和模型组灌胃生理盐水(10 mL/kg),雌激素组灌胃戊酸雌二醇(0.2 mg/kg),其余分别灌胃TFS 28.5、57、114 mg/kg,持续给药8周.检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),酶免法检测肝脏脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性和甘油三磷酸酰基转移酶(GPAT)、肉毒碱棕榈酰转移酶-1α(CPT-1α)、乙酰辅酶A氧化酶(ACO)水平,免疫组化法检测肝脏固醇调控元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)蛋白表达.结果 与模型组相比, TFS高剂量组大鼠血清TG、TC、LDL-C水平显著降低(P<0.05,P<0.01),血清HDL-C水平显著升高(P<0.05);肝脏ACC活性和GPAT水平显著降低(P<0.01,P<0.01),ACO、CPT-1α水平显著升高(P<0.01,P<0.05);肝细胞膜SREBP-1c蛋白表达量显著降低,肝细胞核PPARα蛋白表达量显著增加.结论 实验结果表明TFS具有良好的调节血脂代谢的作用,其作用机制可能是通过抑制肝脏SREBP-1c表达,降低TG合成途径中限速酶FAS、ACC、GPAT的活性及水平;上调PPARα蛋白表达,提高脂肪酸β氧化途径中ACO、CPT-1α的表达水平,两者共同发挥作用抑制肝脏中TG的合成,达到调脂作用.
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胰岛素抵抗大鼠肝脏SREBP-1c mRNA表达及罗格列酮的干预作用
目的 探讨固醇调控元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)在胰岛素抵抗(IR)发病中的作用及罗格列酮(RSG)的干预机制.方法 将27只大鼠适应性喂养1周后随机分为对照组、模型组及观察组各9只,模型组及观察组均予高脂饲料喂养8周建立IR模型,对照组予普通饲料喂养8周;其后观察组予RSG 3 mg/(kg·d)+生理盐水至2 ml灌胃,模型组和对照组均予2 ml生理盐水灌胃.三组均同前喂养6周后取静脉血测定空腹胰岛素、空腹血糖、TG、游离脂肪酸(FFA)、TNF-α、瘦素,计算胰岛素敏感指数(ISI);处死动物后测定体脂比,取肝脏组织采用RT-PCR法检测SREBP-1c mRNA表达.同时对相关指标进行Pearson相关分析.结果 SREBP-1c mRNA表达水平观察组为0.75±0.06、模型组为0.92±0.05、对照组为0.72±0.03,观察组及对照组均显著低于模型组,P均<0.01.Pearson相关分析显示,SREBP-1c mRNA与TG(r=0.802,P<0.01)、FFA(r=0.666,P<0.01)、TNF-α(r=0.749,P<0.01)、瘦素(r=0.708,P<0.01)、体脂比(r=0.495,P<0.01)均呈明显正相关,与ISI(r=-0.677,P<0.01)呈负相关.结论 SREBP-1c mRNA过表达与IR发生有关,RSG可能通过降低SREBP-1c mRNA表达改善IR和脂代谢紊乱;此为IR及相关疾病的治疗提供了新的靶点.
关键词： 胰岛素抵抗 固醇调控元件结合蛋白-1c 罗格列酮 瘦素 肿瘤坏死因子-α
